原发性肝癌组织芯片中RASSF1A的表达及临床意义

[目的]探讨RAS相关区域家族IA(RASSF1A)蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)组织芯片中的表达及其临床意义.[方法]98例HCC,89例非癌肝组织及24例癌旁肝组织构建组织微阵列.应用免疫组化技术检测RASSF1A蛋白的表达水平,并分析其与HCC临床病理特征的关系.[结果](1)组织微阵列利用率为97.16%(205/211);(2)RASSF1A蛋白明确定位于肝细胞胞浆内;(3)HCC组织中的RASSF1A蛋白的阳性率为39.58%(38/96).明显低于非癌组织组57.65%(49/85,P=0.015)及癌旁肝组织组66.67%(16/24,P=0.017);(4)HCC中临床TNM分期Ⅰ,Ⅱ期RASSF1A阳性率为57.38%(35/61),明显高于Ⅲ,Ⅳ期8.57%(3/35,P=0.000);(5)HCC中无转移组RASSF1A阳性率为63.64%(28/44),明显高于转移组4.88%(2/41,P=0.000);(6)RASSF1A蛋白表达在＜50岁组(16/54,29.63%),AFP≥400 μg/L组(14/55,25.45%),有门脉癌栓组(3/31,6.98%),包膜浸润组(16/64,25%)及多个结节组(5/31,16.13%)明显低于≥50岁组(22/42,52.38%,P=0.024),AFP＜400 μg/L(24/41,58.54%,P=0.002),无门脉癌栓组(35/65,53.85%,P=0.000),无包膜浸润组(22/32,68.75%,P=0.000)及单个结节组(33/65,50.77%,P=0.000),与性别、有无肝硬化、HCC分化程度及肿瘤大小无关(P＞0.05).[结论]应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点.RASSF1A表达缺失在HCC的发生发展中起重要作用;检测RASSF1A蛋白指标有助于HCC诊断和判断患者预后.     

鼻咽癌中肿瘤转移相关基因Ezrin的表达及临床意义

目的:研究肿瘤转移相关基因Ezrin在鼻咽癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法:取38例鼻咽癌患者癌组织及20例鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织行免疫组织化学二步法检测Ezrin蛋白的表达,比较它们的表达结果;并分析鼻咽癌组织Ezrin的表达与患者的临床资料,如性别、年龄、分期、复发、淋巴结转移等的关系.结果:鼻咽癌组织和癌旁黏膜的Ezrin蛋白表达与鼻咽黏膜慢性炎组织相比差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),但鼻咽癌组织和其癌旁黏膜Ezrin表达差异无统计学意义(P＞0.05);speanTIan等级相关分析显示,癌组织中Ezrin蛋白表达率随着患者年龄增大而增加(P＜0.05),而与患者性别、临床分期、复发、淋巴结转移无显著相关(均P＞0.05);线性回归分析显示,Ezrin对患者的生存时间有显著影响(P＝0.01).结论:Ezrin对鼻咽癌患者的预后有判断价值.     

罗汉果醇及其衍生物的药理作用研究进展

罗汉果中特有成分罗汉果醇及其衍生物罗汉果皂苷是一类葫芦烷型三萜糖苷。近年来,罗汉果醇及其衍生物罗汉果皂苷的药理作用引起了研究人员的广泛关注。对罗汉果醇及其衍生物罗汉果皂苷在保肝作用、神经保护作用、抗炎作用、抗肿瘤作用、治疗糖尿病及其并发症方面的研究进行综述。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎合并原发性肝细胞癌患者HBcAg、HBV-DNA与AFP的关系

目的 探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎合并原发性肝细胞癌(HCC)患者HBcAg、HBV-DNA与甲胎蛋白(AFP)的关系.方法 采用免疫组化方法检测50例HBeAg阴性慢性乙型肝炎合并HCC患者癌旁肝组织中HBcAg的表达;分别采用荧光定量PCR法、电化学发光方法检测血清HBV-DNA含量和AFP含量.分析肝组织HBcAg表达模式及血清HBV-DNA含量与AFP含量的关系.结果 50例患者中,癌旁肝组织HBcAg阳性30例,阴性20例,两者血清AFP含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05);血清HBV-DNA阳性组32例和阴性组18例的血清AFP含量无显著差异(P＞0.05).结论 HBeAg阴性慢乙肝合并HCC患者HBcAg、HBV-DNA的水平与AFP水平无明显关系.     

ZHX2-GST融合蛋白原核表达载体的构建和鉴定

目的:构建编码ZHX2-GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(ZHX2-GST)进行鉴定。方法:RT-PCR提取正常肝组织的RNA,然后扩增出ZHX2基因cDNA全长,克隆至含有GST标签的原核表达载体PGEX-4-1中,转化到Ecoli.BL21(DE3),IPTG诱导大肠杆菌表达ZHX2-GST蛋白,电泳分离鉴定。结果:测序结果显示克隆的ZHX2cDNA序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量118ku,与ZHX2-GST分子量相符。结论:成功构建了编码ZHX2基因的ZHX2-GST原核表达载体,融合蛋白可用于临床及实验研究。     

肝癌实时定量RT-PCR中适宜内参基因的选择

目的 探计肝癌(HCC)组织及细胞系实时定量RT-PCR最佳的内参基因选择.方法 通过实时定量RT-PCR,检测HMBS、CTBP1、HPRT1、UBC、B2M、SDHA、RPLI3A、EIF4A1、TUBB、YWHAZ、ACTB、GUSB、GAPDH、18 s rRNA和28 s rRNA 15个内参基因在70例HCC、癌旁肝组织及阿法替尼作用后4个HCC细胞系的表达情况.并使用NormFinder及geNorm软件分析最优化的内参基因.结果 15个内参基因表达存在差异,Cq值在8～29.2间.GAPDH在HCC及癌旁肝组织表达差异有显著性(P＜0.05).结论 NormFinder及geNorm软件均显示HMBS+UBC组合为肝组织的最佳内参,HMBS+ RPLI3A组合为体外肝癌细胞系的最适宜内参.     

病理专业本科生免疫组化教学探索与体会

免疫组织化学技术广泛应用于临床病理诊断工作中,病理专业本科教学应常规开设免疫组化课程。本文结合我院实际情况,对病理专业本科生免疫组化课程教学方法进行探索。     

儿童Hp相关性胃十二指肠疾病基质金属蛋白酶-9基因表达的研究

目的 探讨儿童幽门螺杆菌(Hp)相关性胃十二指肠疾病中胃黏膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况.方法 对具有上消化道不适主诉症状的儿童(包括66例慢性胃炎及30例十二指肠溃疡患儿)经上消化内镜检查获取胃黏膜活检标本.根据Sydney胃炎标准对HE染色的活检组织进行胃窦黏膜慢性炎症程度评价.血清Hp-IgG抗体检测、聚合酶链反应(PCR)、尿素酶试验及组织学检查作为确定Hp感染状态的依据.所有病例采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法及免疫组化法检测胃黏膜MMP-9的表达.结果 胃黏膜MMP-9 mRNA阳性表达率及表达水平在不同的Hp感染状态中无明显差异,其表达水平与胃窦黏膜慢性炎症程度无关.免疫组化染色显示MMP-9主要在炎症细胞中表达.结论 Hp感染对儿童胃十二指肠疾病的胃黏膜MMP-9的表达无影响.