大鼠颌突外胚间充质细胞向骨骼肌细胞诱导分化和三维培养观察

目的：探讨体外诱导外胚间充质细胞向骨骼肌细胞分化的潜能，利用分化细胞构建组织工程骨骼肌模型。方法：取妊娠10．5d胎鼠颌突外胚间充质细胞，纯化后分别在含1、5、10mL／L体积浓度二甲基亚砜的DMEM／F12培养基中培养。相差显微镜下观察细胞的形态变化，成肌相关因子免疫组化鉴定细胞性质，将诱导后的细胞种植于胶原膜，并于培养3、6d后用光镜、扫描电镜观察细胞的生长情况。结果：培养3d后，外胚间充质细胞形态出现成肌样细胞变化，细胞变得大而扁平，培养5d后细胞出现管样结构。免疫组化鉴定显示：添加二甲基亚砜后，大部分细胞出现成肌相关因子的表达，其中5mL／L实验组效果最好，约75％的细胞转化为骨骼肌细胞。对照细胞形态未见明显改变，免疫组化鉴定未能诱导分化出骨骼肌细胞。种植于BAM膜后，细胞生长良好，并可形成复层结构。结论：二甲基亚砜可诱导外胚间充质细胞向骨骼肌细胞分化，最佳浓度为5mL／L；在BAM膜上分化细胞生长状态良好，说明该生物可降解膜是构建组织工程骨骼肌的适合材料。     

血压正常高值人群血液流变学变化特点及临床意义

目的研究血压正常高值人群的血液流变学特性及其临床意义。方法以8842例体检者为研究对象，按血压水平将其分为三组，正常血压组5221例，血压正常高值组1787例，高血压组1834例。分别测定乓总胆固醇（FC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL—C）、低密度脂蛋白（LDL—C）、血糖（GLU）和血液流变学的各项指标。结果血压正常高值组的TC、TG、LDL—C、GLU、全血高切粘度（μbH）、全血中切粘度（μbM）、全血低切粘度（μbL）、血浆粘度、红细胞压积（HCT）、红细胞刚性指数（ERI）均高于正常对照组（P〈0．05），HDL—C低于正常组（P〈0.05），红细胞聚集指数（EAI）和变形指数（TK）两组差异无统计学意义。高血压组的TC、TG、LDL—C、GLU、血浆粘度、ERI、TK均高于正常高值组，HDL—C、μbH、μbM、μbL、HCT、EAI两组差异无统计学意义。结论不仅高血压患者存在高粘血症，在血压正常高值阶段就已经存在明显血液流变学的改变，血液流变学改变可能参与了高血压及其并发症的发生及发展。     

异种角膜基质材料的制备和体外细胞种植的实验研究

目的研究异种角膜基质生物支架材料的制备方法和体外种植兔角膜基质细胞后细胞在材料上的生长、增殖情况。方法将York猪全层角膜用去垢剂联合0．25％胰蛋白酶、DNA-RNA酶祛除猪角膜基质细胞并冻干制备成支架材料；将兔角膜组织块用胶原酶消化后，用含10％血清的DMEM培养液体外培养，并做波形丝蛋白，角蛋白免疫组织化学染色检测；将培养的兔角膜基质细胞的2～3代接种在材料上，培养5d后，做HE染色、扫描电镜观察。结果猪角膜基质片经脱细胞处理后，细胞成分祛除干净并保留了角膜组织的三维网格状结构，网状间隙明显增大，利于细胞生长；体外培养的兔角膜基质细胞波形丝蛋白染色为阳性、角蛋白染色为阴性；HE染色、扫描电镜结果显示兔角膜基质细胞在支架材料上生长、增殖良好。结论异源性角膜经祛脱细胞处理而获得的生物支架材料利于异种细胞的黏附和增殖，可进一步用于组织工程角膜的研究。     

复方薄荷脑注射液在肛肠病术后止痛效果的临床观察

自 1 999年 1 2月至 2 0 0 0年 1 2月 ,我院对 98例肛肠手术病人术后应用“复方薄荷脑注射液”局部浸润 ,术后仅2例因疼痛使用杜冷丁 ,其余 96例均无疼痛或口服一般止痛剂即可 ,术后长效止痛效果明显 ,现报告如下。1　临床资料　　使用复方薄荷脑注射液局部浸润 ,术后镇痛肛肠病 98例 ,男 4 7例 ,女 5 1例 ;年龄 2 0～ 67岁 ,平均年龄 4 4.6岁。2　用药方法　　复方薄荷脑注射液 ,每支 1 0ｍｌ(主要含薄荷脑 1 3ｍｇ ,利多卡因 80ｍｇ) ,天津市氨基酸公司人民制药厂生产。　　手术完毕后 ,根据手术创面的大小在创面深层周围作浸润麻醉 ,注射…     

CNTFR在面神经再生的表达变化及TGF—β、BMP—2的调控

目的：探讨睫状神经营养因子受体CNTFR在面神经切断后的蛋白表达及转化生长因子（TGF－β）及重组骨形成蛋白－2（rhBMP-2)对其的表达影响。方法：将面神经切断后分别注入TGF－β、rhBMP-2及生理盐水。取不同时期的面神经核组织切片标本,采用免疫组化染色和计算机图像分析仪对不同时期中面神经核CNTFR的表达进行定量分析。结果：面神经切断后,CNTFR在术后一天开始表达,一周后面神经元中CNTFR的含量达到最大。术后二周出现下调,术后一个月又有所提高。从而出现第二个高峰。此后逐渐下降。TGF－β处理组在面神经损伤后期CNTFR的表达高于生理盐水组。结论：面神经运动神经元损伤及再生过程中,内源性CNTFR的表达提高使神经元损伤的增加CNTF的摄入,减少了面神经元的死亡,为神经元的恢复及神经轴突的延伸具有促进作用。而TGF－β对CNTFR的表达具有一定的促进作用。对面神经核运动神经元起着间接的营养作用。     

大鼠血浆中山奈酚的HPLC测定法及其在药物动力学研究中的应用

目的建立测定大鼠血浆中山奈酚质量浓度的HPLC法,并用于山奈酚经灌胃给药后在大鼠体内药动学研究。方法大鼠灌胃给予200 mg.kg-1山奈酚混悬液,于给药后不同时间采集血样,以非那西丁为内标,VC为抗氧剂,采用2 mol.L-1盐酸,80℃水浴水解30 min后用乙醚萃取的方法处理血浆样品。采用RP-HPLC法测定山奈酚血药质量浓度,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.05%磷酸溶液(体积比40∶60),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为370 nm,柱温为40℃。结果血浆中内源性物质对山奈酚测定无干扰,线性范围为0.050～10 mg.L-1,r=0.998 5,回收率、准确度及日内、日间精密度均符合生物样品测定要求,定量下限(LLOQ)为50μg.L-1。山奈酚主要药动学参数为AUC0-t=129.2 mg.h.L-1,ρmax=7.39mg.L-1,tmax=9.0 h,t1/2=8.3 h。结论该方法简便、快速、重复性好,适用于山奈酚大鼠血药质量浓度测定及体内药动学研究。     

巨舌症伴严重颌骨畸形一次性手术治疗5例报道

目的 探讨采用一次手术完成舌、唇、下颌骨畸形整复治疗的可行性及疗效.方法 5例巨舌畸形患者,男女比例为2∶3,平均年龄24岁.其中淋巴管瘤4例,淋巴血管瘤1例.治疗方式皆采用手术治疗,术前行三维重建CT了解骨畸形情况,手术采用三步法:第一步舌部设计切口切除舌肿瘤,重建舌外形;第二步拔除移位患牙,于颏孔后设计梯形截骨区域,将下颌骨前部后退并后旋恢复牙列对应关系,解除开口畸形;第三步根据新形成的固有口腔修整舌外形,下唇行"V"形切除解除唇外翻畸形.结果 5例患者整复效果良好,舌、唇、下颌骨畸形全部修复,面形恢复正常,口裂关闭.结论 一次手术整复严重巨舌畸形是可行的,且可获得良好治疗效果.     

大鼠牙胚同种异体异位移植的组织学观察

目的:观察牙胚在同种异体大鼠体内不同部位的发育情况,为进一步组织工程化牙齿的构建探寻合适的体内生长环境。方法:将封闭群SD仔鼠第一磨牙牙胚分别植入SD成年大鼠肾被膜下、肠系膜内、腹膜外间隙、腹腔内和口腔黏膜下,3周取材,HE染色,观察移植牙胚的发育情况。结果:牙胚在肾被膜下和肠系膜内生长良好,釉质和牙髓牙本质复合体继续发育,牙本质小管结构清晰可见;腹膜外间隙和腹腔内牙胚均未进一步发育,且牙髓腔内和移植物周边淋巴细胞浸润明显;口腔黏膜下未回收到移植物。结论:封闭群SD大鼠肾被膜下和肠系膜内环境有利于同种异体牙胚的生长,可为组织工程化牙齿的体内构建提供新的发育环境。     

大鼠外胚间充质干细胞的体外生长特性及促进造血恢复的研究

目的:了解大鼠外胚间充质干细胞(EMSC)的生物学特性,探索体内输入EMSC能否促进照射动物造血功能的恢复。方法:取E11.5SD大鼠胚胎颌突,消化法培养获得外胚间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长状况,免疫组化鉴定细胞来源;雄性SD大鼠(180～220g)分为外胚间充质干细胞组(A组)、照射对照组(B组)、成纤维细胞组(C组)、正常对照组(D组),前三组给予60Coγ射线全身照射,剂量6.0cGy,动态观察大鼠外周血变化,并于第4周检测骨髓有核细胞数量;测定大鼠骨髓细胞粒—巨噬细胞(CFU-GM)形成能力;采用内源性脾结节法测定脾集落形成能力。结果:培养的细胞呈单层生长,成纤维状、长梭形、有2～4个突起,抗HNK1、Vi mentin、S-100、NSE染色阳性,抗GFAP、NF、MA染色阴性,证实为未分化外胚间充质细胞;体内植入EMSC能够明显促进大鼠放射后外周血白细胞和血红蛋白的恢复,增加骨髓有核细胞数,减少骨髓造血细胞的坏死、凋亡,促进骨髓细胞的CFU GM的形成率并能有效地支持造血细胞增殖、分化。结论:EMSC具有干细胞特征,能促进照射大鼠造血功能的恢复。     

大鼠面神经损伤后bal2的表达及意义

目的 :探讨ｂａｌ 2在大鼠面神经损伤的表达及神经切断后与神经凋亡样坏死的抑制作用 .方法 :采用原位杂交方法观察ｂａｌ 2在面神经损伤后随时间延长的动态变化并用图像分析测定ｂａｌ 2ｍＲＮＡ的强度 .结果 :面神经损伤后 1ｄ ,面神经运动神经元的ｂａｌ 2强度开始下降 ,1ｗｋ后开始恢复 .1ｍｏ后恢复正常 .结论 :ｂａｌ 2的表达与神经元的存活密切相关 ,对神经损伤后的神结元起保护作用 .大鼠面神经损伤后bal2的表达及意义@聂鑫 @金岩 @王健 @甄志强