引入PDCA循环 加强实习教学管理

目的：加强临床实习教学过程管理，提高军队医院教学质量。方法：引入美国统计质量专家戴明提出的PDCA循环，改革临床实习教学管理模式。结果：实习教学管理工作步入高效、有序、规范的轨道，实习教学质量明显提高。结论：先进的教学管理模式是增强学生素质，提高教学质量的前提和关键。     

高龄结直肠癌的围手术期处理

目的 探讨高龄结直肠癌手术围手术期的处理方法及应注意的事项.方法 回顾总结65例70岁以上结直肠癌手术患者的围手术期临床资料.结果 65例中有心肺并存病46例占70.7%,低蛋白血症、贫血17例占26.1%,糖尿病11例占17%,肝功能异常6例占9.2%,肾功能异常3例占4.6%,术后并发症有心肺并发症19例,外科并发症主要有尿潴留、切口感染、创面出血、吻合口或造瘘口狭窄等.因呼吸衰竭围手术期死亡1例.结论 要重视高龄结直肠癌围手术期处理,术前积极处理并存病,术中精细操作,术后注意重要脏器功能监测,发现异常及时处理,以确保围手术期安全.     

汽化下鼻甲并发巨大脓囊肿1例

1病历摘要 患者，男，40岁。因左侧鼻阻4年，加重伴牙痛6天于2006年3月3日就诊。4年前患者无明显诱因出现左侧鼻阻，呈渐进性加重至持续性鼻阻。6天前因感冒至左侧鼻腔完全阻塞，且伴左侧头及左上列牙和鼻部疼痛及发热。病后曾静脉滴注先锋霉素3次无效。查体：全身检查无特殊异常。     

腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

目的:研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的表达。方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,并对培养的细胞进行成骨、成脂肪诱导分化和细胞免疫表型鉴定;用Pme I线性化后去磷酸化的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ 5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定正确后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。用重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP对MSCs进行转染,并用荧光显微镜及免疫荧光染色法观察转染细胞内EGFP和heNOS蛋白质的表达。结果:pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ 5183中成功地发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒在AD 293细胞中包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。经基因转染的MSCs中高表达heNOS和EGFP。结论:采用腺病毒载体可以将外源性的heNOS基因转染至MSCs中,并得到有效表达,且携带的EGFP标记可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况,这将为勃起功能障碍的细胞治疗提供一条新的途径。     

PCR产物靶向克隆法构建pET15b-CAT及His-tag-CAT融合蛋白的表达与纯化

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT,并表达和纯化出His-tag-CAT融合蛋白。方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列。以pZeoSV2(+)-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增。将纯化的人CAT cDNAPCR产物与经XhoⅠ和BamH Ⅰ酶切的线性化载体pET15b以6∶1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT。重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定。pET15b-CAT转化BL21(DE3)宿主菌,用IPTG诱导表达出His-tag-CAT融合蛋白,采用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析。结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT。SDS-PAGE和Western blot结果表明,转化了pET15b-CAT的宿主菌表达出了His-tag-CAT融和蛋白,经Ni2+-NTA树脂亲和层析得到了纯化的His-tag-CAT,并在体外检测到其具有特异的过氧化氢酶的活性,活性值为80.23U/g。结论:采用PCR产物靶向克隆法成功地构建了pET15b-CAT,并表达和纯化出了His-tag-CAT融和蛋白,为采用外源性CAT防治与氧化应激损伤相关性疾病奠定了基础。     

PCR产物靶向克隆法构建原核表达载体pET15b-CAT

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT.方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列.以pZeoSV2( )-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增.将纯化的人CAT cDNA PCR产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b以6:1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30 min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT.重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定.结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经Xho Ⅰ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT.结论:PCR产物靶向克隆法是一种简便、高效地将PCR产物定向克隆于目标载体的方法,而无需对PCR产物进行酶切、末端抹平、载体去磷酸化及连接反应,适用于任何载体、任何插入片段和任意酶切位点.     

赛庚啶对小鼠脑缺血再灌后学习记忆行为的影响

目的 :观察赛庚啶对小鼠脑缺血后学习记忆行为的影响。方法 :用昆明系小鼠夹闭双侧颈总动脉 ,脑缺血 15min后复灌模型 ,按组分别静脉注射赛庚啶 2mg·kg-1·d-1,尼莫地平 2mg·kg-1·d-1及对照组生理盐水 10ml·kg-1.d-1。人工常规饲养一周后 ,检测开场行为、回避反应和水迷宫试验以观察小鼠学习记忆行为的改变。结果 :赛庚啶组首次检测结果与 2 4h后再次检测结果比较均有显著差异 ,而对照组则均无显著改变。结论 :结果表明该脑缺血复灌损伤可导致记忆障碍 ,赛庚啶对小鼠脑缺血后的记忆保持有较好的改善作用     

心肌肌钙蛋白T检测及其在病毒性心肌炎诊断的价值

目的:探讨肌钙蛋白T(cTnT)在病毒性心肌炎诊断中的价值。方法:对10 2例急性病毒性心肌炎病人入院后进行1周、2周、3周及3个月cTnT和心肌酶谱的动态研究。结果:急性病毒性心肌炎患者在各检测期内血清cTnT的阳性率较心肌酶谱(CK、CK -MB、GOT、LDH、α-HBD)显著增高,具有统计学意义(P <0 . 0 0 5 )。结论:在病毒性心肌炎的诊断中,cTnT以其更高的敏感性、特异性可取代传统的心肌酶谱检测。     

神经节苷脂GM1对小鼠脑缺血复灌后记忆障碍的实验治疗作用

目的探讨脑缺血复灌后连续应用ＧＭ1对改善记忆障碍的疗效。方法采用小鼠夹闭双侧颈总动脉的脑短暂缺血复灌模型．缺血１５ｍｉｎ后复灌开始即连续给予ＧＭ１,７ｄ后进行开场行为、抑制性回避反应及Ｙ-水迷宫试验．检测动物行为及认知功能．然后脑片观察海马ＣＡ１区锥体细胞密度。结果ＧＭ１组（１０ｍｇ／Ｋｇ·ｄ．共７ｄ）;抑制性回避反应经首次训练后２４ｄ再次检测,错误次数明显减少（从２.１±１．１４到０．７±０．４６）、Ｙ－水迷宫试验正确次数明显增加（从０．７±０．９到１．５±１．０）,而对照组两次检测结果均无显著差异。脑片观察ＧＭ１明显抑制脑缺血复灌后迟发性神经元死亡．ＧＡ１区锥体细胞数为７８±１５／ｍｍ。显著高于对照组（５３±６．１／ｍｍ）。结论复灌开始后连续应用ＧＭ１治疗对脑缺血造成的记忆障碍有明显改善作用,这可能与其减少迟发性神经元死亡有关。     

磁敏感加权成像在卵巢子宫内膜异位囊肿中的应用初探

目的探讨磁敏感加权成像(SWI)对卵巢子宫内膜异位囊肿的诊断价值。方法回顾性分析2012年5月至11月期间12例卵巢子宫内膜异位囊肿患者资料,共计16个病灶;选取其他卵巢囊性病变18例作为对照组,均经手术病理证实,所有患者行磁共振成像(MRI)常规扫描及SWI扫描,分析常规MRI图像以及SWI图像囊液及囊壁的信号特征,比较2组病例囊液的校正相位值差异。结果 16个卵巢子宫内膜异位囊肿SWI图像囊壁均可见多个斑点状低信号;经处理后的校正相位图能够清晰显示卵巢囊性病变的形态及内部结构,囊壁及囊内分隔均为低信号,囊液为中等强度信号;其囊液的校正相位值与其他卵巢囊性病变相比,校正相位值差异具有统计学意义(P=0.023)。结论 SWI校正相位图较常规磁共振序列更可清晰显示卵巢囊性病变的形态学特点;SWI结合常规MRI平扫可以提高卵巢子宫内膜异位囊肿的诊断效能。