重庆地区汉族人群CD14基因启动子区-159 T→C多态性及其与LPS反应分析

目的观察重庆地区汉族人群CD14基因启动子区-159单核甘酸多态性(single nuc leotide polymorph ism,SNP)分布特征,及其与CD14表达和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)反应的关系。方法选择298例重庆地区汉族健康个体,采用限制性片段长度多态性法(restrictionfragm ent lengthpoly-morph ism,RFLP)进行基因分型,检测LPS刺激前后外周血单核-巨噬细胞mCD14荧光强度和血浆sCD14浓度。结果重庆地区汉族人群CD14-159 T/T、T/C、C/C基因型频率分别为32.21%、50.67%和17.11%,样本符合Hardy-W e inberg平衡,正常情况下,不同基因型mCD14水平差异不明显,而sCD14浓度有显著性差异(P<0.05),LPS刺激能增强mCD14和sCD14的表达,但各基因型的增强幅度没有明显差异。结论重庆地区汉族人群CD14-159 SNP等位碱基以T为主,T→C变异可抑制sCD14的表达,但对mCD14表达和LPS刺激反应的影响可能不明显。     

TLR4胞外段在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及鉴定

目的：构建谷胱甘肽转硫酶-TLR4融合蛋白表达载体，并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达。方法：利用PCR从含TLR4全长cDNA序列的质粒中扩增其胞外段，约1800bp，然后将其克隆入pMD18-T载体中。测序确证后重组入谷胱甘肽转硫酶融合表达载体pGEX-4T-1中，并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达。结果：PCR扩增的TLR4胞外区基因序列与GenBank数据库中的序列一致。重组质粒经酶切鉴定及测序证实，TLR4基因已正确插入到pGEX-4T-1中。重组表达质粒转化感受态大肠杆菌HBl01后用IPTG诱导，获得Mr92 000的GST-TLR4融合蛋白；37℃，O.2mmol／L IPTG诱导4h，SDS-PAGE电泳后，经薄层凝胶扫描分析该融合蛋白占菌体蛋白总量34．25％，部分以包涵体存在，可溶性蛋白约占27．84％；亲和层析纯化后纯度大于90％。Western-blot证实GST-TLR4融合蛋白能与TLR4单抗特异性结合。结论：成功地构建融合蛋白表达载体pGEX-TLR4，并在大肠杆菌中获得有效表达，获得了纯度大于90％的可溶性GSI-TLR4融合蛋白，为进一步研究其功能及制备TLR4单克隆抗体奠定了基础。     

甘草酸二铵对白血病化疗致肝功能损害的保护作用

化疗作为白血病的重要治疗手段之一，常常在杀伤癌细胞的同时不同程度地损伤了机体的正常组织和器官，其中肝脏损害比较常见。严重时不得不终止化疗。为探讨甘草酸二铵对肝脏的保护作用。我们对2002年5月至2004年5月接受化疗的白血病患92例总结如下。     

省级远程继续医学教育项目评审结果影响因素分析

目的:探讨远程继续医学教育项目评审结果的影响因素,提高远程继续医学教育项目的质量。方法:35名专家对640项拟上线的远程继续医学教育项目进行观看和评审,并填写远程继续医学教育项目评审问卷。结果:640个项目通过510个,通过率为79.7%。多因素分析发现,项目名称与讲授内容和所属学科相符、PPT制作技术、拟授学分与课时数相符、符合“四新”、符合“三性”、声音清楚、有配套试题和有配套讲义为项目通过率的影响因素（P<0.05）。结论:远程继续医学教育项目总体质量尚可,但是仍存在“四新性”不足、教学形式单一等问题,希望卫生行政部门、远程教育机构、一线教育者不断对远程教育的内容、形式和教学方法加以改革和创新,从而增强卫生技术人员的学习动力和兴趣。     

表皮神经嵴干细胞移植对大鼠损伤脊髓组织中脑源性神经营养因子表达的影响

为了提高分枝杆菌转化植物甾醇产9α 羟基雄甾 4 烯 3,17 酮(9 OH AD)的转化效率,建立了油水乳化体系。结果表明：机械搅拌提供剪切力和加入吐温80作为分散剂是形成稳定乳化体系的必要因素,且油的比例须随甾醇投料质量浓度的增加而增加。在油水乳化体系中,细胞均匀分散,生物量增加,植物甾醇投料浓度和转化效率均得到提高;植物甾醇投料质量浓度可达20 g/L,9 OH AD摩尔得率达到64.06%,产率为1.28 g/(L·d)。转化终止后通过离心进行相分离,可以去除大部分存在于油相中的副产物,使产物纯度从66%提高到90%。     

TLR4基因3′未翻译区内11367位点突变对荧光素酶表达的影响

目的分别构建含TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的含荧光素酶基因的表达质粒,应用双荧光报告系统观察TLR4基因3′未翻译区对荧光素酶基因表达的影响。方法采用基因工程的方法构建含TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的含荧光素酶基因的表达载体,用LipofectAMINETM2000转染HEK293细胞,化学发光法检测荧光素酶活性。结果经酶切及测序鉴定显示,TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的片段正确插入荧光素酶表达载体pGL3-promoter中,应用双荧光报告系统检测显示pGL3-11 367G质粒转染后荧光素酶活性显著高于pGL3-11 367C。结论TLR4基因3′未翻译区单核苷酸多态性能抑制荧光素酶基因的表达。     

把职业指导内容渗透到中药教学过程的方法研究

目的：通过在中药教学全过程中有计划的渗透就业指导的内容,让学生亲身感悟职业人的角色,在学习专业课的同时提高岗位竞争能力和人文素质。方法：采用做中学、做中教的工作过程教学法完成中药学教学任务的同时注重就业观和职业理念的培养。分别对2005级、2006级、2007级106名学生（试验组）实施模拟岗位的工作过程教学方法,与采用传统教法的2004级、2005级、2006级96名学生（对照组）进行职业综合能力和期末成绩的分析比较。结果：试验组职业综合能力考核成绩高于对照组（p〈0．01）。对试验组的调查显示,该方法可以帮助学生体悟职业人的角色转变过程（85％）,学生愿意接受工作过程的岗位训练教学法（95％）。结论：在专业教学过程中渗透职业指导的内容,有助于实现教学过程理论与实践的紧密结合,有助于提高学生的应用能力、个人能力、方法能力和社会适应能力等综合职业能力;有助于学生充分做好就业前的准备。     

银质针结合系统康复治疗脑卒中后肩-手综合征的临床分析

目的探讨银质针结合系统康复治疗脑卒中后肩-手综合征(SHS)患者的效果。方法80 例社区脑卒中后SHS 患者,予以相同的基础治疗,随机分为观察组(n=40)和对照组(n=40)。观察组采用银质针治疗,对照组采用体针治疗。两组针后均进行系统康复训练治疗。以彩色超声多普勒测定患肢血流速度,以Fugl-Meyer 评定法测定上肢综合运动功能,3 周后比较两组疗效。结果两组治疗前及治疗后1 个月上肢运动功能评分无显著性差异(P>0.05),3 个月和6 个月时有非常显著性差异(P<0.01)。治疗后,观察组患肢尺动脉、桡动脉、尺静脉、桡静脉和中指指间动脉血流速度明显优于对照组(P<0.01)。结论银质针结合系统康复训练能促进脑卒中后SHS 患者的上肢动脉血流速度及静脉血流回流,改善微循环,有利于运动功能的恢复。