人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

【目的】构建表达人细胞周期蛋白Dl及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段，克隆到pGEM-T easy载体上。测序鉴定后切下相应的片段，连接到表达载体pET-22b( )上，重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3)，使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定表达蛋白。【结果】 用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌，Western blot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】 本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体，后两在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白．     

caveolae 、caveolin—1与恶性肿瘤

细胞质膜上富含胆固醇和鞘脂的微结构域rafts与膜蛋白caveolin-1结合后细胞内凹陷，形成烧瓶状的caveolae.cavelae和caveolin-1在许多生理、病理活动中起重要作用。caveolin-1在恶性肿瘤发生、发展的方面、多环节上发挥着关键的调控作用。对于大多数类型的肿瘤细胞增殖、凋亡和侵袭转移均起负向调控作用，但在前列腺癌的研究中，出现了相反的结果。在恶性肿瘤中的研究值得进一步深入。     

磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白-1的临床应用

临床判断宫颈成熟度一般用宫颈评分(Bishop评分)结合孕妇自述作出判断,没有相应的实验室指标。检测宫颈分泌物中磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)正是弥补了这一不足之处。     

食管癌淋巴结转移特点及临床意义

为了解食管癌的淋巴结转移特点及对预后的评价，指导合理的淋巴结清扫范围，对150例单纯手术治疗的食管癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果：食管癌淋巴结转移率为48．0％，影响淋巴结转移的因素主要为肿瘤浸润深度及肿瘤的分化程度，和肿瘤的长度无关。有淋巴结转移的5年生存率为11．8％，明显低于无淋巴结转移的患者(48．6％)。提示淋巴结转移是影响食管癌切除后患者预后的主要因素，对不同部位的食管癌应采取不同的淋巴结清扫范围，中、上段食管癌应行颈、胸、腹部淋巴结清扫，下段食管癌应行胸、腹部淋巴结清扫。     

决定干扰素疗效的宿主因子

小鼠Mx基因的人型基因为MxA(也有MxB，但MxA的功能近似于Mx)，它普遍存在于广大的动物界(不仅是哺乳类，禽类鱼类亦均有之)，系IFN诱导基因之一。当Ⅰ型IFN(α、β、ω)与细胞表面IFN受体结合时，便立即激活细胞内信号传导途径，其最终信号干扰素     

重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率族蛋白-1水平的时相变化及意义

目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素19(IL-19)和高迁移率族蛋白-1(HMGBl)水平的时相变化，探讨HMGBl在SAP病程中的意义。方法采用胰管逆行灌注5％牛磺胆酸钠的方法复制大鼠SAP模型。随机分为正常对照组(N组，n=8)、假手术组(Sham组，n=8)和重症急性胰腺炎组(SAP组，n=80)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组动物血清TNF-α、IL-1β。用Westernblot法检测血清HMGBl水平。结果 SAP组大鼠血清TNF-α和IL-1β在建模后迅速升高，约在4～6h达高峰，之后迅速下降，在建模12h即降至接近正常水平，一直维持至24和48h。SAP组大鼠血清HMGB1水平在建模后12h开始有明显升高，至24和48h仍维持在较高水平。结论 HMGB1可能作为晚期炎症因子参与了SAP的全身炎症反应。     

烧伤患者应用亚胺培南/西司他丁钠盐或头孢哌酮后部分炎症介质水平的改变

目的　观察应用亚胺培南 /西司他丁钠盐 (IPM)或头孢哌酮 (CPZ)治疗烧伤感染患者后其部分血浆炎症介质水平的变化及差异。　方法　选择 13例革兰阴性杆菌感染的烧伤患者 ,其中7例应用IPM(IPM组 ) ,6例应用CPZ(CPZ组 )。于用药前及用药后 2、12、2 4、4 8、72h抽取静脉血 ,检测血浆内毒素 /脂多糖 (LPS)、肿瘤坏死因子α(TNF α)和白细胞介素 6 (IL 6)水平的变化 ,并进行相关性分析。结果　用药后 2h两组患者血浆LPS水平升高 ,其中CPZ组较用药前升高了 (13.95±10 .2 9)pg/ml( P <0.0 5),升高幅度大于IPM组 ,随后逐渐降低。CPZ组用药后 2hTNF α水平为(0 .86± 0 .16 )ng/ml,明显高于用药前 [(0 .38± 0 .15 )ng/ml]及IPM组 [(0 .4 7± 0 .13)ng/ml](P <0.0 1)。两组患者用药后各时相点血浆IL 6水平与用药前比较及组间比较 ,差异均无显著性意义 (P >0.0 5)。两组患者TNF α水平与LPS、IL 6水平呈显著正相关 (P <0.0 0 1～ 0.0 1)。结论　应用不同种类抗生素治疗革兰阴性杆菌感染的烧伤患者时 ,可诱导细菌释放LPS、TNF α,其释放量存在一定差异。TNF α的产生与LPS、IL 6的释放存在相关性。