UPLC-Q/TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液中5种酚酸

目的建立UPLC-Q-TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液(丹参、盐酸川芎嗪)中5种酚酸的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用ZORBAX Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 8μm);流动相乙腈-0. 5%甲酸,梯度洗脱;体积流量0. 3 mL/min;柱温35℃。结果丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B在各自范围内线性关系良好(R~20. 999 1),平均加样回收率90. 0%～101. 3%,RSD 1. 2%～5. 0%。结论该方法简便可行,灵敏度高,专属性好,可用于丹参川芎嗪注射液的质量控制。     

波棱瓜子木脂素纳米混悬剂的制备

目的制备波棱瓜子木脂素(波棱甲素、波棱素、波棱酮、波棱内酯A)纳米混悬剂。方法微量介质研磨法制备纳米混悬剂,考察研磨速度、研磨介质用量、研磨时间对平均粒径、多分散指数、稳定系数的影响,扫描电镜下观察形态,测定体外溶出度。结果波棱甲素、波棱素、波棱酮、波棱内酯A最佳研磨速度分别为1 000、800、1 000、1 000 r/min,研磨介质用量分别为4.0、4.0、5.0、5.0 mL,研磨时间分别为2.0、1.0、6.0、6.0 h,平均粒径小于300 nm,多分散指数小于0.30(波棱甲素除外),稳定系数大于0.80。纳米混悬剂明显提高了波棱甲素、波棱酮体外溶出度。结论该方法简单、稳定、可行,可用于制备波棱瓜子木脂素纳米混悬剂。     

川楝素通过Fas/FasL信号通路诱导人卵巢癌细胞凋亡

目的探讨川楝素(TSN)对人卵巢癌细胞凋亡的影响及可能机制。方法对数生长期的CAOV-3和ES-2细胞,用不同浓度TSN(0、100、250、500、1000 nmol/L)处理,采用CCK-8法在不同时间点(24、48、72、96 h)检测细胞增殖抑制率。另将细胞分为阴性对照组、TSN组(500 nmol/L TSN)、TSN+z-DEVE-FMK(Caspase-3抑制剂)组(500 nmol/L TSN+20μmol/L z-DEVE-FMK)、TSN+z-IETD-FMK(Caspase-8抑制剂)组(500 nmol/L TSN+20μmol/L z-IETD-FMK)及紫杉醇(TAX)阳性对照组(5 mg/L TAX)。采用比色法检测Caspase-3、Caspase-8的活性,EdU法检测细胞增殖率,Western Blot法检测Fas、FasL蛋白的表达。结果 TSN能明显抑制CAOV-3和ES-2细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。TSN孵育72 h后CAOV-3和ES-2细胞增殖抑制率分别为53.46%和60.68%。与阴性对照组比较, TSN组CAOV-3和ES-2细胞Caspase-3、Caspase-8活性显著升高(P0.05)。与TSN组比较,TSN+z-DEVE-FMK组和TSN+z-IETD-FMK组CAOV-3和ES-2细胞Caspase-3、Caspase-8活性下降,导致TSN对两种细胞的增殖抑制率下降(P0.05)。TSN作用后可使ES-2细胞中Fas、FasL蛋白表达增加(P0.05),但该作用可被z-IETD-FMK逆转(P0.05)。结论川楝素能诱导人卵巢癌细胞凋亡,其机制可能与Fas/FasL信号通路相关。     

川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

紫癜性肾炎患儿血清APN、CysC、OPN和IgA1水平分析

目的 探讨血清脂联素(APN)、胱抑素C(CysC)、骨桥蛋白(OPN)、免疫球蛋白A1(IgA1)水平在紫癜性肾炎(HSPN)患儿中的水平及相关性。方法 选择2015年3月～2017年3月科室收治的紫癜性肾炎患儿39例,设为HSPN组;选择同期入院健康体检者50例,设为对照组,采用酶联免疫吸附试验测定2组APN、CysC、OPN、IgA1水平;分析HSPN发生率与APN、CysC、OPN、IgA1水平的相关性。结果 HSPN组血清脂联素水平,低于对照组(P0.05);HSPN组胱抑素C、骨桥蛋白及免疫球蛋白A1水平,均高于对照组(P0.05);HSPN患儿发生率与血清APN呈负相关性(P0.05);HSPN患儿发生率与CysC、OPN、IgA1呈正相关(P0.05)。结论 血清APN、CysC、OPN、IgA1的检测在HSPN的发生发展过程中发挥重要作用,有助于了解疾病严重程度,能为临床治疗提供依据和参考,值得推广应用。     

HPLC波长切换法同时测定益安宁丸中7种活性成分

目的建立HPLC波长切换法同时测定益安宁丸中7种活性成分的方法。方法采用HPLC法,同时测定益安宁丸中三七皂苷R_1、五味子醇甲、丹酚酸B、五味子酯甲、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1、丹参酮Ⅱ_A的含量,采用Shim-pack GIST-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱:0～5 min,5%乙腈;5～12 min,5%～12%乙腈;12～17 min,12%～20%乙腈;17～30 min,20%乙腈;30～36 min,20%～50%乙腈;36～45 min,50%～80%乙腈;45～70 min,80%乙腈;检测波长203 nm(三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1)、220 nm(五味子酯甲)、250nm(五味子醇甲)、268nm(丹酚酸B)和270nm(丹参酮Ⅱ_A),体积流量1.0 mL/min,柱温35℃,进样量10μL。结果三七皂苷R_1、五味子醇甲、丹酚酸B、五味子酯甲、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1、丹参酮Ⅱ_A检测质量浓度的线性范围分别为0.015～0.150、0.077～0.766、0.006～0.062、0.009～0.092、0.050～0.503、0.067～0.670、0.011～0.108 mg/mL;平均加样回收率分别为99.5%、99.8%、99.2%、98.9%、96.9%、98.8%、97.1%。结论该方法简单、有效、结果准确,可用于益安宁丸中上述7种活性成分的同时测定。     

蛇床子素对过氧化氢诱导下人表皮黑素细胞氧化损伤的影响

目的探讨中药单体蛇床子素对过氧化氢诱导下人表皮黑素细胞氧化损伤的影响。方法体外培养人表皮黑素细胞,并用L-DOPA鉴定。用一定浓度蛇床子素预处理黑素细胞,并用过氧化氢构建黑素细胞氧化损伤模型,采用MTS法检测黑素细胞活力,倒置显微镜下观察黑素细胞树突变化,并记录树突变化率。分别用WST-1法和TBA法,测定细胞内SOD及MDA含量。结果与对照组相比,过氧化氢组黑素细胞活力及细胞内SOD活性显著下降(P 0. 05),经蛇床子素预处理的黑素细胞活力及SOD活性虽低于对照组,但显著高于过氧化氢组(P 0. 05)。与对照组相比,过氧化氢组黑素细胞树突变化率及细胞内MDA含量明显升高(P 0. 05),经蛇床子素预处理的黑素细胞树突变化率及细胞内MDA含量虽比对照组升高,但显著低于过氧化氢组(P 0. 05)。结论蛇床子素可抑制过氧化氢对黑素细胞的氧化损伤作用,对黑素细胞活力及树突的变化具有保护作用,并可升高细胞内SOD水平,降低MDA水平。     

RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒中4种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活丸、片、颗粒(羌活、防风、苍术等)中羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷的含有量。方法 3种药物甲醇提取液的分析采用TechMate C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长317 nm。结果羌活醇、阿魏酸、异欧前胡素、紫花前胡苷分别在2.944 2~31.768 2μg/mL(r=0.999 8)、1.995 8~19.958 4μg/mL(r=0.999 8)、2.944 2~29.441 8μg/mL(r=0.999 7)、8.215 0~82.150 1μg/mL(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为94.9%、93.9%、91.2%、101.1%,RSD分别为0.9%、1.2%、1.4%、1.0%。结论该方法准确可靠,可用于九味羌活丸、片、颗粒的质量控制。     

玻璃酸钠注射结合乙哌立松治疗膝骨关节炎的效果观察

目的 探讨玻璃酸钠注射结合乙哌立松治疗膝骨关节炎的临床效果。方法 94例膝骨关节炎患者,按照随机数字法将其分为对照组与实验组,每组47例。对照组患者使用玻璃酸钠进行治疗,实验组患者使用玻璃酸钠注射结合乙哌立松进行治疗。比较两组患者治疗前后尿液中CTX-Ⅱ含量、疼痛评分、膝关节功能评分、生活质量评分。结果 治疗后,实验组尿液中CTX-Ⅱ含量(236.78±26.59)ng/mmol低于对照组的(364.45±41.23)ng/mmol,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组疼痛评分(3.01±0.89)分低于对照组的(4.46±1.68)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组膝关节功能评分(84.45±11.68)分高于对照组的(75.89±11.84)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组物质生活、社会角色、心理健康、躯体健康评分分别为(86.23±1.89)、(87.43±2.13)、(87.52±3.01)、(88.23±4.13)分,均高于对照组的(76.02±4.31)、(79.23±4.56)、(79.01±4.89)、(77.25±4.89)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 玻璃酸钠注射结合乙哌立松治疗膝骨关节炎的临床效果显著。