骨髓来源成骨细胞复合脱钙骨修复颌骨缺损的实验研究

以自体骨髓间质干细胞诱导分化而来的成骨细胞作为种子细胞，以异体脱钙骨作为支架材料构建组织工程骨用于兔颌骨缺损的修复，观察其成骨特点和效果。     

成骨细胞在快速成型技术构建的骨支架材料中粘附的实验研究

目的　观察成骨细胞在用快速成型技术构建的具有不同孔隙率的骨支架材料中的粘附情况以及材料的孔隙率对成骨细胞粘附的影响,以探索用快速成型技术构建骨组织工程支架材料的可行性。方法　体外分离培养、扩增乳鼠颅骨骨膜成骨细胞,经传代培养作为种子细胞,接种于由快速成型技术构建,孔隙率分别为80%、 90%、95%的骨支架材料中,复合培养4 d及10 d后,采用细胞计数及扫描电镜方法检测支架材料中细胞粘附的情况。结果　①各孔隙率组粘附成骨细胞总数均呈现随培养时间延长而增高的趋势(P<0·05),粘附细胞数的增加量则以80%孔隙率组为最低(0·35×105个),而90%孔隙率组为最高(2·84×105个);②电镜观察发现用快速成型技术构建的骨支架材料具有良好的细胞相容性,成骨细胞能够在各孔隙率组支架材料内部粘附、聚集。结论　快速成型技术构建的骨支架材料为组织工程骨支架材料的设计、成型开辟了一条崭新途径。     

乳鼠面神经雪旺细胞的体外培养及其纯化

目的：体外培养雪旺细胞（SCs）时,在去除成纤维细胞（FCs）后,应用人参皂甙Rb1促进SCs的增殖以获得大量纯净的SCs,为周围神经组织工程学的发展奠定良好的基础.方法：本实验采用高浓度混合酶从乳鼠面神经中消化分离SCs,结合差速粘贴和阿糖胞苷处理进行纯化后,再用人参皂甙Rb1促进其分裂增殖.结果：S-100蛋白免疫荧光染色呈阳性反应的比例约占98%.结论：本方法快速、简便,能为SCs作为移植材料提供足够的来源,是纯化和促进SCs增殖较为理想的方法,具有潜在的临床应用前景.     

基因工程与组织工程联合应用在牙周组织再生的研究进展

组织工程应用于牙周组织缺损修复为牙周病的治疗开辟了一条新路。基因治疗是一种崭新而具有广阔前景的方法,与传统的细胞因子导入治疗相比,它可在一定时期内使局部保持一定的生长因子浓度,更有利于骨缺损的修复。两者的联合运用在牙周治疗中有着强大发展潜力。     

组织工程化口腔黏膜支架材料的研究进展

随着组织工程技术的发展,近年来国内外许多学者致力于口腔黏膜组织工程的研究,取得了一定的成就,支架材料是黏膜组织工程的一个重要因素,本文对组织工程化口腔黏膜的支架材料研究作一简要综述。     

犬骨髓基质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石皮下成骨的实验研究

目的：犬自体皮下非受力部位植入犬骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）复合珊瑚羟基磷灰石（coralline hydroxyapatite，CHA），观察成骨情况及其转归。方法：体外分离培养、成骨诱导、扩增犬BMSCs，并通过细胞化学、免疫细胞化学检测成骨表型。将第2代细胞接种于CHA上，形成细胞一材料复合物，植于9只犬右侧腹部皮下，并在对称部位植入CHA作为对照。术后4、12、26周取材，HE染色，观察新生组织结构；通过形态计量学分析，对成骨情况量化，并行t检验。结果：成骨诱导后，细胞碱性磷酸酶染色阳性，免疫细胞化学显示骨钙蛋白表达阳性。HE染色示植入4周后，无明显骨形成；12周后，实验组有较多新生骨小梁形成，苦味酸-硫堇和Masson染色示骨基质和胶原形成良好；26周后，实验组骨小梁量有减少趋势。图像分析显示，实验组12周成骨量最高，差异有统计学意义。结论：犬BMSCs诱导后具有成骨活性，复合CHA后，可促进形成组织工程化骨。在无应力刺激情况下，随时间延长．局部成骨活动减弱。     

成体干细胞在组织工程化牙本质牙髓复合体中的应用研究与展望

牙髓干细胞(dental pucp stem cells，DPSCs)是一种成体干细胞。有关成体十细胞的研究进展，尤其是骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells，BMSSCs)的研究，为牙髓干细胞的研究提供了可以借鉴的思路和方法。DPSCs也有相对特异的识别途径和特点，其中重要的特征之一是一定条件下能形成牙本质牙髓复合体。这将为其应用于组织工程中重建牙本质牙髓复合体，展示了巨大的优越性和可行性，也为其在牙髓生理、病理、牙髓病的生物治疗方面的研究提供了重要的应用价值。     

纳米羟基磷灰石复合骨髓基质细胞修复兔股骨缺损的实验研究

目的探讨使用纳米羟基磷灰石(Nano-Hydroxyapitite,n-HA)作为骨组织工程支架材料的可行性。方法以成骨条件培养液培养兔骨髓基质细胞(BMSCs)至第3代并以1×106/cm2的密度与n-HA复合培养后回植于骨缺损区(1.0cm×0.8cm×0.5cm)。术后6周、12周处死动物,取缺损区及周围骨质进行肉眼、X线片、免疫组化染色观察及计算机图像分析。结果所有植入物无排除或感染。6周及12周通过肉眼及免疫组化观察实验组修复效果明显优于对照组,新骨面积百分比高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论n-HA作为骨组织工程支架材料具有可行性。     

nHACP／CF材料与成骨细胞体外复合培养的实验研究

目的:检测甲壳素纤维增强多孔胶原基骨组织工程支架材料(nHACP/CF)对成骨细胞附着增殖的影响,为骨组织工程支架材料的选择提供实验依据.方法:原代培养大鼠成骨细胞,将第3代细胞与nHACP/CF材料体外复合培养.碱性磷酸酶(ALP)染色对成骨细胞进行鉴定;将不同浓度成骨细胞接种到nHACP/CF支架上,通过检测ALP活性测定最佳接种浓度;通过扫描电镜观察和各培养时点细胞增殖率及ALP活性检测,评价nHACP/CF材料对成骨细胞的影响.采用SPSS11.5软件包对测定结果进行单因素方差分析.结果:大鼠成骨细胞ALP染色阳性.统计分析表明,6×105/ml为细胞最佳接种浓度;大鼠成骨细胞能在nHACP/CF材料上附着、增殖,其生长及功能不受抑制.结论:nHACP/CF材料是大鼠成骨细胞附着生长的良好载体.     

兔骨髓基质干细胞自体嚼肌内移植异位成骨实验研究

目的：观察骨髓基质干细胞成骨向分化诱导后植入嚼肌内异位成骨的过程。方法：从兔髂骨分离骨髓基质干细胞，经体外诱导分化，与磷酸三钙／羟基磷灰石（tricalcium phosphate／hydroxyapatite，TCP／HA）支架复合，植入兔自体嚼肌内，形态学、免疫细胞化学、组织学观察其成骨特征。结果：体外培养的兔骨髓基质干细胞性状稳定，经矿化诱导培养的骨髓基质干细胞表现为成骨细胞分化，表达Ⅰ型胶原蛋白，与支架材料复合植入自体嚼肌内可见成熟骨组织形成。结论：利用骨髓基质干细胞为种子细胞植入嚼肌内开展功能性组织工程化颌骨移植方法可行。