稳定表达hTERT/Luc的小鼠黑色毒瘤肺转移模型的建立

目的 建立稳定共表达荧光素酶基因和人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小鼠黑色素瘤B16细胞系,并通过尾静脉注射的方式建立小鼠肿瘤肺转移模型.方法 利用DNA重组技术将hTERT基因和荧光素酶基因Luc定向插入到真核表达载体,构建真核表达质粒pIRES-neo-hTERT和pIRES-hyg3-Luc,利用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000共转染小鼠黑色素瘤B16细胞,经G418及潮霉素B加压筛选出稳定转染的细胞株.应用Western blot法及免疫荧光法检测hTERT和Luc基因在B16细胞中的表达;将稳定共表达hTERT和Luc的B16-hTERT/Luc细胞株通过尾静脉注射的方式接种雄性C57BL/6小鼠建立肿瘤肺转移模型,并通过活体成像技术检测小鼠肺部肿瘤的生长.结果 建立了稳定共表达hTERT和Luc的小鼠黑色素瘤B16单克隆细胞株B16-hTERT/Luc,经检测hTERT基因和荧光素酶基因Luc在单克隆细胞株中的表达分别为84％和98％.通过尾静脉注射的方式成功建立了小鼠肿瘤肺转移模型,应用活体成像技术能方便地检测到B16-hTERT/Luc肿瘤在小鼠体内的生长情况.结论 成功建立了可用于活体成像技术检测的稳定表达hTERT的小鼠黑色素瘤肺转移模型.     

HILIC-ELSD法测定岩藻聚糖硫酸酯中岩藻糖

目的 建立一种简便、高效、准确的测定岩藻聚糖硫酸酯中岩藻糖的方法。方法 采用超声处理(300 W 100%,20 ℃,20 min);三氟乙酸(4 mol/mL)水解(110 ℃、2 h);亲水作用色谱-蒸发光检测(HILIC-ELSD)法检测,Waters XBridge^TM Amide(150 mm×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-水-氨水(90:10:0.2),体积流量1 mL/min,柱温60 ℃。结果 岩藻糖的线性范围为0.100 4~1.004 mg/mL(r=0.999 4),平均加样回收率95.22%(n=6,RSD=1.16%)。结论 该方法简便、快速、准确,为岩藻聚糖硫酸酯的定量分析和质量评价研究提供了依据。     

骨科手术后下肢感觉及功能异常1例

1病例资料 患者,女,55岁。术前诊断：患者由于车祸伤及左腿左膝交叉韧带断裂,于当地医院治疗2个月余未见好转而来本院就诊,具体治疗及用药不详。 术前访视询问患者病史,自述偶有血压升高、胸闷,查体：一般状况中,皮肤无苍白,口唇无发绀,颈静脉无怒张,听诊心肺未闻明显异常,腹软肝脾未及,脊柱生理弯曲,无压痛叩击痛,双下肢无浮肿,未诉皮肤感觉异常及肌肉无力,     

116例慢性阻塞性肺疾病急性加重期病原菌构成及耐药性分析

目的分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）呼吸道感染病原菌构成及耐药情况。方法回顾分析116例AECOPD患者的痰细菌培养及药敏结果。结果 116例AECOPD患者痰细菌培养分离出52株致病菌。其中G-菌28株（53.85%）、G＋菌18株（34.62%）、真菌6株（11.54%）。G-菌对二、三代头孢类抗生素耐药率高,对头孢曲松的耐药率达66.7%,对头孢噻肟的耐药率高达100.0%。G＋菌对青霉素、青霉素与酶的抑制剂的复合制剂、头孢类、喹诺酮类、红霉素、复方新诺明的耐药性高,均〉40%,对阿米卡星敏感性好,耐药率〈25%,对于万古霉素无耐药。结论 AECOPD感染以G-菌为主,对二、三代头孢类抗生素耐药率高,对四代头孢类、碳青酶烯类抗生素敏感。G＋菌耐药率普遍较高,对阿米卡星敏感,对万古霉素高度敏感。真菌对两性霉素B高度敏感。     

少见、罕见疾病所致门静脉高压症的诊断与治疗

少见、罕见疾病所致门静脉高压症多属于窦前性(肝前)或肝后性门静脉高压症。因多数为非肝硬化门静脉高压症,故肝静脉压力梯度不能准确反映其门静脉压力,临床诊治存在较大困难。此类疾病种类较多,重点介绍了6种少见、罕见疾病所致门静脉高压症的机理和治疗进展,并就目前的治疗现状进行了总结,希望对提高临床医生对此类疾病的认识有所帮助。     

树突状细胞的非特异性免疫功能降低对HBV、HCV清除及细胞毒性T淋巴细胞应答无影响

目的 观察HBV、HCV感染者树突状细胞(DC)的非病毒特异性免疫功能状态与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫应答以及病毒清除的关系。方法 对25例成人慢性HBV和HCV合并感染者进行了间隔8年的两次调查、依据临床转归分为HBV和HCV均清除组(A组)14例、单独HCV清除者(B组)6例，单独HBV消除者(C组)3例，HBV和HCV均未清除者(D组)2例，对照组(N组)为同一地区健康献血员11例。体外分离培养DC，检测其表型及抗原摄取功能、刺激异体淋巴细咆增殖能力和4组感染者的CTL免疫应答情况。结果 B、C、D组与A组、N组比较，DC的非病毒特异性免疫功能降低，表现为CD86表达的降低、刺激异体淋巴细胞增殖的能力下降以及抗原摄取能力降低。A组对HBV和HCV的4条抗原表位多肽均有较高的CTL应签率(11／12)；B组对HCV的两条抗原表位多肽均有应答(5／5)，但无对HBV两条表位多肽均应签者、仅有1例对P2有反应；C组对HBV的抗原表位多肽均有应答，但无对两条HCV表位多肽均应答者；D组及N组对HBV或HCV所有实验多肽均无应答。结论 HBV和HCV的清除与病毒特异性的CTL应答相关。HBV和(或)HCV持续存在可能是导致DC功能异常的原因。     

利用组织芯片检测水通道蛋白1在乳腺癌组织中的表达

目的检测水通道蛋白1（AQP1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法购买含有32对乳腺癌组织标本及癌旁正常乳腺组织标本的组织芯片,应用免疫组织化学方法检测AQP1的表达。结果乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织中AQP1的平均表达率分别为70.56±14.71%、18.64±8.54%,二者存在显著差异（P〈0.05）。结论 AQP1在乳腺癌组织中表达增高,AQP1可能与乳腺癌生长、转移有关。     

彩色多普勒超声对甲状腺结节的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声对临床甲状腺良恶性结节的诊断价值.方法 对2007-2010年105例经手术病理证实的甲状腺结节患者资料进行回顾性分析,总结其声像图特征.结果 105例患者中,良性结节71例,甲状腺癌34例,超声诊断符合率81.9%,误诊18例(17.1%).结论 彩色多普勒超声是诊断甲状腺结节的首选影像学检查...     

彩色多普勒超声在甲状腺结节良恶性鉴别诊断中的应用

目的 探讨彩色多普勒超声在甲状腺结节良恶性鉴别诊断中的应用价值,为甲状腺结节的定性诊断提供可靠依据,减少漏误诊.方法 回顾性分析105例经手术病理证实的甲状腺结节患者的超声资料,并总结其声像图特征.结果 105例病例中,病理诊断良性结节71例,甲状腺癌34例,超声诊断符合率81.9%,误诊18例(17.1%).良恶性结...     

小儿癫痫持续状态70例临床分析

目的分析儿童癫痫持续状态的临床特征及其治疗。方法对70例小儿癫痫持续状态的诱因、病因、发作类型、辅助检查、治疗及预后做回顾性分析。结果经过及时合理的治疗后,62例癫痫持续状态患者经积极处理可较快控制,8例死亡。结论严格遵守和执行癫痫持续状态的治疗原则,对症支持治疗和抗癫痫药物的联合应用是抢救持续状态成功的关键。