放射性肺纤维化基质重构与肌成纤维细胞凋亡抵抗的相关性

目的肌成纤维细胞(MFB)凋亡抵抗是肺纤维化进行性发展的关键原因,但MFB发生凋亡抵抗的机制尚未明确。MFB的状态与微环境-细胞外基质密切相关,而纤维化时细胞外基质呈现硬化、重构的特征。前期研究发现,体外3D拟基质不能诱导MFB凋亡抵抗。本研究通过制作去细胞基质(DM)而真实呈现肺基质结构特征,以探讨放射性肺纤维化(RIPF)基质重构与MFB凋亡抵抗的相关性。方法 C57BL/6小鼠全肺照射(总剂量18 Gy)形成RIPF模型;照射后2个月收取肺组织,采用化学加酶学方法制备DM;将分离获得的肺原代纤维细胞分别培养于不同组的DM切片上,TUNEL法比较细胞凋亡情况,组学技术比较转录水平的差异,Western印迹和免疫荧光法检测FAK,AKT和Bcl-2水平。结果 (1)小鼠胸部照射后2个月收集肺组织样本,免疫荧光染色显示,MFB(α-SMA+)表达Bcl-2增强,表现抗凋亡特征。(2) HE染色、电镜检测显示肺组织DM在体外重现肺纤维化基质紊乱、重构的原貌。(3)分别收集培养在正常组DM切片(C-DM)和RIPF组DM切片(RIPF-DM)上的肺纤维细胞,发现RIPF-DM上的MFB凋亡比例低于C-DM,活化胱天蛋白酶3/胱天蛋白酶3下调;KEGG通路富集发现,RIPF-DM可诱导MFB中PI3K-AKT-CREB通路水平上调。(4) Western印迹结果证实,RIPF-DM可上调pFAK/FAK,p-AKT/AKT和Bcl-2水平。结论 RIPF基质重构可诱导MFB凋亡抵抗,其机制与AKT通路上调有关。     

呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对耐药肝癌细胞QGY-7701 的体外抑制作用

目的:探索呫吨酮并吡啶衍生物XP-15联合紫杉醇对人肝癌QGY-7701耐药细胞株的体外抗肿瘤作用。方法:运用CCK8法、Transwell实验和流式细胞仪检测凋亡技术观察细胞功能学变化，运用Western Blot蛋白免疫印迹技术探索其可能的作用机制。结果:XP-15可明显增强紫杉醇对耐药QGY-7701细胞的抑制作用，XP-15联合紫杉醇作用于耐药QGY-7701细胞24 h后，QGY-7701细胞活力明显减弱，且其侵袭迁移能力明显降低，同时流式细胞仪凋亡检测提示细胞凋亡百分比明显增加。Western Blot蛋白免疫印迹亦证实细胞抗凋亡蛋白bcl-2表达明显降低，肝癌增殖分化相关PI3K及AKT蛋白分子表达减少。结论:XP-15具有增敏紫杉醇诱导耐药QGY-7701细胞凋亡同时抑制其增殖活力的作用，其作用机制可能与下调PI3K-AKT通路活性，同时减少bcl-2抑制凋亡蛋白表达相关。     

左西孟旦治疗急性心肌梗死合并心力衰竭的临床疗效分析

目的:分析左西孟旦治疗急性心肌梗死合并心力衰竭的临床效果,为临床治疗提供参考。方法:选取急性心肌梗死合并心力衰竭患者80例,其中采用常规治疗的40例为常规组,加用左西孟旦治疗的40例为观察组。分别于治疗前及治疗后7d比较两组血压;超声检测左室射血分数、左室舒张和收缩末期容积;并监测C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及脑钠肽(BNP)水平。结果:2组治疗后收缩压和舒张压明显下降(P <0. 05),但观察组改善幅度显著优于常规组(P <0. 05)。观察组治疗后左室射血分数、左室舒张和收缩末期容积改善程度优于常规组(P<0. 05)。观察组血清CRP、TNF-α、BNP水平均显著低于常规组(P <0. 05)。治疗期间未见明显药物不良反应。结论:对于急性心肌梗死合并心力衰竭患者,左西孟旦有助于降低炎症水平,改善心脏功能,并具有较好的安全性。     

活性氧在实验性视网膜脱离后坏死性凋亡中的表达及与RIP-1的关系

目的:观察实验性视网膜脱离后活性氧(ROS)和受体相互作用蛋白1(RIP-1)表达以及z-VAD和Necrostatin-1干预下对其表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠首先分为正常对照组和单纯视网膜脱离组观察视网膜脱离不同时间点ROS和RIP-1的表达情况,借此选择最佳时间点为药物干预做准备。再将大鼠分为无视网膜脱离组(attached)、单纯视网膜脱离组(untreated)、z-VAD-FMK组、z-VAD-FMK+Necrostatin-1组,观察z-VAD和Necrostatin-1干预下对ROS表达的影响。通过视网膜下注入透明质酸钠构建视网膜脱离模型。利用蛋白质免疫印迹法(western blot)测出内部RIP-1蛋白表达情况,活性氧检测试剂盒检测各组内视网膜ROS表达情况。结果:与attached组相比,实验性视网膜脱离后RIP-1、ROS表达增加,并且均于视网膜脱离后第3天达峰值,d3组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。药物干预实验结果显示z-VAD-FMK诱导的坏死性凋亡组ROS表达最高,而Necrostatin-1干预后,与untreated组及z-VAD-FMK组相比,ROS表达降低(P<0.05)。结论:ROS作为RIP-1的下游参与了光感受器细胞的坏死性凋亡,Necrostatin-1可以通过降低ROS的水平,对视网膜脱离后的视网膜起到一定程度的保护作用。     

不同浓度罗哌卡因复合舒芬太尼分娩镇痛对产妇产间发热的影响

目的研究不同浓度罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外注射用于分娩镇痛对产妇产间发热及致热因子的影响。方法适合阴道分娩、自愿要求分娩镇痛的初产妇120例,孕37～41周,年龄20～35岁,ASA I或Ⅱ级,随机分为三组:0.075%罗哌卡因组(A组)、0.1%罗哌卡因组(B组)和0.125%罗哌卡因组(C组),每组40例。宫口扩张至3 cm时实施硬膜外分娩镇痛,A组0.075%罗哌卡因+舒芬太尼0.5μg/ml;B组0.1%罗哌卡因+舒芬太尼0.5μg/ml;C组0.125%罗哌卡因+舒芬太尼0.5μg/ml。记录镇痛后1、2、3、4和5 h、胎儿娩出即刻、分娩后2 h产妇鼓膜温度;分别在镇痛前、胎儿娩出即刻及分娩后2 h采集产妇静脉血,测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度;记录产程时间;采用改良Bromage法评定三组产妇在镇痛后1 h及胎儿娩出即刻的运动神经阻滞程度。结果与镇痛前比较,镇痛后5 h及胎儿娩出即刻三组鼓膜温度明显升高,C组发热率明显高于A组和B组(P0.05)。与镇痛前比较,胎儿娩出即刻三组血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度明显升高(P0.05)。C组第二产程和镇痛时间明显长于A组和B组,B组第二产程和镇痛时间明显长于A组(P0.05)。三组运动神经阻滞程度差异无统计学意义。结论不同浓度罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外注射用于分娩镇痛均能产生良好的镇痛效果,低浓度罗哌卡因分娩镇痛产妇发热率低,产妇分娩期间发热与致热因子水平升高相关。