甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者的治疗作用及对相关细胞因子的影响

目的: 研究甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)对活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疗效,探讨该药治疗类风湿关节炎的免疫学机制,了解MTX对RA患者血清中Th1/Th2型细胞因子的作用,为临床MTX治疗RA提供理论依据.方法:入选30例活动性RA患者,每周1次口服MTX(首次7.5 mg, 每周递增2.5 mg至15 mg ),疗程24周.采用美国风湿病学会(ACR)疗效评定标准,采用酶联免疫吸附双抗夹心法(ELISA)检测健康对照组以及RA患者MTX治疗前后血清中的细胞介素IL-1β,IL-6,IL-10,肿瘤坏死因子TNF-α和INF-γ浓度.结果: (1)MTX治疗第2周ACR20达到23%(7/30), 至24周时ACR20上升至70%(21/30),ACR70也升至10%(3/30).临床病情活动性指标(如晨僵、红细胞沉降率、压痛关节数、肿胀关节数、休息痛、患者及医生评价)较治疗前均有显著改善.(2) RA患者血清中的炎性细胞因子IL-6(46.83±35.81 vs. 20.92±17.98,P=0.028),TNF-α(162.52±107.63 vs. 18.32±14.36,P=0.001),INF-γ(67.79±43.76 vs. 35.78±27.51,P=0.004)等的水平均高于健康对照组,且差异具有统计学意义.抗炎性细胞因子IL-10的水平低于健康对照组(46.17±26.70 vs. 47.21±28.94),但差异无统计学意义(P=0.887).(3) MTX治疗RA后血清中Th1型细胞因子与治疗前相比,IL-1β(7.47±7.33,P=0.265),IL-6(26.01±25.64,P=0.025),INF-γ(41.53±13.49,P=0.015),TNF-α(123.36±89.61, P=0.018)等水平均明显降低,而Th2型细胞因子IL-10的水平明显提高(71.76±41.01,P=0.02).结论:MTX治疗活动性RA起效早,疗效显著.并且MTX可以下调RA患者血清中IL-1β,IL-6,TNF-α和INF-γ水平,同时上调IL-10水平,抑制了Th1型细胞因子的炎症作用,增强了Th2型细胞因子的效应,从而抑制或控制了RA的病情发展.     

致青少年脱发的生活方式原因探析及预防

目的拟通过探析生活方式源性脱发原因,为青少年脱发人群提出建议,从而减少此类疾病的发生。方法总结古今医家对脱发的认识,分析导致脱发的生活方式,并从改变生活方式角度对青少年脱发人群提出指导性意见。结果归纳得出青少年在饮食、起居、情志、劳倦、卫生等方面的生活方式异常,可导致多种类型的脱发。结论青少年需改变不良生活方式,应清淡饮食、减少熬夜、调畅情志、加强运动、减少染发烫发等,以减少脱发现象的发生。     

Box-Behnken法优化热毒宁注射液栀子浸膏带式干燥工艺

采用Box-Behnken响应面法,优选热毒宁注射液中栀子浸膏的带式干燥工艺.在单因素实验的基础上,采用3因素3水平Box-Behnken实验设计对热毒宁注射液栀子浸膏的干燥工艺参数进行优选.以干燥温度、干燥时间、进料速度为自变量,以栀子苷含量为因变量,试验数据进行二项式拟合,建立栀子苷含量与各自变量之间的数学关系,应用Design-Expert 8.0.6分析实验数据,预测所得最佳干燥参数为干燥温度98.5℃,干燥时间89 min,进料速度99.8 r·min-1.在此条件下,栀子苷质量分数预测值为563.307 mg·g-1.采用该工艺参数进行3次验证实验,测得栀子苷平均质量分数为564.108 mg·g-1,与模型预测值接近.验证试验表明,确定的栀子浸膏的带式干燥工艺稳定可行,因此单因素实验与响应面法优化联用可以用于热毒宁栀子浸膏带式干燥工艺的优化分析.     

抗核小体抗体测定在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的　评价抗核小体抗体 (AnuA)对系统性红斑狼疮 (SLE)诊断的敏感性和特异性 ,并了解其与SLE活动性的关系及与其他自身抗体的关系。方法　用酶联免疫吸附 (ELISA)测定方法检测SLE患者、疾病对照组 (包括原发性干燥综合征、多发性肌炎、皮肌炎、系统性硬化症 )和正常对照组血清中的AnuA ,并记录SLE患者的各种临床表现及实验室指标 ,分析其与AnuA的关系。结果　 10 3例SLE患者中 6 9 9%血清AnuA阳性 ,6 6例疾病对照组仅 3 0 %阳性 ,30名正常对照组全部阴性 ;SLE组患者AnuA阳性率显著高于疾病对照组和正常对照组 (P <0 0 1) ,AnuA在SLE中检测的敏感性和特异性分别为 6 9 9%和 97 9%。AnuA阳性组的SLE患者肾损害、皮肤损害的发生率(6 1 1%、70 8% )明显高于AnuA阴性组 (2 9 0 %、32 3% ) (P <0 0 5 ) ;AnuA阳性组与AnuA阴性组相比 ,在年龄、性别、病程上差异无显著性 (P >0 0 5 )。AnuA滴度的高低与SLE患者的SLEDAI评分有明显相关性 (r=0 2 82 ,P <0 0 5 )。抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、快速狼疮因子 (DNP)、抗组蛋白抗体 (AHA)阴性的SLE患者AnuA的阳性率分别为 6 5 6 %、6 8 0 %、6 3 9%、6 4 1%。结论　AnuA对SLE诊断的敏感性高、特异性强 ;它与SLE疾病活动性密切相关 ,对抗dsDNA抗体、Sm、DNP及AHA     

白芍总苷对腹主动脉结扎所致大鼠心肌重构的影响

目的:用白芍总苷作用于腹主动脉结扎所致的大鼠心肌重构整体动物模型,观察白芍中苷类成分的抗心肌重构作用,分析其可能的作用机理,以期为其抗心肌重构的可能临床应用提供实验依据。方法:不完全结扎大鼠腹主动脉造成压力超负荷型心肌重构模型,假手术组动物除不进行结扎外其他操作与模型动物相同。造模一周后取存活的造模动物随机分为模型对照组、阳性对照药卡托普利45mg/(kg.d)组、白芍总苷100mg/(kg.d)组、白芍总苷200mg/(kg.d)组。各组动物灌胃给予受试药物或等体积蒸馏水20mL/(kg.d),每天给药1次,连续给药30天。末次给药动物禁食不禁水12h,进行如下指标的检测:颈总动脉插管测定血流动力学相关指标;称取体重、摘取心脏测定左心室指数及全心指数。结果:腹主动脉不完全结扎1个月,模型组动物的左心室指数、全心指数明显升高(P<0.01),收缩压、平均压明显升高(P<0.05)。与模型对照组相比,阳性药卡托普利45mg/(kg.d)可使左心室指数、全心指数明显降低(P<0.01),收缩压明显降低(P<0.05);白芍总苷100mg/(kg.d)可使左心室指数明显降低(P<0.05);白芍总苷200mg/(kg.d)可使左心室指数、全心指数明显降低,平均压降低(P<0.05)。结论:白芍总苷灌胃给药具有一定的对抗腹主动脉结扎所致心肌重构作用,其中的芍药苷可能是白芍总苷抗心肌重构的主要药效学成分。     

鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与基因型关系的研究

目的 研究鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与基因型的关系.方法 采用组织平板法对42株鲍曼不动杆菌临床分离株的生物被膜形成能力进行半定量检测,并以肠杆菌基因间重复序列为引物的聚合酶链反应(enter-obacterial repetitive consensus PCR,ERIC-PCR)技术对其进行基因分型.结果 42株...     

草乌甲素对大鼠佐剂性关节炎的影响

目的:了解草乌甲素对佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性关节炎的抗炎镇痛作用。方法:用Freund's完全佐剂免疫Wistar大鼠建立AA动物模型,将其随机分为3组,即草乌甲素治疗2组(剂量分别为100μg.kg-1、50μg.kg-1)、注射用水组。于AA动物模型建立当天对实验大鼠进行处理,连续7d,并记录各组大鼠体重、右踝关节周径变化。治疗结束当天记录炎侧踝关节屈关节疼痛试验评分,用ELISA法检测大鼠血清的TNF-α、INF-γ、PGE2、β-内啡肽含量。结果:在100μg.kg-1治疗组中,草乌甲素在治疗第2天即可明显减轻关节肿胀(P<0.05),提高AA大鼠痛阈(p<0.05),显著降低AA大鼠PGE2含量、提升血清β-内啡肽含量(P<0.01);在50μg.kg-1治疗组中,草乌甲素从治疗的第3天起开始减轻关节肿胀(P<0.05),对大鼠PGE2含量、提升血清β-内啡肽含量作用较弱(P>0.05)。100μg.kg-1、50μg.kg-1草乌甲素均可降低AA大鼠血清TNF-α含量(P<0.01),但两者间无统计学差异;草乌甲素对血清INF-γ无明显影响(P>0.05)。结论:草乌甲素明显改善AA大鼠关节的肿胀,这可能与其降低血清TNF-α、PGE2含量有关;草乌甲素提高AA大鼠痛阈可能与降低血清PGE2,提升血清β-内啡肽有关。     

白芍总苷对不同药物诱导所致心肌重构的影响

目的:用白芍总苷作用于异丙肾上腺素(ISO)及左旋甲状腺素(L-thy)诱导所致的心肌重构整体动物150mg.kg-1.d-1组、白芍总苷300mg.kg-1.d-1组。各组动物灌胃给予受试药物或等体积蒸馏水20mL.kg-1.d-1,连模型,观察白芍中苷类成分的抗心肌重构作用,分析其可能的作用机理,以期为其抗心肌重构的可能临床应用提供实验依据。方法:(1)白芍总苷对ISO所致小鼠心肌重构的影响:小鼠皮下注射ISO 2mg.kg-1.d-1,连续7天,以造成心肌重构模型。动物随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性对照药美托洛尔60mg.kg-1.d-1组、白芍总苷左旋甲状腺素0.25mg.kg-1.d-1,连续9天,以造成心肌重构模型。动物随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性对照药卡托普利45mg.kg-1.d-1组、白芍总苷100mg.kg-1.d-1组、白芍总苷200mg.kg-1.d-1组。各组动物造模的同时灌胃给予受试药物或等体积蒸馏水20mL.kg-1.d-1,每天给药1次。末次给药后24h,称取体重,摘取续给药7天。末次给药24h后称取体重,摘取心脏称重并取血,离心获得血浆。进行如下指标的测定:左心室指数,全心指数,放免法测定血浆中环磷酸腺苷的水平。(2)白芍总苷对L-thy所致大鼠心肌重构的影响:大鼠腹腔注射平的明显升高(P<0.05)。灌胃给予阳性药美托洛尔60mg.kg-1.d-1可使左心室指数、全心指数明显降低(P<0.01),血浆中环磷酸腺苷水平降低(P<0.05);灌胃给予白芍总苷150、300mg.kg-1.d-1可明显降低全心指数(P<0.05),300mg.kg-1.d-1可明显降低左心室指数(P<0.05);白芍总苷300mg.kg-1.d-1具有降低血浆中环磷酸腺苷水平的作心脏称重,测定左心室指数、全心指数,颈总动脉插管测定血压及心率。结果:(1)白芍总苷对ISO所致小鼠心肌重构的影响:小鼠皮下注射异丙肾上腺素,连续7天,可以造成左心室指数、全心指数(P<0.01)、血浆中环磷酸腺苷水义;灌胃给予卡托普利45mg.kg-1.d-1可明显降低左心室指数、全心指数(P<0.05);白芍总苷200mg.kg-1.d-1灌胃给药可以降低左心室指数、全心指数、减慢心率(P<0.05),白芍总苷100mg.kg-1.d-1仅表现出一定的作用趋势。结论:用趋势,但不构成统计学意义。(2)白芍总苷对L-thy所致大鼠心肌重构的影响:大鼠腹腔注射左旋甲状腺素,连续9天,可以造成左心室指数、全心指数明显升高(P<0.01),心率明显加快(P<0.05),血压出现升高的趋势,但不构成统计学意白芍总苷灌胃给药具有一定的抗心肌重构作用,芍药苷可能是白芍总苷抗心肌重构的主要药效学成分。     

狗脊生、制品不同提取部位抗炎药效学实验研究

目的:研究狗脊生、制品的不同提取部位的抗炎作用。方法:研究其对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响,用狗脊生、制品的不同提取部位溶液对小鼠灌胃给药。用二甲苯造成小鼠急性炎症模型。研究其对小鼠的抗急性炎症作用。研究其对对大鼠棉球肉芽肿形成的影响,将棉球植入大鼠背部皮下形成肉芽肿,造成慢性炎症模型,用狗脊生、制品的不同提取部位溶液对大鼠灌胃给药,研究其对大鼠的抗慢性炎症作用。结果:狗脊生品正丁醇提取物组和狗脊生品的乙酸乙酯提取物组明显抑制了二甲苯所致的小鼠耳肿胀,狗脊制品正丁醇组和狗脊制品乙酸乙酯组的作用不明显。狗脊生品的乙酸乙酯提取物组明显抑制了大鼠的肉芽组织增生,狗脊生品正丁醇提取物组、狗脊制品正丁醇组、狗脊制品乙酸乙酯组的作用不明显。结论:狗脊具有一定的抗炎效果。狗脊生品正丁醇提取物组和狗脊生品的乙酸乙酯提取物组的作用比较明显。     

嗜肝细胞腺相关病毒载体的构建

HBV具有天然嗜肝性,其中由HBVpreS1基因编码的前S1(PreS1)抗原位于病毒外壳表面,是HBV嗜肝性的主要分子机制[1].重组腺相关病毒(rAAV)是目前常用的基因治疗载体.我们以腺相关病毒载体系统为基础,用PreS1的编码基因HBVpreS1替代腺相关病毒载体系统的Cap基因,构建出以PreS1为衣壳的重组腺相关病毒载体(rA AVHBVpreS1),旨在探索构建肝病基因治疗特异性载体,为肝病靶向基因治疗提供实验研究基础.