人T-bet基因的体外扩增及克隆和鉴定

目的:克隆人T-bet基因,构建其真核表达载体pEGFP-C1-T-bet。方法:实验于2005-07/2006-07在北京大学深圳医院中心实验室完成。①根据Genebank的人T-bet基因的全长cDNA序列,设计合成一对附加BglⅡ和SalⅠ两个限制性内切酶酶切位点的特异性引物。②分离人外周血单个核细胞,提取RNA,用反转录-聚合酶链反应方法将T-bet的编码序列cDNA扩增,装入pMD18-T载体并送去测序。③BglⅡ SalⅠ双酶切质粒pMD18-T-bet,经琼脂糖电泳切胶回收T-bet片段,将T-bet插入载体pEGFP-C1构建成重组真核表达载体pEGFP-C1-T-bet。④用双酶切和聚合酶链反应对插入片段进行分析和验证。结果:①反转录-聚合酶链反应产物经琼脂糖电泳结果显示在预期位置有相对分子质量为1608bp的特异性扩增带。②测序结果证实,T-bet的编码序列和Genbank中T-bet mRNA序列相同。③双酶切和聚合酶链反应结果证实插入片段序列正确。结论:实验成功扩增出人T-bet基因,构建了基因重组真核表达载体pEGFP-C1-T-bet,为探索T-bet基因对免疫细胞的调节作用和肿瘤基因治疗奠定了基础。     

索拉非尼联合TACE治疗中晚期肝癌的临床观察

目的探讨索拉非尼联合经皮肝动脉化疗栓塞术（TACE）治疗中晚期肝癌的疗效。方法选取30例中晚期肝癌患者,给予索拉非尼联合TACE治疗（试验组）,同时选取30例中晚期肝癌患者作为对照组仅行TACE;于1-2个治疗周期后比较临床疗效及生存质量卡氏评分。结果试验组与对照组,治疗3个月后临床获益率分别为83.3%、60.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）,而生存质量卡氏评分2组差异无统计学意义（P〉0.05）;6个月生存率分别为93.3%、86.7%,差异无统计学意义（P〉0.05）,12个月生存率分别为86.4%、60.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论采用索拉非尼联合TACE治疗中晚期肝癌,可提高患者临床获益率及1年生存率。     

p38 MAPK信号通路与肿瘤的关系

丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）级联是细胞内广泛存在的丝／苏氨酸蛋白激酶超家族,是将细胞质的信号传递至细胞核并引起细胞核发生变化的重要物质。目前在人类已鉴定了4条MAPK途径：细胞外信号调节蛋白激酶（extra cellular signal—regulated protein kinase,ERK）途径,C—Jun基末端激酶（c—Jun N—terminal kinase,JNK）／应激活化蛋白（stress—activated protein kinase,SAPK）途径,ERKS／大丝裂素活化蛋白激酶1（big MAP MAP kinase,BMK1）途径和p38MAPK（p38 mitogen activated protein kinases,p38MAPK）传导途径。p38信号途径是MAPK家族中的重要组成部分,     

曲式单一腹主动脉阻断无血切肝术8例报告

目的 报告曲式单一腹主动脉阻断无血切肝术的临床应用体会,探讨术中平均动脉压变化规律。 方法 2009年3~6月江西省肿瘤医院肝脏外科采用曲式单一腹主动脉阻断无血切肝术,切除8例不同部位的肝肿瘤。术中监测病人基础血压与阻断前后及撤钳前后各时间点的血压变化,通过术中给药等方法对血压波动进行调控。结果 8例均安全耐受曲式无血切肝术所导致的血压波动;术中切肝平均出血量96（40～200）mL;腹主动脉阻断平均时间12（7～15）min;所有病人术中术后无需输血,且未出现任何相关并发症。结论 曲式单一腹主动脉阻断无血切肝术所致的平均动脉压变化,术中用药物等可以安全调控。曲式无血切肝法可获得满意的无血切肝效果;该法安全、简单易行,便于基层推广。     

石斛酚在人晶状体上皮细胞中跨膜吸收机制研究

石斛酚为中药石斛的酚类成分，具有抗肿瘤、抗糖尿病性白内障等多种药理活性。该文探索其在人晶状体上皮细胞(HLECs)中跨膜转运的分子机制。体外培养永生化的HLECs,按5 000个/mL细胞接种于激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)培养皿中，通过LSCM观察荧光标记的石斛酚在HLECs内的荧光分布和荧光强度，以荧光强度表示石斛酚的吸收量，监测石斛酚在HLECs内的跨膜转运过程，比较时间、温度、浓度、转运抑制剂以及不同细胞系对石斛酚跨膜吸收和转运的影响；HLECs接种于6孔培养板的爬片上，原子力显微镜(AFM)检测非荧光标记的石斛酚跨膜吸收过程中HLECs表面超微结构的变化。结果显示，石斛酚跨膜吸收存在时间、温度、浓度依赖性，并能够专一性地靶向识别HLECs;能量及载体转运抑制剂降低HLECs对石斛酚的吸收量；在石斛酚跨膜过程中，HLECs细胞膜表面变得更粗糙，并呈现不同程度的凹坑。结果表明，石斛酚跨膜转运方式是通过能量及载体介导的胞吞作用主动吸收实现的。     

肝门下型尾状叶胆管2例

患者1 女性, 43岁, 因"右上腹隐痛半个月"于 2021年10月19日收入赣州市肿瘤医院。患者无其他不适症状, 既往有乙肝病史, 体检未见明显阳性体征。HBV-DNA 6.8×103 U/ml, 甲胎蛋白17.9 μg/L(正常值范围:0～7 μg/L), CA19-9 37.41 U/mL(正常值范围:0～27 U/ml), 其余实验室检查结果正常。CT检查结果提示右肝可见最大径4.8 cm的占位;肝穿刺活检报告为低分化腺癌, 胆管细胞癌可能性大。口服恩替卡韦抗病毒治疗。2021年11月10日在全身麻醉下行肝总动脉和肝十二指肠韧带骨骼化清扫、右肝部分切除术。术中见肝十二指肠韧带内有数枚肿大淋巴结, 质地中等, 肝脏中度硬化, 左肝体积较小, 右肝可及最大径约5 cm的肿块, 边界尚清;先行骨骼化清扫, 其中在沿胆总管-肝总管左缘向上清扫至左肝蒂下方区域时出现胆漏, 仔细分离后发现局部有一根直径0.3 cm的胆管, 其前壁已被剪开, 有胆汁溢出, 用小圆针的针鼻一端经胆管裂口伸入探查, 向右可进入肝总管, 将肝总管前壁顶起, 向左通向尾状叶(图1A、1B), 用6-0 不可吸收线间...     

石斛属药用植物生物工程研究

本文就近年来国内外有关石斛分子生物学方面研究进行了简要概述,主要对石斛分子鉴定、基因工程研究进行了总结.同时提出了今后药用石斛分子生物学研究的前景.