抗凝血酶原抗体和抗磷脂抗体综合征

凝血酶原属于维生素K依赖性凝血因子。抗磷脂抗体综合征主要表现为血栓和反复流产。低亲和力的抗凝血酶原抗体与抗磷脂抗体综合征存在一定的联系。抗凝血酶原抗体检测标准化将有助于抗磷脂抗体综合征的诊断     

肾上腺-脑白质营养不良的实验室诊断进展

肾上腺脑白质营养不良是遗传性代谢疾病 ,由于基因突变 ,极长链饱和脂肪酸在患者血浆和组织中累积 ,引起脑白质脱髓鞘改变和肾上腺功能不全。对血浆、培养皮肤成纤维细胞极长链饱和脂肪酸的测定是诊断本病的主要生化指标 ,基因突变分析能准确发现发病家系的基因突变类型和突变位点 ,应用免疫学方法检测突变基因所表达的蛋白 ,联合极长链饱和脂肪酸测定、基因突变分析两种方法 ,能提高肾上腺脑白质营养不良的确诊率。     

MEKK3稳定表达细胞株的建立及其对A549细胞增殖的影响

目的 构建人MEKK3基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体、建立其稳定表达细胞株并观察其对肺腺癌细胞增殖的影响.方法 从A549细胞中提取总RNA,应用RT-PCR扩增MEKK3 cDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/hygro(+)质粒中,构建成MEKK3基因的真核表达载体,然后转染入人肺腺癌A549细胞...     

脆性X综合征分子诊断研究进展

脆性X智力低下1基因(fragile X mental retardation l gene,FMRI)是脆性X综合征的致病基因,其产物脆性X智力低下蛋白(fragile X mental retardation protein,FMRP)与大脑神经元的发育密切相关.自FMR1基因被鉴定以来,以PCR和Southern印迹杂交为主的分子诊断方法已成为脆性X综合征实验室诊断的主流技术.本文就脆性X综合征分子诊断方法的最新研究进展作一综述.     

一个多发性骨软骨瘤家系的EXT1基因突变分析

目的对1个多发性骨软骨瘤家系的致病基因EXT1进行突变分析。方法提取先证者外周血基因组DNA,PCR扩增EXT1基因全部外显子序列并进行序列测定;找到突变后,对相应PCR产物进行T克隆,以证实突变。对其他家庭成员的EXT1基因相应外显子也进行序列分析。结果先证者的临床表现符合多发性骨软骨瘤,其父也有类似临床表现,但明显轻于先证者,且11名同胞及其子女均无发病。先证者序列分析表明,其EXT1基因第6外显子存在杂合的缺失突变:1476-1477delTC。先证者父亲的血液组织、精子和口腔粘膜细胞也存在相同突变,但在PCR产物直接测序中突变体的测序信号明显弱于先证者;在PCR产物的T克隆-测序中,来自先证者父亲的血液、精子、口腔黏膜细胞突变体的重组菌分别占总数的10%、2.6%、13.3%。其他11名同胞未见EXT1基因突变。结论先证者父亲在胚胎早期发生了EXT1基因突变,使其体内部分细胞(包括部分软骨细胞)带有EXT1基因突变,导致症状较轻的多发性骨软骨瘤。     

人血清IgG类抗LDH-C4抗体的ELISA检测及其意义

目的建立检测人血清IgG类抗精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)抗体的ELISA法,探讨人血清抗LDH-C4抗体与免疫性不育的关系。方法以重组人LDH-C4(rhLDH-C4)作为包被抗原,建立人血清IgG类抗LDH-C4抗体检测的间接ELISA方法。应用该方法检测74例健康人群(正常生育组)和177例不育人群(不育组)血清IgG类抗LDH-C4抗体。结果初步建立了检测人血清IgG类抗LDH-C4抗体的间接ELISA方法。不育组血清IgG类抗LDH-C4抗体阳性率(30.51%)显著高于正常生育组(9.46%)(P0.01),女性不育组阳性率(31.46%)与男性不育组(29.55%)差异不显著(P0.05)。结论人血清中存在着IgG类抗LDH-C4抗体,此类抗体可能与免疫性不育有密切关系。     

线粒体DNA突变及其与衰老的关系

真核生物基因组可以分为核 DNA ( n DNA,nuclear DNA)和线粒体 DNA ( mt DNA,mitochondrial DNA)二部分。哺乳类动物的mt DNA大小相近 ,基因的组织和定位也相似。人mt DNA由 1 65 69bp组成 ,是一个双链闭环分子 ,存在于线粒体基质中。它含有 37个基因 :2个r RNA( 1 2 s、1 6sr     

人膜联蛋白V的原核表达和鉴定

目的：构建人膜联蛋白V的原核表达载体并诱导其表达。方法：利用RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA扩增膜联蛋白V基因的编码序列，将扩增产物克隆至GST融合表达载体pGEX-2T,以ITPG诱导GST融合人膜联蛋白V的表达。结果：凝胶电泳显示人胎盘组织RT-PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符。对重组质粒分析表明，插入片段的序列与发表的人膜联蛋白V基因编码序列一致。在IPTG的诱导下，BL21重组菌高效表达出一个分子量约为61kDa产物。结论：人膜联蛋白V编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T。     

新兴学科人体基因组学介绍

20 0 1年 2月 ,人体基因组序列草图正式发表 ,标志 1990年启动的人类基因组计划 (Human Genom e Project,HGP)基本完成。而这项跨国科学工程的完成 ,为今后医学科学的发展提供了新的平台 ,标志医学科学进入了一个新的发展阶段。与此同时 ,一批新兴的学科如雨后春笋破土而出 ,其中最引人注目的就是基因组学 (genom ics)。本文拟对人体基因组学的几项基本内容作初步介绍 ,为读者将来涉猎该领域提供入门知识。1　基因、基因组和基因组学1.1　基因 :经典遗传学的奠基人孟德尔将决定生物体某个性状的遗传性独立因子称为遗传因子。190 8年 ,英…