基于磁微粒化学发光法的sST2检测性能验证

目的对磁微粒化学发光法检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)进行性能验证,评价该方法的稳定性与可靠性。方法采用基于磁微粒化学发光法的试剂盒,对患者及健康人群的血清及厂家提供的质控物质进行检测并对该方法进行性能评价。结果经试验检测,该方法的精密度(血清:低值及高值CV分别为2.2%及2.3%、质控品:低值及高值CV分别为1.7%及1.5%)、重复性(血清:低值及高值CV分别为1.07%及1.41%、质控品:低值及高值CV分别为0.98%及1.23%)、线性范围(血清:1.00~300.00 ng/mL范围内方法一r为0.9999、方法二r为0.9998,质控品:6.40~200.00 ng/mL范围内方法一r为0.9999、方法二r为0.9999)、最低检测限(0.028 ng/mL)、临床可报告范围(40倍稀释)、参考区间验证(健康人样本靶值均在参考区间内)、临床样本对比测试(与参照方法对比阳性及阴性符合率分别为96.88%及96.55%)、样本稳定性测试(高、低值样本室温静置3 d相对偏差为-15.3%及-14.6%,而2~8℃静置7 d相对偏差为-0.44%及0.39%,-20℃静置7 d相对偏差为-2.08%及-0.72%),具有较好稳定性、干扰实验(胆红素≤1 mmol/L、血红蛋白≤10 g/L、脂肪乳≤20 g/L时,对样本检测无明显干扰作用)结果均符合临床应用需求。结论基于磁微粒化学发光法检测试剂盒符合临床应用要求,适于临床应用推广。     

对氧磷酶-1基因多态性与南京地区脑梗死发病风险的关联研究

目的探讨对氧磷酶-1(paraoxonase 1,PON1)基因多态性位点rs705381、rs854572、rs3735590、rs854571和rs662与南京地区人群脑梗死发病的相关性。方法 Massarray SNP分型技术检测并分析292例脑梗死患者和292例健康人群中上述5个多态性位点的基因型和频率分布;AU5400生化分析仪检测上述人群的常规生化指标;二元非条件Logistic回归模型分析上述位点不同基因型与脑梗死发病风险的相关性。结果血压、空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、糖化血红蛋白(Hb A1C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)的表达异常与脑梗死相关(P均0.05)。PON1基因4个多态性位点(rs705381、rs854572、rs3735590和rs854571)在脑梗死患者和健康人群间的基因型频率分布差异无统计学意义(P均0.05),而脑梗死患者PON1基因rs662位点的CT(52.4%vs 41.44%,P0.05,校准OR=1.62,95%CI=1.06~2.49)和CT/TT(65.41%vs 56.16%,P0.05,校准OR=1.49,95%CI=1.00~2.25)基因型频率分布明显高于健康人群,但与上述临床指标无明显的相关性。结论 PON1基因rs662位点的多态性可能是南京地区脑梗死发病的遗传易感因素。     

银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌p53基因的突变

建立银染单链构象多态性技术检测原发性肝癌ｐ５３基因突变。方法用银染及单链构象多态性技术检测１６９例原发性肝癌的癌变及癌旁正常组织Ｐ５３基因第７，８外显子的突变，并进行了ＤＮＡ顺序，鉴定突变位点。４例患者Ｐ５３基因Ｅ７中第２４９叫密码子第３号碱基发生了Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ的颠换，２例患者Ｅ８中第２７３号密码子第１号碱基发生了Ｃ：Ｇ→Ｔ：Ａ的转换，总的突变率达３８％；６例Ｐ５３基因突变的癌变组织中乙型肝炎病     

氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞紧密连结蛋白ZO-1表达的影响

目的 探讨氯吡格雷（Clopidogrel）对人胃黏膜上皮细胞（GES-1）的损伤机制.方法 建立GES-1单层细胞模型,将细胞分为阴性对照组、U0126干预组、氯吡格雷干预组、U0126预处理后氯吡格雷干预组（联合组）,采用MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;免疫细胞化学检测各组p-ERK1/2的表达情况;采用Western blotting检测各细胞组p-ERK1/2和紧密连接蛋白ZO-1的表达量.结果 与阴性对照组比较,U0126干预组、氯吡格雷干预组、U0126预处理后氯吡格雷干预组的细胞增殖明显受到抑制（P＜0.05）;Western blotting结果显示：与阴性对照组比较,后3组的p-ERK1/2表达下降,与免疫细胞化学的趋势一致;ZO-1表达趋势亦与p-ERK1/2表达一致.结论 在GES-1细胞模型中,氯吡格雷可能通过抑制p-ERK1/2的表达来降低ZO-1的表达,从而损伤GES-1细胞.     

白细胞介素10基因多态性与子宫内膜异位症易感性的关系研究

Objective To explore the relationship of the endometriosis susceptibility and polymorphism of up stream of IL-10 promoter at the site of 1082( G→A), 819(C→T) and 592(C→A).Methods A total of 214 patients with endometriosis and 160 healthy individuals were enrolled and divided into patient group and control group in this study.The polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) was applied to detect the base transition in the up stream of IL-10 promoter at the site of 1082 ( G→A), 819 (C→T) and 592 ( C→A ).SPSS11.0 software was applied to analysis frequencies of all genotypes.Results There was no difference in polymorphism of IL-10-1082 between the endometriosis ( AA :87.90%, GA: 12.10% ) and control group( AA: 87.50%, GA: 12.50% ).The rate of TT, CT and CC genotype IL-10-819 was the same as the AA, CA and CC individually.There was no difference in the polymorphism of IL-10-819 or IL-10-592 between the endometriosis group( TT or AA:41.12%, CT or CA:47.66%, CC:11.21%) and control group(χ2 =5.87,P=0.053).However, there were significant difference in the genotype of CT of IL-10-819 or CA of IL-10-592 between the endometriosis group and control group(after adjust OR = 1.88, 95% CI = 1.10 - 3.21, χ2 = 5.24, P = 0.021 ), and the allele C of IL-10-819 or IL-10-592 were close related with occurrence of endometriosis (OR= 1.42,95% CI = 1.04 - 1.95, χ2 = 4.81, P = 0.028 ).The IL-10 level in the plasma of endometriosis group with genotype of CC (CC), CT (CA) of IL-10-819(-592) were significant higher than those with TT (AA)(CA/CT:(50.12±82.40) pg/ml, CC: (91.00 ± 118.23) pg/ml, TT/AA: (21.45 ±22.10) pg/ml)(F=2.492,P=0.048;F=1.852,P=0.008).Conclusion The allele C of IL-10-819 or IL-10-592 was close related to the high level expression of IL-10, and it is the risk of the occurrence of endometriosis.     

冠心病患者血浆OLAB、BNP和CRP水平变化分析

检测冠心病患者血浆OLAB、BNP和CRP水平变化, 探讨冠心病发病机制及不稳定性心绞痛(UAP)治疗前后对其影响.用RIA和ELISA法对124例冠心病患者和30名对照者血浆中的OLAB、BNP和CRP水平变化及相关性进行研究, 同时对48例UAP经皮冠状动脉形成术(PTCA)治疗前、后对上述三项指标的变化进行分析; 结果表明冠心病患者与对照组比较BNP水平有显著性差异(P＜0.01),尤其是AMI和UAP组比SAP组升高更明显; CRP水平比对照组明显增高(P＜0.05),特别是不稳定性心绞痛和AMI组升高明显(P＜0.05);AMI组血浆OLAB水平明显高于正常和其他两组, OLAB、BNP和CRP三项在UAP组中治疗前后比较差异显著(P＜0.01).总之,OLAB、BNP和CRP参与了冠心病的发病过程, 并可预测心肌梗死患者远期心功能恢复的情况, UAP组经PTCA支架术后, 三项指标均明显降低, 可作为疗效观察的一个重要参数, OLAB参与了冠状动脉粥样硬化的全过程及AMI的发病始末.     

胃癌中Autotaxin基因、CD44v6分子、DNA含量的相关性研究

Antotaxin(ATX)是一种肿瘤细胞自分泌运动因子,与肿瘤浸润转移关系密切。CD44v6是粘附分子家族成员之一,也与肿瘤浸润转移复发有关。细胞核DNA含量是反映细胞增殖状态的一个良好指标,而细胞无限增殖与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。胃癌在我国常见,我们拟检测胃癌组织中ATX,CD44v6的表达特征及细胞核DNA含量分析,对三者之间进行相关性分析,探讨以ATX,CD44v6,DNA含量分析联合来判断胃癌浸润、转移能力的可能性和方法     

流式细胞术在胃癌术前联合血液和淋巴化疗效果评价中的作用研究

目的探讨胃癌术前联合血液和淋巴途径化疗对胃癌患者的治疗效果,并分析流式细胞术在其疗效判断中的作用.方法把64例患者随机分成二组,一组行动脉灌注化疗术前1 w经股动脉插管至胃右动脉或胃网膜右动脉灌注化疗药;另一组行淋巴化疗加动脉灌注术前10 d行内镜胃黏膜下多点注入化疗药使其从淋巴道吸收,7 d时再行动脉灌注化疗.化疗前取64例胃镜癌组织标本及其血标本,化疗后取手术实体组织及血标本,然后分别用流式细胞术进行DNA含量、细胞凋亡率(APO)及凋亡相关蛋白Bc1-2、血CD3、CD4、CD8及NK细胞的检测.试验设41例正常对照.结果①联合治疗组的DNA异倍体发生率与单一治疗组及治疗前癌组织无显著性差异(P＞0.05),但其SPF较前两者有显著性(P＜0.05)和高度显著性差异(P＜0.01);②联合治疗组的AP()发生率及Bcl-2表达较单一治疗组及治疗前癌组织有显著性(P＜0.05)和高度显著性差异(P＜0.01);③联合治疗组的(CD4+/CD8+＜1)%,即CD4+/CD8+比例倒置率较单一治疗组和治疗前均有高度显著性差异(P＜0.01);④联合治疗组的NK细胞活性(即CD(16+56)+细胞)较单一治疗组和治疗前有高度显著性差异(P＜0.01).结论联合经血液途径和淋巴途径给药(化疗药和生物制剂)比单行血液途径给药更能促进癌细胞的凋亡发生,抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,增强机体的免疫功能,对肿瘤的治疗和预后判断有积极的意义.流式细胞术完全可应用于肿瘤患者术前淋巴化疗的效果评价,值得各实验室推广.     

AFP、AFU在肝细胞肝癌诊断中的应用

肝细胞癌（ＨＣＣ）是常见的恶性肿瘤之一 ,总体预后差 ,而早期治疗能使ＨＣＣ患者５年生存率得到明显改善 ,目前对高危人群仍以ＡＦＰ为筛选项目 ,但受其敏感性和特异性方面的一些问题 ,故单一的ＡＦＰ作为ＨＣＣ标志物有一定的缺陷 ,我们用ａ -Ｌ-岩藻酶（ＡＦＵ）与ＡＦＰ同时检测 ,来观察ＨＣＣ患者血清中两者之间的变化 ,为临床的早期诊断、治疗提供依据。对象和方法一、对象 :（一）正常对照组 :３０例（男１７ ,女１３） ,年龄４５±２５岁,均为我院门诊体检合格的健康者 ,其心、肝、肾、肺等功能正常。（二）病患者 :肝癌患者４１…     

热应激蛋白70及抗体水平与中暑发生发展关系的研究

热环境可使机体产生热应激反应 (ＨＳＲ) ,此反应的重要特点之一是选择性的合成一组热应激蛋白 70 (ＨＳＰ70 ) ,它是一组保护机体的蛋白质 ,被称之为“看家蛋白”[1] 。ＨＳＰ70 是含量最多 ,最重要的一种非特异性的细胞保护蛋白。有关高温中暑病人血浆中ＨＳＰ70 及抗体水平变化 ,国内报道较少。我们应用免疫印迹法[2 ] 及免包被的酶联免疫反应技术[3 ] ,检测了 74例高温中暑病人血浆中ＨＳＰ70 抗原和抗体水平 ,并与对照组进行了比较 ,进一步探讨ＨＳＰ70 水平及其抗体滴度的变化在热应激与热适应中的作用。一、资料与方法1 对象及诊断标…