RI基因真核表达载体的构建及其对C6胶质瘤细胞生长的影响

目的通过构建核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor, RI)基因的真核表达载体——pLNCX-ri, 并转染C6神经胶质瘤细胞,探讨RI抑制肿瘤生长的作用机制.方法用Nde I / Xho从已构建的pET-ri上切下1.4 kb的RI基因片段,再构建到pLNCX上,获得真核表达载体(pLNCX-ri),采用Lipofect AMINE辅助转染大鼠C6神经胶质瘤细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,用Western blotting 检测RI基因的表达水平.将转染阳性的C6神经胶质瘤细胞接种于大鼠皮下,观察肿瘤的生长情况.结果在转染的C6神经胶质瘤细胞中,RI基因的表达量明显高于未转染的C6神经胶质瘤细胞,转染阳性的C6神经胶质瘤细胞在大鼠体内的成瘤潜伏期23±5.7天(对照组14±3.5天),瘤组织重量转染组1.35±0.43g比对照组2.40±0.61g(P＜0.01)明显下降,瘤组织的血管密度转染组27.2±4.31比对照组47±6.54(P＜0.01)明显减少.结论RI基因的转染对肿瘤的生长有明显抑制作用,其作用机制可能是抑制肿瘤组织血管的形成.     

Y型头皮式套管针在新生儿TPN的应用及护理

全胃肠外营养(简称TPN)是通过消化道以外的途径为病人提供全面充足的热量,以及所需各种营养物质的方法。自1999年1月以来,我科在INCU病房采用Y型头皮留置针外周静脉留置28例,成功地完成了TPN的输注,同时也完成了其它药物的治疗。现将操作方法及护理介绍如下。     

泛素依赖的蛋白酶体水解通路对p53转录活性的作用

目的　探讨 p5 3的转录过程与其泛素调节的蛋白降解途径的相互关系。方法　采用瞬时转染报告基因测定法 ,测定细胞裂解液荧光素酶活性 (p5 3的转录活性 )或Western -blot、免疫共沉淀测定细胞内 p5 3蛋白水平。结果　删除 p5 3N末端 1- 19个氨基酸 (mdm2结合位点 ) ,可显著减少 p5 3的转录活性 ,提示p5 3的降解片段不能与其转录活性片段相分离。特异性蛋白酶体抑制剂存在时 ,细胞内 p5 3稳态蛋白水平升高 ,而 p5 3的转录活性受到显著的抑制。UBA酶 (ubiquitin -activatingenzyme)失活 ,导致p5 3转录功能降低。结论　p5 3的蛋白水解途径对其转录反应是必须的     

Y型头皮留置针在新生儿全胃肠外营养中的应用及护理

全胃肠外营养(简称TPN)是通过消化道以外的途径为病人提供全面充足的热量,以及所需各种营养物质的方法.又分为中心静脉营养及周围静脉营养两种.临床多采用全合一配制法,即将肠外营养混合液从静脉输注.它要求具有一定操作空间及消毒设备,在配制过程中容易受到污染,在基层医院不利于推广.同时由于输注TPN时需限制时间、速度,可能影响其他药物输注,1999年1月以来我科在INCU病房采用Y型头皮留置针外周静脉留置28例,成功地完成了TPN的输注,同时也完成了其他药物的治疗.现介绍如下.     

融合蛋白GST-hRI的可溶性表达及对CCl4引起的急性肝损伤的保护作用

目的:观察可溶性表达的融合蛋白GST-hRI对CCl4引起的急性肝损伤的保护作用。方法:构建pGEX-6p-1-hri表达质粒。在0.5 mol/L IPTG浓度下,调整温度诱导目的融合蛋白的最大可溶性表达。用Western Blotting检测GST-hRI的表达,用亲和层析法对GST-hRI进行分离纯化。将纯化后的GST-hRI腹腔注射给BALB/c小鼠,预先保护7 d后,再腹腔注射CCl4造成急性肝损伤。检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平和肝脏的超氧化物歧化酶、黄嘌呤氧化酶、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧物酶指标,并在光镜下检测肝细胞的损伤程度。结果:0.5 mmol/L IPTG,26℃诱导表达8 h,超声破碎菌体所得到的上清中可溶性GST-hRI的表达量约占超声离心后上清总蛋白4.5%,与沉淀中的比例约为27%。与CCl4损伤组相比,GST-hRI治疗组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和丙二醛水平明显下降(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平明显增加(P<0.05),黄嘌呤氧化酶水平基本没有变化。与hRI治疗组相比,GST-hRI治疗组的各项指标差异有统计学意义(P<0.05...     

219例应用重组人生长激素的矮小儿童随访调查

目的 随访哈尔滨地区应用重组人生长激素（rhGH）治疗的矮小儿童219例,探讨其应用rhGH时的年龄分布、应用时间、及副作用情况.方法 对已应用rhGH的219例不同原因矮小儿童,其中男147例（67.1%）,女72例（32.9%）,采用统一的调查表,通过查阅病案获取资料,进行随访.随访内容包括：开始应用rhGH时的年龄、应用时间及副作用情况.结果 不同原因矮小儿童开始用药年龄多在12岁以后,占70.3%;用药时间多在6个月以内,占全部患儿的67.1%,最长者是GHD和Turner综合征患儿,用药时间超过3年;rhGH副作用小.结论 哈尔滨地区应用rhGH的矮小儿童中,应用rhGH的起始年龄均偏大,影响疗效;由于依从性及经济原因,应用rhGH时间均较短;在规定剂量内,适应症者可以大胆使用.对矮小患儿应明确病因,给予尽早治疗.     

日本砺波综合医院人性化护理的实施与启示

黑龙江省医院与日本砺波综合医院是已有20多年历史的友好医院.笔者2006年8月赴该医院研修6个月,对该医院在尊重、理解病人,一切上作都为病人提供方便和周到的、人性化的护理理念和具体实施方法有很深的感悟.现将情况具体介绍如下.     

对夜班护士膳食调配建议

夜班护士由于体内生物钟的改变、不规律的生活和休息及需经常参加抢救和护理危重病人,单独处理疑难问题不论在心理上与体力上都须承受较大的压力,生理消耗较大。因此,需要合理安排膳食,改善饮食质量,保证吃好、吃饱,使其每天摄入的能量,足以弥补消耗,夜班护士合理的膳食应具备下列几点: 1 进食的总量要足够 摄入的总热量,必须满足人体的需要量,从事中等体力劳动的护士(年龄18～44岁、体重55千克)每日需热能2700kcal,夜班护士除了早、中、晚餐外,还要保证吃一顿夜餐,一日三餐必须保证平衡膳食做到荤素搭配、粗细搭配、干稀搭配,为了刺激和增进食欲,在主、副食方面要以多样化、易消化为原     

236例早产儿的观察及护理

随着围产医学的进步,足月儿疾病得到控制及改善,住院新生儿中早产儿越来越多.早产儿即未成熟儿,指胎龄大于28周未满37周,出生体重＜2500g,身长47cm以下的活产新生儿.由于各器官组织发育不成熟,生理功能低下,死亡率是足月儿的10倍.但近年来随着护理质量的提高,早产儿的死亡率正在逐年降低.我科于1999年1月～2005年12月共收治早产儿236例.现将观察指标及护理介绍如下.     

逆转录病毒载体介导hRI在小鼠模型中抑制黑色素瘤生长的研究

目的 以C57BL／6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤为模型，研究载有抗血管生成序列的逆转录病毒载体的基因治疗系统，对黑色素瘤的抗肿瘤效应及其对血液的近期影响。方法 携带hRI的cDNA序列的重组转录病毒pLNCX—hRI颗粒被浓缩和纯化后，以空载体病毒颗粒及生理盐水为对照，静脉注射于肿瘤模型小鼠体内。检测目的基因在小鼠体内各脏器的表达水平，其对肿瘤生长的抑制作用，以及血液生化和细胞指标。结果转染后hRI基因的表达抑制了肿瘤生长，同时在观察期内无血液指标的改变。结论携带hRI基因的逆转录病毒载体基因治疗系统，可以在体内实现对B16黑色素瘤的抑制作用。