应用变性高效液相色谱法检测幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性

目的建立DHPLC快速检测Hp对克拉霉素耐药性的新方法。方法抽提56份经纸片琼脂扩散法鉴定为克拉霉素耐药的Hp菌株DNA及其对应的胃粘膜组织标本DNA,通过PCR技术扩增23S rRNA区187 bp基因,运用DHPLC技术对PCR产物进行突变分析,并进行DNA测序。结果56份克拉霉素耐药的Hp菌株DNA经DHPLC分析,有51份存在异源双链峰,测序证实均存在点突变,5份无异源双链峰,测序证实无点突变,故DHPLC对基因突变耐药菌株的敏感性和特异性为100%,而且56份组织标本DNA检测结果与菌株DNA检测结果一致。结论DHPLC可应用于Hp对克拉霉素耐药性的快速检测,具有广阔的临床应用前景。     

伏马毒素B1时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制

目的： 为快速检测食品中的伏马毒素B1 (fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒。方法：在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数：线性范围、检出限及与黄曲霉毒素 (aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素 (deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性;对试剂盒稳定性采用37 ℃破坏实验;采用3个浓度的加标回收试验确定回收率;对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证。结果：所研制试剂盒的最低检出浓度为2 ng/mL,检测线性范围为2～512 ng/mL,线性方程为Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998),50%抑制浓度为10.07 ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32%～116.76%之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315 d以上。结论：本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒。     

主动脉夹层临床特征及院内死亡危险因素分析

主动脉夹层(aortic dissection,AD)是指由于主动脉内膜撕裂后,血液从撕裂处进入主动脉中膜,在管腔血流的驱动力下,中膜分离并沿主动脉长轴进一步扩展,形成主动脉壁的二层分离状态,血液充盈于主动脉壁分离层之间形成一个假腔。AD是一种较少见的、危重的心血管急症,特点为发病急、进     

经心包腔途径转染提高大鼠体内心肌细胞转染的效率*

背景：如何获得安全、有效、广泛心肌组织的转染一直是国内外学者研究的热点。 目的：探讨能够改善动物水平心肌组织非病毒载体的转染效率、增强基因导入靶向性的方法。 方法：以β半乳糖苷酶质粒PLacZ作为报告基因,将Wistar大鼠随机分为5组：①空白组。②心包腔内组：心包腔注射质粒+微泡+酶混悬液,超声导入。③心包腔内阴性对照组：以生理盐水代替质粒干预。④舌下静脉组：舌下静脉注射质粒+微泡混悬液,超声导入。⑤舌下静脉阴性对照组：以生理盐水代替质粒干预。注射6 d后处死,进行心、肺、肝、肾组织的X-gal染色。 结果与结论：转染6 d后,仅有心包腔内组大鼠的部分心肌细胞在心尖、心室及心房水平可见明显的蓝染,其他各组大鼠心肌X-gal染色为阴性;各组大鼠肺、肝、肾组织X-gal染色均为阴性。提示采用心包腔内途径转染、再辅以超声微泡导入以及酶类的使用,可明显改善质粒对在体心肌细胞的转染效率,且不伴有心外组织目的基因的表达,具有较好的靶向性。关键词：心包;心肌细胞;siRNA;RNAi;转染;基因 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.027     

端粒酶抑制剂对口腔肿瘤细胞生长的影响

目的　探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法　选择人口腔鳞状细胞癌KB细胞株作为靶细胞 ,观察端粒酶抑制剂 3′叠氮3′脱氧胸腺核苷 （AZT）和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸片断（ASONS）对上述肿瘤细胞株的作用 ,用MTT试验测定细胞毒作用 ;3HTdR掺入试验测定细胞增殖速度 ;用端粒重复序列扩增法 （TRAP）半定量方法测定细胞染毒前后端粒酶活性的变化 ;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果　ASONS和AZT在一定剂量范围内有抑制肿瘤细胞株繁殖的作用 ,在抑制细胞生长的同时 ,端粒酶活性降低。此外 ,ASONS和AZT还有诱导细胞凋亡以及使细胞阻滞在G1 期的作用。结论　AZT和ASONS在体外有抑制端粒酶活性和抗肿瘤细胞增殖的作用 ,这种作用可能与细胞凋亡的诱导和细胞周期的阻滞有关。     

集中带量采购背景下某院中标药品的短缺原因及对策

目的 探讨集中带量采购背景下某院中标药品的短缺现状及原因,为保障中标药品的供应提供参考。方法 基于医院采购工作实践收集、汇总药品集中带量采购政策落地执行以来出现的中标药品短缺信息,结合文献研究法和非结构式访谈法分析中标药品短缺基本情况及原因。结果 该院67个中标药品中,购销合同期内12个中标药品出现短缺,短缺率达17.91%。短缺原因主要有生产性短缺,药品定价与监管机制不完善,信息化建设不健全。结论 随着药品集中带量采购模式的持续推进,在集中带量采购药品定价与监管机制不断完善的基础上,医院可通过优化采购制度,加强中标企业供货能力评估,及时报送短缺药品信息,积极与医疗保障局和供应商沟通等方式保障中标药品的供应。     

醛固酮在大鼠骨骼肌缺血再灌注所致心肌损伤中的变化

目的 观察醛固酮(ALD)在骨骼肌缺血再灌注所致心肌损伤中的动态变化.方法 雄性wistar大鼠62只,应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,按照缺血及再灌注不同时间点随机分为以下9组:正常对照组(n=8),缺血2h组(n=4),缺血4h组(n=8),再灌注0.5h组(n=8),再灌注2h组(n=8),再灌注4h组(n=8),再灌注6h组(n=8),再灌注12h组(n=4),再灌注24h组(n=6),其中再灌注组缺血时间均为4h.观察各组大鼠血浆ALD、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白-T(TNT)及心肌ALD水平的变化.结果 与正常对照组比较,缺血4h组血浆及心肌ALD水平开始上升(P<0.05),再灌注后二者继续上升.再灌注24h组血浆ALD达峰值,是正常对照组的6.2倍,且明显高于再灌注4h组(P<0.05),再灌注4～24h,心肌ALD持续稳定在较高水平;与缺血4h组比较,再灌注4、6、12、24h各组血浆及心肌ALD水平均明显升高(P<0.05).与正常对照组比较,缺血2h后血浆CK-MB即开始明显上升,缺血4h后血浆TNT、LDH开始升高(P0.05);再灌注后,上述心肌酶学指标继续上升,于再灌注4～6h达峰值,且明显高于缺血组(P<0.05).结论 骨骼肌缺血再灌注可导致全身及心肌局部醛固酮的持续激活,可能对骨骼肌缺血再灌注后远期心肌结构及功能损伤具有重要作用.     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELlSA检测的影响

目的 评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验.方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、 抗-HCV、 抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析.结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P<0.05),加100μl差异无统计学意义(P>0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P<0.05),HBsAg和抗-HEV IgG无显著差异(P>0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl.结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求.     

心肺复苏病人脑氧代谢变化的临床研究

脑缺血、缺氧是心肺复苏(CPR)病人最重要的脑继发性损害因素,及早防治脑缺血、缺氧有可能进一步减轻复苏后的病理生理过程,提高复苏成功率.近年来,脑氧代谢的监测被认为是脑外伤、脑血管意外治疗中的重要方法,其临床价值逐渐受到重视[1],但对CPR的临床意义未见报道.