经穴推拿联合耳穴贴压在睡眠障碍患者中的应用

目的研究经穴推拿联合耳穴贴压在睡眠障碍患者中的应用价值。方法选取2021年12月至2022年12月在连云港市中医院中医门诊接受治疗的82例睡眠障碍患者进行随机对照试验, 根据随机数字表法将其分为对照组和研究组。对照组男20例、女21例, 年龄(39.87±12.32)岁, 行耳穴贴压;研究组男18例、女23例, 年龄(40.02±12.35)岁, 行经穴推拿按摩联合耳穴贴压。对照组和研究组均有1例患者因失访剔除, 最终80例患者完成研究, 每组40例, 对比两组患者治疗首日、随访4周时的睡眠指标及睡眠质量。统计学方法采用χ2检验、t检验。结果随访4周时, 两组患者总睡眠时间、慢波睡眠时间、睡眠潜伏期、睡眠效率、觉醒次数、入睡后觉醒时间均较治疗首日有所改善, 研究组均优于对照组[(439.68±21.23)min比(426.23±20.13)min、(5.98±1.09)min比(5.49±1.03)min、(20.31±3.19)min比(21.89±3.20)min、(86.87±3.46)%比(84.96±3.26)%、(1.50±0.19)次比(1.62±0.23)次、(5.46...     

双侧延髓内侧梗死1例报告及分析

<正>延髓最常见的病变部位为延髓背外侧(wallenberg syndrome),延髓内侧或旁正中病变(dejerine syndrome)少见,双侧延髓内侧病变则罕见,我们将临床遇到的1例双侧延髓内侧梗死报道如下。1临床资料患者,女,64岁。因头晕伴右侧肢体活动不灵2 d,加重7 h于2016年5月2日入院。该患入院前2 d无明显诱因出现头晕,伴天旋地转感,不敢睁眼,伴恶心、呕吐,呕吐物     

伯氏疟原虫静息巯基氧化酶的生物信息学分析和体外酶活检测

目的克隆、表达伯氏疟原虫静息巯基氧化酶(PbQSOX)基因,纯化重组Pb QSOX蛋白(rPbQSOX),并对其生物信息学特点和酶活性进行分析。方法分别采用BLAST、SMART、ClustalW对P QSOX蛋白的信号肽、蛋白结构域、活性位点、同源性进行分析;通过BLAST和MAGA5构建PbQSOX的系统进化树;应用SWISS-MODEL对PbQSOX蛋白的三级结构进行预测。BALB/c雌性小鼠经腹腔感染伯氏疟原虫(1×10^7/鼠),于感染后第4天提取疟原虫基因组DNA。PCR扩增PbQSOX基因,经测序正确后,将目的片段连接至原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET30a(+)-PbQSOX。将鉴定正确的重组质粒转化至大肠埃希菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,取菌液进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析;应用镍氨三乙酸琼脂糖柱纯化可溶性的rPbQSOX,并以三(2-羧乙基)膦(TCEP)或二硫苏糖醇(DTT)为酶反应底物分析rPbQSOX的酶活性。P QSOX大部分其他物种的同源基因。多序列蛋白比对与蛋白结构域分析结果显示,PbQSOX蛋白含1个信号肽,存在Trx1、ψErv和Erv/ALR结构域,但完全缺失了Trx2结构域。Pb QSOX蛋白含3个关键的CXXC活化基序(C为半胱氨酸Cys,X为任意氨基酸),即CPAC、CRNC和CNYC;采用MAGA5邻接法构建的系统进化树显示,PbQSOX与约氏疟原虫QSOX(PyQSOX)的亲缘关系最近;SWISS-MODEL同源建模法分析结果显示,用已知的布氏锥虫QSOX(TbQSOX)可预测PbQSOX蛋白的三级结构。PCR扩增PbQSOX基因,获得1486 bp目的条带,经测序为PbQSOX基因序列;pET30a(+)-PbQSOX质粒经NdeⅠ、HindⅢ双酶切与测序鉴定正确。SDS-PAGE和Western bloting分析结果显示,rPbQSOX重组蛋白主要以可溶形式表达,相对分子质量约59000。纯化后的rPbQSOX对TCEP的催化活性为0.84±0.18,DTT的催化活性为0.78±0.14(P<0.01)。结论PbQSOX蛋白为单Trx1结构域的伯氏疟原虫静息巯基氧化酶,构建、表达的rPbQSOX蛋白为可溶性蛋白,具有一定的静息巯基氧化酶催化活性。     

临床用血中EB病毒核酸检测结果分析

目的探讨临床用血中EB病毒检测的应用价值,为降低输血感染提供依据。方法采用实时荧光定量PCR方法和酶联免疫吸附法,分别定量检测500例悬浮红细胞及100例新鲜冰冻血浆中EB病毒核酸载量,同时检测核酸阳性样本EB病毒相关抗体。结果检测500例悬浮红细胞样本中,EB-DNA阳性例数44例,阳性率为8.8%;该悬浮红细胞样本分离的血浆阳性40例,阳性率为8.0%;核酸阳性样本EB病毒壳抗原(VCA)IgG、EB病毒核抗原(EBNA1)均为阳性,阳性率100%。VCA抗体(IgA)、EB病毒壳抗原(VCA)IgM、EB病毒早期抗原(EA)IgG均为阴性。100例新鲜冰冻血浆EB-DNA均为阴性。结论临床用血EB病毒携带率较高,检测献血者EB病毒核酸、合理选择血液制品对减少输血感染具有重要意义。     

槲皮素增敏阿霉素抗白血病效应的实验研究

本研究采用槲皮素作用于P388白血病移植瘤裸鼠模型,探讨其在体内抗白血病机制及增强阿霉素化疗效果的机制。取对数生长期的P388白血病细胞注入BALB/c裸鼠皮下,建成白血病皮下移植瘤裸鼠模型;采用槲皮素、阿霉素及二者联合用药作用于白血病小鼠,观察小鼠生存期的变化;定期复查血象,计数外周血细胞数;通过流式细胞术测定细胞周期,观察槲皮素对细胞增殖的影响;通过ELISA法检测Caspase-3蛋白表达水平,并通过实时荧光定量PCR、Western-blot技术检测NF-κB、BCL-2、BAX基因及蛋白的变化。结果表明,槲皮素和阿霉素均能显著延长P388白血病移植瘤裸鼠的生存期,且两者联合作用于动物的生存期较单一药物组的延长更明显;槲皮素和阿霉素单独及联合应用均可使白血病小鼠瘤组织G0/G1期细胞比例减少,S期及G2/M细胞比例增加,且槲皮素、阿霉素联合用药组作用更显著;槲皮素可激活Caspase-3酶,诱导白血病小鼠白血病细胞的凋亡;同时,槲皮素可以下调抗凋亡基因BCL-2及NF-κB的表达并上调促凋亡基因BAX的表达。结论：槲皮素可在体内通过调控凋亡相关基因的表达来抑制白血病细胞增殖,促进癌细胞凋亡,并可增敏蒽环类药物阿霉素的化疗效果,具有进一步研发为高效抗白血病药物的潜能。     

广枣黄酮槲皮素和山萘酚促人白血病HL-60细胞系凋亡及其机制探讨

本研究旨在探讨广枣黄酮主要成份槲皮素及山萘酚的抗白血病作用及其可能的作用机制。采用MTT法测定槲皮素及山萘酚对HL-60细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测药物对HL-60细胞周期的影响及其诱导凋亡作用;通过Western blot观察药物诱导的HL-60细胞凋亡中survivin蛋白表达情况。结果表明,槲皮素及山萘酚对HL-60细胞的增长有显著的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性（槲皮素相关系数r=0．77,山萘酚相关系数r=0．76）。给药后HL-60细胞发生G2／M期阻滞和凋亡。药物诱导HL-60细胞survivin蛋白表达下调。结论：广枣黄酮的主要成份槲皮素及山萘酚有明显的抗白血病作用,且槲皮素诱导凋亡作用强于山萘酚。其作用机制可能是通过抑制细胞增殖、细胞周期阻滞、抑制survivin蛋白而诱导细胞凋亡。     

血清胱抑素C、糖化血红蛋白及尿微量白蛋白联合检测在2 型糖尿病早期肾损伤中的临床价值

目的: 探讨联合检测血清胱抑素C( CysC) 、糖化血红蛋白( HbAlc) 及尿微量白蛋白( UmALB) 在诊断
2 型糖尿病早期肾损伤中的临床价值。方法: 选择2017－01 ～ 2017－06 在我院就诊的2 型糖尿病病人180 例,其
中单纯糖尿病病人60 例( B 组) 、早期肾损伤病人60 例( C 组) 、糖尿病肾病病人60 例( D 组) ,另选择同期在我
院体检健康者60 例( A 组) ,检测4 组的CysC、HbAlc 及UmALB 水平,并比较C 组病人3 项指标单独检测、联合
检测的阳性率及ＲOC 曲线下面积。结果: 检测结果表明C、D 组病人的Cys C、HbAlc、UmALB 水平均高于A、B
组( P＜0．05) ,且D 组各项指标明显高于C 组( P＜0．05) ; B 组病人与A 组比较UmALB 无明显差异( P＞0．05) ,而
Cys C、HbAlc 差异明显( P＜0．05) ; 3 项指标联合检测的阳性率为96．67%,均明显高于Cys C 的78．33%、HbAlc 的
76．67%和UmALB 的85．00%( P＜0．05) ; 联合检测的ＲOC 曲线下面积为0．912,大于Cys C、HbAlc、UmALB 各指标
的ＲOC 曲线下面积。结论: Cys C、HbAlc、UmALB 的水平变化均与糖尿病肾损伤有关,3 项指标联合检测可提高
阳性检出率,为病人病情严重程度的诊断和治疗提供参考。     

骨髓显像在再生障碍性贫血诊断和预后判断中的价值

目的探讨骨髓显像在再生障碍性贫血（AA）诊断及预后判断中的意义。方法通过对临床确诊的35例AA患者进行骨髓显像,并根据其骨髓活性水平进行分级、分型,评价AA患者骨髓活跃程度,同时分析个体化治疗前后骨髓显像各型分布的差异,以及与2年后预后情况的关系。结果 32例患者骨髓活性水平2级以下,表现为外周和（或）中央骨髓的放射性分布呈不同程度的降低。治疗前35例AA患者中荒芜型2例、抑制型4例、灶Ⅰ型11例、灶Ⅱ型14例、正常型4例,治疗后荒芜型1例、抑制型1例、灶Ⅰ型7例、灶Ⅱ型9例、正常型17例,治疗前后各型构成比显著不同（P〈0.05）,治疗后正常型增加。随访2年,缓解19例、明显进步10例、无效5例、死亡1例,各型间缓解率有统计学性差异（P〈0.05）,其中荒芜型、抑制型最差,正常型最佳,灶Ⅰ型、灶Ⅱ型居中。结论骨髓显像可以反映AA患者全身骨髓功能状况,对AA诊断和预后判断具有重要价值。     

乳胞素诱导大鼠致帕金森病的实验研究

目的 应用蛋白酶体抑制剂乳胞素(lactacystin)构建帕金森病(PD)模型,从泛素-蛋白酶体功能角度探讨PD的发病机制.方法 应用立体定向注射法在大鼠黑质致密部上方注射乳胞素;观察大鼠行为学改变及光镜下中脑组织学改变;免疫组化染色观察黑质细胞α-synuclein表达和酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数.结果 注射乳胞素后大鼠逐渐出现运动迟缓、少动、震颤等行为学异常,阿朴吗啡诱导出向健侧旋转行为;3 w后黑质部TH阳性细胞减少,部分黑质细胞内出现α-synuclein免疫反应晕强阳性的Lewy小体.结论 乳胞素对多巴胺能神经元有毒性作用,可导致蛋白聚集、包涵体形成,应用乳胞素可成功构建PD模型;蛋白酶体功能异常可能在PD的发病中发挥重要作用.