喉癌、喉咽癌脆性组氨酸三联体基因杂合性缺失和微卫星不稳定

目的 探讨脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)和微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)与喉癌、喉咽癌发生发展的关系.方法 选取FHIT基因内的三个微卫星位点D3S1234、D3S4103、D3S1300进行PCR扩增,应用单链长度多态性分析-银染技术进行LOH和MSI分析.结果 ①D3S4103、D3S1234、D3S1 300的杂合率分别为76.32%、71.05%和78.95%;②喉癌、喉咽癌总LOH发生率分别是:D3S4103(48.28%)、D3S1234(37.04%)、D3S1300(33.33%);③喉癌、喉咽癌D3S1234、D3S1300、D3S4103的总LOH发生率与患者年龄、性别、吸烟、肿瘤分化程度、肿瘤部位、T分期和肿瘤复发与否的关系均无统计学意义(P＞0.05);④喉癌、喉咽癌总MSI发生率分别是:D3S1234(18.42%)、D3S1300(28.95%)、D3S4103(21.05%);⑤喉癌、喉咽癌FHIT基因D3S1234、D3S1 300、D3S41 03的总MSI发生率与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤部位、肿瘤分化程度和T分期的关系无统计学意义(P＞0.05);⑥复发喉癌、喉咽癌病例FHIT基因总MSI发生率为83.33%,原发病例总MSI发生率为30.77%,复发病例MSI阳性率显著高于原发病例,差异具有统计学意义(P=0.004).结论 ①FHIT基因在喉癌、喉咽癌中既存在杂合性丢失,又存在微卫星不稳定,但以前者为主;②FHIT基因参与了喉癌、喉咽癌的发生,可能是喉癌、喉咽癌候选抑癌基因之一;③FHIT基因微卫星不稳定与喉癌、喉咽癌复发可能相关.     

鲑鱼降钙素前体多肽在毕赤酵母中的分泌表达

将鲑鱼降钙素前体多肽（sCTGly）基因克隆到表达载体pPIC9K上,然后转化毕赤酵母营养缺陷型菌株GS115,利用酿酒酵母分泌信号肽α-factor将目的产物分泌到发酵上清液中.经组氨酸缺陷筛选、G418高拷贝筛选及摇瓶表达筛选,获得较高水平表达菌株GS115-sCTGly.酶联免疫反应检测上清液中酶的活性,表明sCTGly产量在10mg/L以上.通过5L发酵罐发酵条件优化,表达水平提高到200mg/L上.     

左金丸通过Wnt/β-catenin信号通路对幽门螺杆菌感染的人胃癌细胞转移的影响

目的:探讨左金丸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染的人胃癌MKN45细胞转移的机制。方法:以H.pylori感染人胃癌MKN45细胞,采用CCK-8检测不同浓度左金丸醇提物对H.pylori感染的MKN45细胞生长抑制作用。Transwell检测低、中、高剂量(25、50、100μg/ml)左金丸对H.pylori感染的MKN45细胞转移能力的影响;Western blot检测其对H.pylori感染的MKN45细胞核中的β-catenin蛋白表达;ELISA检测其对H.pylori感染的MKN45细胞培养上清液中MMP-7表达。结果:左金丸醇提物对H.pylori感染的MKN45细胞生长具有抑制作用,呈剂量依赖性。Transwell结果显示,与正常对照组比较,H.pylori感染后MKN45细胞转移能力显著增强(P0.01);与H.pylori感染组比较,低、中、高剂量左金丸均能够明显抑制H.pylori诱导的MKN45细胞转移能力(P0.01),呈剂量依赖性,且左金丸能够明显下调H.pylori诱导的β-catenin在细胞核的累积及其下游靶基因MMP-7蛋白表达(P0.01)。结论:左金丸防治H.pylori诱发胃癌细胞转移的机制可能与通过Wnt/β-catenin信号通路抑制MMP-7表达有关。     

健脾解毒方对湿热证结肠癌小鼠肿瘤血管新生的抑制作用

  目的：探索健脾解毒方对湿热证结肠癌小鼠肿瘤血管新生的影响。  方法：将Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及健脾解毒方低、中、高剂量组,对照组复制结肠癌原位模型,其余各组建立小鼠湿热证结肠癌模型。健脾解毒方低、中、高剂量组分别灌胃给药(250 、500、1 000 mg·kg-1·d-1),对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水,均干预28 d。干预结束,每组各处死部分荷瘤鼠,测量瘤体质量,免疫组化法检测各组瘤体的Ki67和肿瘤微血管密度(MVD)表达,ELISA测定血清中血管内皮生长因子(VEGF)表达;剩余小鼠用于观察生存时间。  结果：健脾解毒方各剂量组的瘤体质量均较模型组显著减小(P<0.01),荷瘤鼠中位生存时间均较模型组明显延长(P<0.01),且中、高剂量组的瘤重抑制率和生命延长率均高于低剂量组(P<0.01)。检测结果显示,模型组肿瘤MVD及VEGF表达水平较对照组显著提高(P<0.01),健脾解毒方各剂量组肿瘤细胞Ki67指数、MVD计数及VEGF水平均较模型组显著降低(P<0.01),且中、高剂量组明显低于低剂量组(P<0.01),呈剂量依赖效应。  结论：健脾解毒方能够抑制湿热证结肠癌小鼠肿瘤的生长、延长荷瘤鼠生存时间,其机制可能与下调VEGF表达从而抑制肿瘤血管新生有关。     

中老年人真菌球性鼻窦炎临床特征及鼻内镜手术观察

目的 探讨中老年人真菌球性鼻窦炎的临床特征、鼻内镜手术治疗的效果以及术后复发的处理.方法 总结60例中老年真菌球性鼻窦炎患者的临床资料,分析该疾病的临床特征.患者均行鼻内镜手术治疗,手术前后行视觉模拟量表评分及鼻内镜检查评分.术后复发者行上颌窦冲洗.结果60例中临床主要症状依次为流涕、鼻塞、鼻腔异味、鼻涕倒流和涕中带血,常见体征为中鼻道狭窄及黏膜肿胀、脓性分泌物或干酪样物附着及息内阻塞,76.92％具有典型的CT特征.术后视觉模拟量表及鼻内镜检查评分均较术前降低(P＜0.01),术后术腔完全恢复需6个月.4例复发患者通过上颌窦冲洗病情均完全控制.结论 中老年真菌球性鼻窦炎临床特征及鼻腔检查结果各异,CT扫描对诊断有特殊价值.鼻内镜手术是治疗此病的有效手段,术后病情控制需6个月时间,上颌窦冲洗在治疗术后复发中起重要作用.     

中老年人真菌球性鼻窦炎临床特征及鼻内镜手术观察

目的探讨中老年人真菌球性鼻窦炎的临床特征、鼻内镜手术治疗的效果以及术后复发的处理。方法总结60例中老年真菌球性鼻窦炎患者的临床资料,分析该疾病的临床特征。患者均行鼻内镜手术治疗,手术前后行视觉模拟量表评分及鼻内镜检查评分。术后复发者行上颌窦冲洗。结果 60例中临床主要症状依次为流涕、鼻塞、鼻腔异味、鼻涕倒流和涕中带血,常见体征为中鼻道狭窄及黏膜肿胀、脓性分泌物或干酪样物附着及息肉阻塞,76.92%具有典型的CT特征。术后视觉模拟量表及鼻内镜检查评分均较术前降低(P<0.01),术后术腔完全恢复需6个月。4例复发患者通过上颌窦冲洗病情均完全控制。结论中老年真菌球性鼻窦炎临床特征及鼻腔检查结果各异,CT扫描对诊断有特殊价值。鼻内镜手术是治疗此病的有效手段,术后病情控制需6个月时间,上颌窦冲洗在治疗术后复发中起重要作用。     

强力宁治疗144例病毒性肝炎疗效分析

我院1988年2月至1989年2月应用强力宁注射液治疗病毒性肝炎患者144例,取得较好疗效,现分析如下。临床资料1.一般资料:根据1984年全国病毒性肝炎南宁会议肝炎诊断标准确定的病毒性肝炎患者144例,其中男109例,女35例,年龄16～74岁。急性17例,慢性迁延型(CPH)86例,慢性活动型(CAH)41例,其中5例为CAH重型。144例检测了血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs)、核心抗体(抗-HBc)、e抗原(HBeAg)、e抗体(抗-HBe)。     

鼻内镜下泪前隐窝入路清除上颌窦内病变的观察

目的探讨经中鼻道开窗+泪前隐窝入路彻底清除上颌窦内病变的必要性。方法对30例54侧上颌窦病变,70°鼻内镜直视下经中鼻道开窗,查找并清除病变后,再行泪前隐窝入路,彻底清除上颌窦内残留病变。结果 (1)经中鼻道开窗可以窥及,但无法彻底清除上颌窦内病变9例14侧,约占总侧数的25.93%。而且经泪前隐窝入路窥及病变较之经中鼻道开窗所见更为广泛;(2)经中鼻道开窗清除上颌窦内病变,未窥及残留后,再行泪前隐窝入路,仍然发现18例32侧存有病变,约占总侧数的59.26%。结论 70°鼻内镜下经中鼻道开窗彻底清除上颌窦内病变,不仅困难,而且存在视觉死角,经泪前隐窝入路既能看清上颌窦内各壁,又能彻底清除上颌窦内病变。因此,在可能出现上颌窦病变残留时,有必要采用"中鼻道开窗+泪前隐窝入路"的双径路手术方式。     

滋阴化痰方调控肿瘤细胞来源外泌体对HUVECs管样分化的影响

目的:探讨滋阴化痰方(Ziyin Huatan Recipe,ZYHT)调控肿瘤细胞来源外泌体(exosomes,Exos)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)管样分化的影响。方法:(1)将2种不同剂量的ZYHT分别与胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803共培养48 h,使其主动进入细胞内,收集细胞上清液提取外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot法检测其膜表面标志性蛋白TSG101和CD81,用纳米颗粒跟踪分析仪NanoSight分析外泌体粒径分布范围。(2)PKH67荧光标记外泌体,并与HUVECs共培养,共聚焦显微镜观察外泌体能否被HUVECs摄取。(3)通过体外Matrigel基质胶实验,观察含不同剂量ZYHT的SGC-7901-Exos与MGC-803-Exos对HUVECs管状结构形成能力的影响。上述实验以等量PBS作为对照。结果:(1)经鉴定从胃癌细胞上清液中提取的外泌体为形态一致的圆形或椭圆形膜性囊泡,表达标志性蛋白TSG101和CD81,粒径范围30~200 nm。(2)共聚焦显微镜观察示肿瘤细胞来源外泌体可被HUVECs摄取。(3)在体外Matrigel胶成管实验中,随着外泌体浓度的增加,实验(含ZYHT高、低剂量)组分支总长度明显少于对照(PBS)组。结论:ZYHT可通过调控肿瘤细胞外泌体进而抑制胃癌血管新生。     

熊果酸诱导人胃癌BGC823细胞凋亡及其作用机制初探

背景与目的：熊果酸（ursolic acid,UA）广泛存在于夏枯草、白花蛇舌草等清热解毒药中,可抑制多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡,具有广泛生物学活性。本研究将UA作用于人胃癌BGC823细胞,观察其对细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测UA对BGC823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期与凋亡的变化;Realtime-PCR检测细胞bax、bcl-2mRNA表达的变化。结果：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,分别作用24、48、72h后半数抑制浓度依次为36.88、34.72、32.18μmol/L;UA能诱导BGC823细胞凋亡,并阻滞细胞于G2/M期;此外,其还可上调BGC823细胞bax及下调bc1-2mRNA表达,且作用随剂量的增加而加强。结论：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,并诱导其凋亡,阻滞细胞于G2/M期;其凋亡机制可能与上调bax及下调bcl-2基因的表达有关。