肾系疾病肝肾阴虚证血液代谢组学初探

目的探讨常见肾系疾病中肝肾阴虚证的血液代谢组学异同,从小分子代谢水平方面探讨同证异病的客观物质基础及其与病、证的关系。方法以慢性肾衰竭、慢性肾炎、慢性泌尿系感染、糖尿病肾病4种疾病中辨证为肝肾阴虚证的患者为研究对象,采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术,对其血液样品进行代谢产物检测;采用偏最小二乘法-判别分析进行数据处理,获得样品的分类信息和不同于正常人的差异变量。将上述差异变量进行不同病理组间对照,得到共有和特有的差异变量,在HMDB数据库和Wiki Pathways数据库中进行比对检索,鉴定其特征代谢物及对应的代谢通路。结果肾系疾病肝肾阴虚证患者共有4个相同的代谢物不同于正常人,分别为2-(羟基亚氨基)-丙酸、L-同型半胱氨酸、十六酸和二鸟嘌呤核苷四磷酸;不同的特征代谢物共有57个,其中慢性肾衰竭18个,慢性肾炎16个,慢性泌尿系感染14个,糖尿病肾病9个。结论慢性肾系疾病中,中医同证异病的理论具有客观物质基础。相同证型有一致的物质基础(生物标志物);疾病不同,其对应的物质基础(生物标志物)有差异。病证对患者的物质代谢均有影响,而病的影响可能大于证的影响。     

赣南地区非综合征性唇腭裂患者尿液代谢组学的初步研究

目的：通过检测非综合征性唇腭裂（NSCL/P）患者与正常人尿液中代谢物的变化,探讨基于核磁共振（NMR）的代谢组学在此症的临床应用中的可行性。方法：分别收集12个NSCL/P患者和12个正常人对照组的尿液样品。采用NMR分析NSCL/P患者尿液代谢特征,测定1 H-NMR图谱,进而用主成分分析法（PCA）处理NMR数据,研究NSCL/P组和正常对照组尿液中的代谢物差异,获得NSCL/P患者的特异性代谢标志物。结果：NSCL/P组和正常对照组间的尿液代谢产物存在明显差别。结论：采用基于NMR的代谢组学技术能较好地反映NSCL/P患者尿液的代谢变化,获得相应的特征代谢物,在未来的临床应用中具有广阔的前景。     

大鼠槲皮素灌胃后门脉血浆代谢组学研究

目的:研究槲皮素灌胃后对大鼠门脉血浆代谢组的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠按40mg/kgbw剂量灌胃槲皮素,分别于灌胃前后0、0.5、1.0、2.0和4.0h采集门脉血液制备血浆,测定1H核磁共振谱,采用PLS-DA分析法对采集的数据进行分析。结果:灌胃槲皮素后,大鼠门脉血浆中二甲基亚砜水平明显升高,乳酸、葡萄糖含量呈现出先升高后逐渐恢复的趋势,谷氨酸、丙氨酸、琥珀酸、酮体水平也有所上升,柠檬酸、酪氨酸水平略有下降。结论:槲皮素灌胃后对肠道内源性代谢具有显著影响。     

基于NMR技术对Wilson病模型大鼠尿液的代谢组学研究简

目的：以基于核磁共振（NuclearMagneticResonance,NMR）的代谢组学方法对Wilson病（Wilson’sDisea峨WD）铜负荷模型大鼠及正常对照组大鼠的尿液进行研究,分析模型大鼠尿液中代谢物的变化,继而从小分子层面探讨铜过量对机体的损伤机制,以更加清楚的认识本病。方法：28只雄性wistar大鼠,体重（180±20）g,随机被分为模型组（n=14）和健康对照组（n=14）。采用铜负荷法制作wilson病大鼠模型,以NMR技术对大鼠尿液进行检测。采用MestRe—c2．3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐。对样品进行分段积分．将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析。结果：相对于正常对照组,模型组大鼠尿液醋酸盐（acetate）含量有显著升高,柠檬酸盐（citrate）、苯乙酰甘氨酸（PAG）、琥珀酸盐（succinate）、甲胺（methvlamine）、肌氨酸＋肌氨酸酐（creatine／creatinine）、丙酮酸盐（pyruvate）、二甲基甘氨酸（DMG）、丙氨酸（alanine）含量有所升高,胆碱（choline）、牛磺酸（taurine）含量有所降低。这些发生改变的代谢物可能是潜在的WD铜负荷小分子代谢标志物,可为进一步研究WD的铜过量代谢机制提供参考。     

慢性温和不可预知应激抑郁模型大鼠脑组织1H-NMR代谢组学研究

目的 采用高分辨核磁共振¹H谱（¹H-NMR）代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激（CUMS）抑郁大鼠脑组织中代谢物及代谢通路的变化，探讨抑郁症的发病机制。方法 12只雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组，采用CUMS对模型组大鼠进行为期4周的造模，进行称体质量、旷场实验和糖水偏爱实验验证模型是否成功，造模结束后收集大鼠脑组织。采用两相提取法（甲醇/氯仿/水）对脑组织进行提取，得到水溶性和脂溶性代谢物。应用¹H-NMR技术结合多元统计和代谢通路分析筛选出与抑郁相关的脑内差异代谢物，并构建其代谢通路。结果 行为学数据显示，与对照组比较，模型组大鼠的体质量、糖水偏爱率、旷场的穿格数和直立次数均显著降低（P<0.05），显示了抑郁状态。在大鼠脑组织的¹H-NMR图谱中共指认出35种内源性代谢产物。脑组织中水溶性和脂溶性代谢物主成分分析（PCA）均显示模型组与对照组分开，与行为学结果一致，表明造模成功；OPLS-DA分析找到9个水溶性差异代谢物和6个脂溶性差异代谢物。就水溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组中肌酐、谷氨酰胺、牛磺酸和γ-氨基丁酸含量显著增加（P<0.05、0.01、0.001），丙二醇、谷氨酸、亮氨酸、缬氨酸和赖氨酸含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。就脂溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组-（CH₂） n和-N （Me₃）₃含量显著升高（P<0.05、0.001），胆固醇的C18/19甲基、R-CH₃、CH₂OPO₂-、-CH=CH-含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。与对照组比较，CUMS造模后5条代谢通路发生显著变化：缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成，牛磺酸和亚硫磺酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，糖降解和糖异生通路和丙酮酸代谢。结论 运用¹H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析和代谢通路分析，阐明抑郁症的发病机制与能量代谢、氨基酸代谢和神经递质合成等相关。     

肉桂水提物对正常大鼠尿液代谢物组的影响

目的:研究肉桂水提物对大鼠尿液中内源性代谢产物的影响。方法:肉桂水提物0.3 g·kg-1大鼠连续ig 30 d,收集0,1,8,15,22,29 d尿样,LC-MS/MS采集样品数据,经主成分分析(PCA),正交信号校正偏最小二乘法判别分析(OSC-PLS-DA)处理数据,结合生物标记物和相关资料,分析肉桂水提物对大鼠内源性代谢产物的影响。结果:肉桂水提物ig 8 d对大鼠尿液中内源性物质的影响最大。与空白组比较,给药组尿样中CPA[18∶1(11Z)/0∶0],Gamma-linolenyl carnitine等物质浓度上升,Deoxyuridine,CerP(d18∶1/22∶0)等物质浓度降低。结论:肉桂水提物能显著影响大鼠体内与基础代谢和细胞信号相关物质的代谢。     

代谢组学技术在疾病诊断中的应用

代谢组学是一门在新陈代谢的动态进程中,系统研究代谢产物的变化规律,揭示机体生命活动代谢本质的科学。本文对代谢组学的概念、特点、研究方向及研究方法作了简要介绍,综述了当前代谢组学技术在临床疾病诊断中的应用,并对代谢组学的发展作了展望。     

基于NOESY序列核磁共振技术冠心病心肌缺血血瘀证代谢组学的实验研究

目的 研究Ameriod环所致冠心病心肌缺血血瘀证小型猪的血清代谢物核磁共振谱群的变化。     

过敏性鼻炎患者肺虚感寒证和肾阳亏虚证血清代谢组学研究

[目的]基于气相色谱/质谱(GC/MS)技术的代谢组学方法,分析过敏性鼻炎肺虚感寒证和肾阳亏虚证患者血清中的内源性小分子代谢物变化,为两种中医证型的科学辨证提供依据。[方法]采用GC/MS技术检测过敏性鼻炎患者肺虚感寒证、肾阳亏虚证以及正常人的血清中小分子代谢物,利用SIMCA-P软件进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘判别法(PLSA-DA)分析,研究血清中小分子代谢物在各组间的差异。[结果]过敏性鼻炎肺虚感寒证、肾阳亏虚证患者代谢谱具有良好的分离趋势,并与健康人对照组有明显区分。利用商业化的代谢物谱库(如Wiley和NIST质谱库)及本实验室建立的标准品代谢物谱库鉴定了23个具有统计学意义的差异代谢物。在过敏性鼻炎肺虚感寒证和肾阳亏虚证患者中筛选得到了丙氨酸、十四烷酸、十六烷酸、9,12-十八碳二烯酸、9-(Z)-O-十八碳烯酸、十八烷酸6种差异代谢产物。[结论]过敏性鼻炎肺虚感寒证和肾阳亏虚证的代谢差异主要体现在氨基酸代谢和脂肪酸代谢方面,基于GC/MS的代谢组学技术可用于临床不同中医证型的分类研究。