海兔素对酒精性肝损伤大鼠NF-кB、iNOS及COX-2的影响

目的通过观察酒精性肝损伤大鼠NF-кB p65、i NOS和COX-2的表达,探讨海兔素对酒精性肝损伤的保护机制。方法 (1)8周龄雄性Wistar大鼠,按体重随机分为6组(空白对照组,酒精模型组,阳性对照组,海兔素低、中、高剂量组),每组10只。各组均采用灌胃方式给药,每日一次,连续6周。除空白对照组每日灌胃生理盐水外,其余各组前2周每日给予50%乙醇8 ml/kg,后4周提高至12 ml/kg。海兔素低、中、高剂量组每日还同时分别给予海兔素50、100和150 mg/kg BW,阳性对照组则每日给予200 mg/kg甘草酸二铵。实验结束后ELISA法检测大鼠血浆中i NOS和COX-2活性。(2)8周龄成年雄性Wistar大鼠45只,按体重随机分为3组,空白对照组每日生理盐水灌胃,酒精模型组和海兔素组每日给予50%乙醇8 ml/kg灌胃2周,然后将剂量提高至12 ml/kg,持续6周。海兔素组每日酒精灌胃前4 h,先给予150 mg/kg海兔素灌胃。8周后经二步胶原酶技术分离培养获取大鼠原代肝细胞,每组大鼠各获得一组原代肝细胞。Western Blot法检测大鼠原代肝细胞NF-кB p65蛋白的表达。结果酒精模型组i NOS与COX-2活性均明显高于空白对照组(P<0.05);与酒精模型组相比,海兔素低、中、高剂量组i NOS、COX-2活性均有所降低(P<0.05)。并且海兔素高剂量组i NOS及COX-2的活性与阳性对照组相比差异无统计学意义。酒精模型组NF-кB p65蛋白的表达明显高于空白对照组(P<0.05),是空白对照组的1.5倍;而海兔素干预组NF-кB p65蛋白表达明显被抑制(P<0.05),与酒精模型组相比,下降52.7%。结论海兔素可通过抑制NF-кB、i NOS及COX-2的表达,对酒精性肝损伤起到一定的保护作用。     

原花青素对肢体缺血再灌注后大鼠肠黏膜屏障功能的保护作用

目的探讨原花青素对大鼠肢体缺血再灌注(limb ischemia reperfusion,LIR)后肠黏膜屏障功能的保护作用。方法健康成年SD大鼠21只,随机分为三组:假手术组(n=7),肢体缺血再灌注组(n=7)和原花青素组(n=7);原花青素组给予原花青素[100 mg/(kg·d)]预处理7 d,假手术组和肢体缺血再灌注组给予等量色拉油,预处理7 d。肢体缺血再灌注组和原花青素组采用止血带结扎大鼠左后肢3 h后再灌注18 h的方法建立肢体缺血再灌注动物模型。假手术组行止血带结扎操作后立即剪断止血带。测定各组动物的血清二胺氧化酶(DAO)活性和前列环素(PGI2)含量,以及肠组织的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量。结果与假手术组比较,肢体缺血再灌注组大鼠血清DAO活性显著升高(P<0.05),血清PGI2含量显著增多(P<0.01),肠组织中sIgA含量显著减少(P<0.05);与肢体缺血再灌注组比较,原花青素组大鼠血清DAO活性显著降低(P<0.05),血清PGI2含量显著减少(P<0.01),肠组织中sIgA含量显著增加(P<0.05)。结论原花青素对LIR所致的肠黏膜屏障功能损伤具有保护作用。     

诱导型一氧化氮合酶/环氧合酶2在女性压力性尿失禁中的研究进展

诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)及各自的催化产物一氧化氮和前列腺素对维持机体的各种病理生理活动有重要作用,它们参与了免疫炎症反应、缺血、损伤、肿瘤等相关疾病的发生、发展,两者对人类下尿路的生理病理活动起调控作用。女性压力性尿失禁(female stress urinary incontinence,FSUI)是一种严重影响女性身心健康及生活质量的常见疾病。越来越多的研究表明,i NOS/COX-2与FSUI的发病密切相关。文中综述了i NOS/COX-2在FSUI中可能扮演的角色及机制,这不仅为疾病的治疗提供了一个重要靶点,也为新药的开发和研究提供了理论基础和研究思路。     

荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比对

目的 分析荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶（XDH/XO）的mRNA的相对表达量的差异,其结果具有一定的参考价值。方法 提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR 与半定量PCR 进行相对定量检测,结果做比对分析。结果 两种检测方法的特异性没有差异,荧光定量PCR较半定量PCR灵敏性高,均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR 与半定量PCR检测结果有一定差异。结论: 荧光实时定量PCR优于半定量PCR 法。     

抗甲状腺过氧化酶抗体与早期反复自然流产的相关性

目的:研究和探讨抗甲状腺过氧化酶抗体与早期反复自然流产的相关性分析。方法:选取我院收治的80例反复自然流产患者(病例组)为研究对象,按照流产的不同时间段分为A组(40例,早期流产)和B组(40例,晚期流产),另取40例健康育龄妇女作为对照组,对比检测结果。结果:病例组反复自然流产患者TPO-Ab、TG-Ab水平及阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A组早期流产患者TPO-Ab、TG-Ab水平及阳性率显著高于B组晚期流产患者,差异有统计学意义(P<0.05);进行Logistic回归分析,结果显示仅TPO-Ab阳性结果具有统计学意义(P<0.05)。结论:抗甲状腺过氧化酶抗体与早期反复自然流产有密切关系,在临床作业中,仔细观察孕妇妊娠期血清抗甲状腺过氧化酶抗体水平,以便早期发现孕妇不良妊娠结局。     

DNA条形码技术在河北省坝上地区夜行鼠鉴定中的应用

目的以河北省坝上地区捕获的夜行鼠为对象,应用DNA条形码技术进行鼠类鉴定。方法在河北省坝上地区采集鼠肝脏标本,并保存整只鼠,制作标本,提取DNA,采用通用引物PCR法扩增细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,并测序。将测序结果与Gen Bank中其他鼠类的DNA条码进行Blast比对,并构建分子进化树。结果 36份样本均能通过PCR扩增出特异性COⅠ基因条带,所构建的分子进化树结果与形态学鉴定结果有所不同,经头骨鉴定,进化树结果正确无误,更正形态学鉴定结果。其中2只夜行鼠未能在Gen Bank中找到同源性较高的鼠类基因,且头骨受到严重损坏,暂无法确定鼠种。结论 DNA条形码技术能够对鼠类进行有效的物种鉴定。     

早产儿呼吸暂停的药物治疗

呼吸暂停是早产儿的常见病,在<1500 g早产儿发生率超过50%。对早产儿呼吸暂停(AOP)的治疗包括触觉刺激、经鼻持续气道正压通气(n CPAP)和呼吸兴奋性药物应用等。近年来甲基黄嘌呤类药物,尤其是咖啡因的使用已成为AOP的一线药物。咖啡因应用于早产儿除减少AOP,还能改善呼吸系统疾病和神经发育预后,减少支气管肺发育不良(BPD)的发生。     

虾青素对过氧化氢诱导胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响

目的观察虾青素通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶/活性氧(ROS)信号通路对过氧化氢(H2O2)诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响。方法实验分为空白组、模型组和实验组,每组8个复孔;实验组HTR-8/SVneo细胞预先以10 nmol·L^-1虾青素处理24 h,之后实验组和模型组细胞均以250μmol·L-1H2O2作用24 h;空白组未进行任何药物干预。以噻唑蓝(MTT)法检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖情况,以DCF-DA荧光染色检测各组HTR-8/SVneo细胞内ROS水平,检测各组HTR-8/SVneo细胞培养上清中乳酸(LDH)及氧化应激指标含量,以蛋白质印迹法检测各组细胞NADPH氧化酶4(NOX4)、p22phox蛋白表达情况。结果干预后24 h,空白组、模型组及实验组HTR-8/SVneo细胞内ROS荧光强度值分别为2.76±0.43,34.15±2.34,15.61±1.85,LDH分别为(756.24±31.05),(1785.46±34.69),(1235.26±26.75)U·L^-1,超氧化物歧化酶(SOD)分别为(23.56±2.24),(10.04±2.02),(15.16±3.08)U·mg^-1,丙二醛(MDA)分别为(0.46±0.14),(0.96±0.21),(0.68±0.13)U·mg^-1,Nox4蛋白相对表达量分别为0.32±0.04,0.89±0.06,0.64±0.03,p22phox蛋白相对表达量分别为0.15±0.03,0.75±0.04,0.49±0.02,模型组分别与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论虾青素对H2O2诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo氧化应激损伤具有保护作用,可能与干扰NADPH氧化酶/ROS信号通路活性有关。     

创伤性失血性休克对机体抗氧化水平影响的实验研究

目的探讨创伤性失血性休克(traumatic hemorrhagic shock,THS)对机体过氧化水平的影响。方法选择普通级新西兰兔11只,通过急性失血方式建立收缩压下降曲线,形成THS动物模型,在不同的休克时段测定收缩压基础值(T_1),当收缩压降至基础值2/3(T_2)、基础值1/2(T_3)、基础值1/3(T_4)时采集血样,采用酶联免疫吸附分析检测各位置血清过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)水平,并予以统计分析。结果 CAT:A组高于B组、B组高于C组、C组高于D组,T_1-T_2、T_2-T_3、T_3-T_4各组间无显著性差异(P>0.05),其余组间存在显著性差异(P<0.05);GSH-Px:A组高于B组、B组高于C组、C组高于D组,T_1、T_2间无显著性差异(P>0.05),其余组间存在显著性差异(P<0.05);T-AOC:各时间水平间无显著性差异(P>0.05)。结论选择收缩压下降曲线建立THS模型,THS发生过程对机体抗氧化酶CAT、GSH-Px具有显著性影响,可致CAT、GSH-Px活性显著下降,但对T-AOC无显著性影响,失血量与CAT、GSH-Px指标间存在显著相关性。