从《温病条辨》看吴鞠通变通应用伤寒经方

吴鞠通所著《温病条辨》常用到伤寒经方,但又不拘泥于伤寒之方,而是以伤寒之方为基础,结合温热性疾病的症候特征,改伤寒经方为其所用,其对伤寒领悟之深,又对温病研究之透,故将伤寒经方变通应用,机法圆活,融会贯通。     

基于NLRP3/Caspase-1信号通路探讨黄连温胆汤改善HepG2细胞胰岛素抵抗的作用机制

目的 探究黄连温胆汤含药血清对胰岛素抵抗体外模型细胞焦亡的作用及机制。方法 设置黄连温胆汤含药血清组和空白血清组，将SD大鼠随机分为2组，按照体表面积换算分别予7.8 g·kg^-1·d^-1的黄连温胆汤药液和同体积的生理盐水灌胃，提取并配制空白血清及不同浓度的含药血清；采用棕榈酸钠处理HepG2细胞构建胰岛素抵抗模型，随机分为空白组、模型组、盐酸二甲双胍组、空白血清组、黄连温胆汤含药血清高剂量组、黄连温胆汤含药血清中剂量组、黄连温胆汤含药血清低剂量组，培养24 h后应用1×10^-7 mol·L^-1胰岛素处理各组细胞15 min，收集细胞上清，采用葡萄糖氧化酶（GOD-POD）法测定各组细胞葡萄糖的含量，并计算葡萄糖消耗量及抑制率，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖情况，筛选黄连温胆汤含药血清最佳剂量。将HepG2细胞随机分为空白组、模型组、黄连温胆汤含药血清组，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）的含量，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组NOD样受体蛋白3（NLRP3） mRNA和蛋白的表达情况。机制部分将HepG2细胞随机分为空白组、空载体组、NLRP3过表达组、空载体+IR组、空载体+IR+黄连温胆汤含药血清组、NLRP3过表达+IR组、NLRP3过表达+IR+黄连温胆汤含药血清组，GOD-POD法测定各组细胞葡萄糖的含量，并计算葡萄糖消耗量。ELISA检测各组细胞IL-1β、IL-18释放水平；Real-time PCR、Western blot技术检测各组细胞胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、消皮素D（GSDMD）及NLRP3 mRNA及蛋白的表达；免疫荧光技术检测NLRP3、GSDMD和Caspase-1的表达。结果 与空白组比较，模型组葡萄糖消耗量显著下降（P<0.01）；与模型组比较，黄连温胆汤含药血清高剂量组葡萄糖消耗量升高最为显著（P<0.01）。与空白组比较，IR-HepG2细胞IL-1β、IL-18释放水平和NLRP3 mRNA与蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，黄连温胆汤含药血清可明显降低IR-HepG2细胞上清IL-1β、IL-18、NLRP3 mRNA与蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）。与空白组、空载体组比较，NLRP3过表达可显著降低细胞葡萄糖消耗量（P<0.01）；与空载体+IR组比较，NLRP3过表达可明显上调IL-1β、IL-18水平和NLRP3、Caspase-1、GSDMD的mRNA及蛋白水平（P<0.05，P<0.01）；与NLRP3+IR组比较，黄连温胆汤含药血清可明显逆转上述指标（P<0.05，P<0.01）。结论 高脂诱导IR-HepG2细胞的胰岛素敏感性与炎症及NLRP3表达密切相关。黄连温胆汤含药血清通过靶向抑制NLRP3/Caspase-1信号通路改善IR-HepG2细胞焦亡，为胰岛素抵抗及2型糖尿病的预防与治疗提供新靶点。     

张福利教授应用滋阴祛湿通络法治疗肝硬化验案1则

<正>肝硬化目前仍然是医学的难点,其本质特征是肝纤维化和肝内结节的形成,临床以肝功能损害和门静脉高压为主要表现,后期常出现严重并发症。现代医学认为,早期的肝纤维化是可逆的,到后期有再生结节形成时则不可逆;治疗主要有针对病因治疗、改善肝功能、抗纤维化治疗和支持疗法,缺乏特异性药物[1]。《难经·五十六难》中提到:肝之积,名曰肥气。肝积包括了各种原因引起的肝脏结聚成形的病变,其中包括现代医学     

中医经典在中医研究生培养中的作用——从“读经典，做临床”谈起

现行中医研究生经典教学存在着中国传统文化知识不足,缺乏对中医的认同感;中医知识结构不尽合理,临床能力差：为科研而科研,中医创新不足等问题,而中医经典是中医之本。“思求精旨,演其所知”是中医研究生必备之能力。熟读经典．勤于临床,是中医研究生打牢基础,提高能力之必需。     

高脂诱导糖耐量低减大鼠模型骨骼肌中相关蛋白的表达

目的:研究45%高脂饲料长程喂养复制糖耐量低减(IGT)大鼠骨骼肌中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),蛋白激酶B(PKB),糖原合成酶激酶3(GSK-3β)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的蛋白表达,探讨该模型产生糖耐量低减的分子机制。方法:20只SD大鼠随机分为2组,分别为正常组和模型组,正常组给予10%热量比对照饲料,模型组给予45%热量比高脂饲料喂养20周建立IGT大鼠模型,分别取骨骼肌采用免疫组化法测定PI3K蛋白含量,Western blot法检测PKB,GSK-3β,GLUT-4蛋白表达,Real Time-PCR法检测IGT大鼠骨骼肌中GLUT-4蛋白相对含量。结果:与正常组比较,IGT组骨骼肌PI3K,PKB,蛋白表达均显著降低(P<0.01),GSK-3β蛋白表达明显升高(P<0.01),IGT模型大鼠骨骼肌中GLUT-4 mRNA的表达降低,但与正常组比较无统计学差异。结论:45%高脂饲料长程喂养建立的IGT模型骨骼肌PI3K,PKB,GSK-3β,GLUT-4蛋白表达发生明显的变化,这可能是该种造模方式导致IGT发生的分子机制之一。     

高脂诱导大鼠IGT模型“痰湿瘀热”证候研究

目的：建立IGT的病证结合大鼠模型,为后续研究奠定基础。以高脂饲料长程喂养结合限制活动空间方法,模拟人类“多食少动”不良生活方式,复制大鼠IGT模型,从表观特征和相应生化指标探讨该模型的“痰湿瘀热”证候属性。方法：采用长程（20 w ）以45％脂肪热量比标准高脂饲料（对照饲料为10％脂肪热量比标准饲料）结合限制活动空间的喂养方式,复制大鼠IGT模型,通过体质量、腹围、体长、活动度、毛色、二便情况、血液颜色及黏稠度等表现结合血糖、血清胰岛素、血脂、血液流变学等指标,探讨IGT模型的“痰湿瘀热”证候属性。结果：造模结束时,高脂饲料组较之对照饲料组,大鼠嗜卧少动、腹型肥胖明显,毛色暗淡稀疏,小便黄、大便溏且异味明显,血液颜色瘀黯而黏稠。与对照饲料组比较,高脂饲料组空腹血糖无明显变化,而餐后2h血糖增高明显,与对照饲料组比较差异显著（P＜0．01）符合IGT诊断标准;高脂饲料组大鼠Lee's指数增加,血脂增高,全血粘度、血浆粘度增加而红细胞变形能力下降,以上指标与对照饲料组比较差异显著（ P＜0．01）。结论：此种模型复制方法得到的IGT大鼠模型,从表观特征以及实验室指标方面基本符合中医“痰湿瘀热”特征,该模型为后续中医药防治IGT的研究奠定模型基础。     

黄连温胆汤对IGT大鼠炎症反应与肝细胞焦亡的影响

目的:探讨高脂饮食诱导糖耐量低减(IGT)大鼠是否存在炎症反应与细胞焦亡及黄连温胆汤对其干预作用。方法:健康雄性SD大鼠予45%脂肪含量饲料喂养20周复制IGT模型。将符合模型标准的大鼠随机分为3组,每组10只,另取10只空白鼠作为正常组。黄连温胆汤组予7.8 g·kg^-1·d^-1复方水煎液,阳性药组予盐酸二甲双胍水溶液0.05 g·kg^-1·d^-1,体积为10 mL·kg^-1·d^-1,正常组和模型组予以同体积蒸馏水。连续灌胃4周后,测体质量、体长、腹围,计算Lee’s指数;测空腹血浆葡萄糖(FPG)及餐后2 h血糖(2 h PG)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白介素-6(IL-6)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测肝组织核转录因子-κB(NF-κB),天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及NOD样受体蛋白3(NLRP3)mRNA及蛋白表达;免疫荧光法测肝组织Caspase-1及NLRP3蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、腹围、体长及Lee’s指数明显增长(P<0.05,P<0.01),FPG及2 h PG水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),血清中IL-6含量和肝组织NF-κB,Caspase-1及NLRP3基因与蛋白表达均显著增加(P<0.01),免疫荧光显示IGT大鼠肝组织Caspase-1和NLRP3表达明显上调,HE染色见IGT大鼠肝组织存在炎症细胞浸润;与模型组比较,黄连温胆汤和盐酸二甲双胍组均可有效减轻IGT大鼠体质量(P<0.01),腹型肥胖,纠正FPG和2 h PG水平(P<0.01),同时能有效降低IGT大鼠血清IL-6含量和肝组织中NF-κB,Caspase-1及NLRP3基因与蛋白表达,减轻肝组织炎症细胞浸润程度。结论:高脂饮食诱导IGT大鼠存在明显炎症反应及细胞焦亡,黄连温胆汤可明显减轻其炎症反应,缓解肝细胞焦亡。     

和胃安神汤对小鼠镇静催眠作用的实验研究

目的:通过小鼠的镇静催眠实验,观察和胃安神汤的催眠作用,评价其效果,为该汤方的临床应用提供治疗学依据。方法:通过小鼠自主活动实验和戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠及睡眠时间,观察和胃安神汤的催眠作用。结果:和胃安神汤能明显减少小鼠的自主活动,使戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导入睡小鼠数增多,并明显延长戊巴比妥钠睡眠时间。结论:和胃安神汤具有镇静催眠作用。     

甘凉养阴法治愈胃胀验案1则

胃胀是一种很常见的临床症状,中医称之为“脘痞”。若将其单列为一种病证,当是中医教材“痞满”一节中的“心下痞”。胃胀病证首见于《灵枢·胀论》,临床常以胃脘痞胀与疼痛并见,且往往以胀满为主,常见于现代医学之慢性表浅性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃肠动力障碍及幽门螺旋杆菌感染等相关疾病。现详载导师采用甘凉养阴法治愈胃胀验案1则,进行理法方药的深入探析,指出医家易犯之诊疗误区。     

中西医结合治疗原发性肾病综合征临床分析

目的：探讨温胆汤加减方配合激素疗法对原发性肾病综合征患者的治疗作用。方法：60例符合诊断标准的原发性肾病综合征患者随机分为治疗组和对照组,分别给予温胆汤加减方配合激素疗法和单纯激素治疗,治疗4周后,检测患者的24h尿蛋白、血清总蛋白、血脂及血液流变学各项指标。结果：治疗4周后,中西医结合治疗组（治疗组）的血清白蛋白升高明显,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）,总胆固醇、甘油三酯及血浆粘度都显著下降,与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：温胆汤加减方联合激素疗法对原发性肾病综合征大量蛋白尿、血浆蛋白降低、高脂血症有较好的疗效。