影响滇重楼种子萌发及胚根生长因素的研究

目的：为滇重楼种子育苗提供理论指导。方法：采用去除种皮、不同温湿度处理、赤霉素处理、不同种子来源实验,观察滇重楼种子萌发及胚根生长情况。结果：种皮及低温对滇重楼种子萌发及胚根生长的抑制作用明显;外源赤霉素在常温下对滇重楼种子的萌发没有影响,但可以打破低温对滇重楼种子萌发及胚根生长的抑制作用;滇重楼种子萌发和胚根生长的适合湿度范围较宽;不同来源的种子,主要由于成熟度的差异,种子萌发及胚根生长情况差异明显。结论：在滇重楼种子育苗过程中,要选择成熟果实的种子,去除种皮和赤霉素处理均可提高滇重楼种子发根率和发根速度。     

HPLC-TOF/MS鉴别大鼠给药重楼提取物后尿液中甾体皂苷类成分

目的采用高效液相-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术快速分离并鉴别大鼠灌胃给予重楼提取物后尿液中甾体皂苷类成分,以探索重楼皂苷在大鼠体内的代谢途径。方法选用SD大鼠,按照1.6g/kg体质量灌胃给予重楼提取物,收集给药后24h内的尿液。样品分析采用MG-C18柱(3.0mm×100mm,3.0μm),乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,在TOF/MS电喷雾离子源下采集正、负离子模式下的数据。利用TOF/MS得到的精确相对分子质量,对照化学成分数据库,对尿液中的甾体皂苷类成分进行鉴别。结果共鉴别出尿液中20个甾体皂苷原型成分,通过碎片离子以及与对照品相比较鉴别出2对同分异构体:重楼皂苷Ⅶ和偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-α-L-鼠李吡喃糖基(1→3)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷,纤细薯蓣皂苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷。结论该方法准确、可靠,可成功用于重楼体内成分的鉴别,可为药动学和药效学研究提供参考。     

清肺化痰口服液的质量标准研究

目的制定清肺化痰口服液的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别清肺化痰口服液中重楼、浙贝母;高效液相色谱法测定绿原酸的含量,采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-水-醋酸(20∶80∶1.5)为流动相;流速1.0 mL.min-1;检测波长为327 nm。结果重楼及浙贝母鉴别斑点清晰,分离良好。绿原酸对照品在8.0～80.0μg.mL-1范围内与峰面积值具有良好的线性关系。r=0.999 8(n=5),平均加样回收率为98.88%,RSD=1.01%。结论试验方法简便、准确、重现性好,能很好地控制清肺化痰口服液的质量。     

HPLC-ELSD法测定杜仲中绿原酸和鹅掌楸苷

目的 研究脱落酸（ABA）和赤霉素（GA）相关的6个基因（NCED、CYP707A、ABI2、PP2C、GA20ox2、GA20ox3）在滇重楼种子休眠解除过程中的表达特点。方法 分别选取20 ℃层积和20 ℃转4 ℃层积处理后处于不同休眠解除阶段的滇重楼种子为材料,应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析不同层积处理后6个基因在胚和胚乳中的表达水平。结果 在滇重楼种子层积过程中CYP707A、NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2基因在胚和胚乳中表达有差异,而PP2C表达水平无明显变化规律;CYP707A在低温层积后表达水平显著高于高温层积,尤其是在胚中,而NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2在高温和低温层积后均有较高的表达水平,且在胚中的表达水平高于胚乳中。结论 所筛选出的NCED、CYP707A、ABI2、GA20ox2、GA20ox3基因参与滇重楼种子休眠解除过程,可以作为研究滇重楼种子休眠过程的重要基因。     

根际促生菌剂对滇重楼生理特性及无机元素的影响

目的:研究接种不同根际促生菌剂(PGPR)对滇重楼幼苗的生长发育和入药品质的影响,为培育优质滇重楼药材提供参考。方法:通过室温盆栽接种试验方法,采用单因素完全随机设计,研究了5种不同PGPR对滇重楼生理特性及无机元素的影响。结果:接种外源不同PGPR可以不同程度地促进滇重楼的生长发育,延缓叶片的衰老,提高新根茎和老根茎的药用价值。其中,与未接种空白相比,外源接种复合微生物菌肥(FH)和三炬灌金液(SJ)可以增加根系活力及叶片内光合色素含量,增强叶片内的抗氧化酶活性[超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)],减少叶片中丙二醛(MDA)的产生,其减少幅度依次为10.46%~39.62%和20.99%~53.12%,随着生育进程的推进,MDA的抑制率逐渐增加,这有效地延缓了滇重楼叶片的衰老。此外,外源接种不同PGPR可以不同程度地增加新根茎和老根茎内营养元素含量,降低重金属元素含量,提高了滇重楼根茎的药用价值。结论:FH和SJ对滇重楼幼苗生长的促进作用及根茎药用价值的调控效果最佳,为PGPR在滇重楼上的应用推广提供了参考依据。     

林下种植重楼和珠子参根际土壤与原生林地土壤特征差异

目的 比较林下种植重楼和珠子参根际土壤与原生林地土壤特征差异,了解植被变化对土壤特征的影响。方法 以林下移栽种植重楼和珠子参为对象,测定根际土壤特征并与相对应的原生林地土壤数据进行比较。结果 珠子参根际土壤有机碳（46.14 g·kg^–1）、有机质（79.55 g·kg^–1）、全钾（9.65 g·kg^–1）和硝态氮（0.006 g·kg^–1）质量分数较高,而全磷（0.49 g·kg^–1）、速效磷（0.03 g·kg^–1）和铵态氮（0.01 g·kg^–1）质量分数的最高值出现在重楼根际土壤中。原生林地土壤中蔗糖酶（51.66 mg·g^–1·d^–1）、脲酶（372.6 μg·g^–1·d^–1）、过氧化氢酶（9.65 μmol·g^–1·d^–1）和亚硝酸还原酶（932.04 μmol·g^–1·d^–1）活性最高。重楼根际土壤脲酶活性高于珠子参根际土壤,亚硝酸还原酶活性则与之相反,其他几种酶的活性在2种药用植物根际土壤间差异无统计学意义。主成分分析和冗余分析发现,3种土壤在养分构成、理化性质和酶活性方面的变化趋势不同。结论 土壤特征之间差异表明,植被类型养分需求和获取策略有所不同,酶活性及其与土壤理化性质的相关性受到植株自身生理状态和环境条件的双重影响,且往往出现复杂的网状联系。探明药用植物适宜的土壤类型差异能为引种栽培区域划分提供参考。     

球药隔重楼HMGR功能基因保守区序列的克隆与分析

目的研究球药隔重楼次生代谢产物甾体皂苷甲羟戊酸合成途径的一个关键酶即3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的基因,有助于对活性物质的合成进行调控,从而提高产量。方法比较NCBI上公布的11种植物11条HMGR基因mRNA的同源保守区域,设计简并引物,利用RT-PCR技术,以球药隔重楼新鲜茎总RNA反转录的cDNA为模板成功扩增出404 bp的保守区基因片段。结果序列分析表明,球药隔重楼HMGR基因片段与其他7种植物的一致性达到76%～81%,球药隔重楼HMGR氨基酸片段与其他植物有较高的同源性,经Genbank查询为一新的cDNA。结论通过蛋白质特征区、保守区以及进化树分析,初步确定该基因为HMGR基因,这是首次从药用植物球药隔重楼中克隆得到甲羟戊酸途径关键酶HMGR的基因片段,也是百合科植物首次获得的HMGR基因。     

长药隔重楼化学成分研究

目的研究长药隔重楼Paris polyphylla var.pseudothibetica根茎中的化学成分,为阐明其有效成分及扩大重楼属植物的药用资源提供科学依据。方法利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、正反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果从长药隔重楼中分离得到了12个化合物,分别鉴定为:薯蓣皂苷元(1)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、β-谷甾醇(6)、豆甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、山柰酚(10)、β-蜕皮激素(11)、蔗糖(12)。结论化合物1～9为首次从该植物中分离得到。     

The Cotard syndrome. Report of two patients: with a review of the extended spectrum of 'délire des négations'

The Cotard syndrome is characterized by the delusion where an individual insists that he has died or part of his body has decayed. Although described classically in schizophrenia and bipolar disorder, physical disorders including migraine, tumour and trauma have also been associated with the syndrome. Two new cases are described here, the one associated with arteriovenous malformations and the other with probable multiple sclerosis. The delusion has been embarrassing to each patient. Study of such cases may have wider implications for the understanding of the psychotic interpretation of body image, for example that occurring in anorexia nervosa.