呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞诱导COX-2表达的相关研究

目的探讨呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染肺巨噬细胞RAW264．7细胞时,环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）的表达及其相关炎症介质PGE2（Prostaglandin E2）的水平变化,初步阐明COX-2在RSV感染所致炎性反应中的作用,为研究RSV感染时的炎症产生机理,临床治疗RSV感染所致的炎症反应等提供一定的理论依据。方法RSV感染体外培养的RAW264．7巨噬细胞,分别于不同感染时间点（4、8、16、24h）收集细胞和细胞培养上清。用半定量逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和Western-blot法分别检测细胞中环氧化酶．2（COX-2）的mRNA和蛋白表达,酶联免疫法（ELISA）检测细胞培养上清PGE2含量变化。结果RSV感染8h后即上调RAW264．7巨噬细胞COX-2mRNA转录和蛋白水平的表达。细胞培养上清中PGE2的含量逐渐增加。各指标的变化与正常对照相比差异均有显著性,并且随着RSV感染时间的延长而表达量增加。结论RSV感染RAW264．7巨噬细胞早期即可诱导COX-2的表达,同时生成大量的PGE2,PGE2的合成主要受COX-2的调节,COX．2参与了RSV感染所致的炎症反应。     

春分时节话养生

“一年之计在于春”—春为四时之首,万象更新之始,也是人保健养生的重要起点。春分,二十四节气之一,在每年公历3月20日左右。“春分者,阴阳相半也。故昼夜均而寒暑平。”一个“分”字,道出了昼夜、寒暑的界限。古人认为,天地、阴阳二气相争,到春分这一天,阴阳二气达到平衡状态,昼夜平分,同时也意味着春天已过去一半了。人,作为自然之子,与春之阳气相应,机体代谢旺盛。那么,“春分”时节,我们日常该如何保健养生呢?     

蝉花蛋白提取方法比较

目的:比较不同方法所提蝉花蛋白的浓度、数量和体外抗肿瘤活性,筛选最适蝉花蛋白提取方法。方法:采用六种方法提取蝉花中的总蛋白质,分别为Tris-HCl/饱和酚法(A法)、TCA/丙酮沉淀法(B法)、两步法(C法)、蜗牛酶酶解法(D法)、Tris-HCl提取法(E法)、磷酸盐缓冲液(PBS)提取法(F法),通过蛋白质浓度检测、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及体外抗人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤活性检测,比较不同提取方法对蛋白提取效果的影响。结果:从提取浓度来看,A法最优;从SDS-PAGE结果看,A法和B法即蛋白质沉淀法效果较好,条带丰度好且较清晰,C法条带丰度较好,但较模糊;从蛋白体外抗肿瘤活性结果看,C法、E法、F法的蛋白活性较高。结论:方法 A、B、C均适用于蝉花总蛋白的提取,但方法 A、B在制备过程中无法保持蝉花蛋白的生物活性,而方法 C即两步法提取的蝉花蛋白浓度较高、种类较多,体外抗MCF-7肿瘤活性也较强,为蝉花蛋白提取最适方法。     

呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞诱导炎性基因表达的部分机制研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞时前炎介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的基因表达变化及其调控的相关机制,为研究RSV的致病机制及有效预防和治疗RSV疾病提供新的思路。方法以RSV感染RAW264.7巨噬细胞,并设立不同的感染时间点(1h、4h、8h、16h和24h),同时给予PDTC(核转录因子NF-κB的特异性抑制剂)处理。以紫外线灭活RSV(UV-RSV)来分析有传染性的病毒的感染变化。收集各组细胞,用Western blot法检测细胞核内活性NF-κBp65蛋白的表达,半定量RT-PCR法检测TNF-α和iNOS mRNA表达量。结果RSV感染4h后,细胞核内活性NF-κBp65蛋白、TNF-α和iNOS mRNA表达均明显升高,各指标的变化与正常对照相比,差异均有显著性,并且与RSV感染存在时间依赖关系。当加入PDTC抑制NF-κB的入核活化后,则可显著下调相应时间点的RSV感染升高的TNF-α和iNOS mRNA表达量,使其降低至基线水平。而UV-RSV感染后并不引起NF-κB蛋白、TNF-α和iNOS mRNA的表达量增加(P>0.05)。结论RSV感染巨噬细胞可诱导前炎基因TNF-α和iNOS的大量表达,其表达可能主要依赖NF-κB活化,并且与病毒复制有关。提示在RSV感染的巨噬细胞中,NF-κB活化对TNF-α和iNOS基因表达具有重要的正调控作用。     

呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞活化Toll样受体3介导的抗病毒作用研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞(RAW264.7细胞)后,Toll样受体3(TLR3)的水平变化及其介导产生的I型干扰素的抗病毒作用。方法 RSV感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,并给予TLR3特异性抗体处理,分别于感染的4、8、12、16和24h后收集各组细胞。以未感染病毒的细胞为对照组。用Trizol提取细胞总RNA,半定量RT-PCR法检测TLR3、干扰素α(IFN-α),干扰素β(IFN-β),RSVF蛋白的mRNA表达量变化。结果 (1)RSV感染RAW264.7细胞后,TLR3、IFN-α、IFN-β、RSVF蛋白的mRNA表达量均升高且有时间依赖性,TLR3mRNA24h表达量是基础表达量的6倍多,IFN-α,IFN-βmRNA24h表达量是基础表达量的4倍多,RSVF蛋白mRNA是基础表达量的近1.8倍。(2)预先给予TLR3抗体处理以抑制TLR3受体后,再行RSV感染,IFN-α和IFN-β的mRNA表达量虽有升高,但较感染组相比均有下降,mRNA表达在12h后显著降低,且IFN-β的mRNA表达量下调更明显。但RSVF基因的mRNA表达在12h后升高有统计学差异,24h升高有显著性差异。结论 RSV感染RAW264.7巨噬细胞后可上调TLR3表达,其活化细胞介导产生的I型干扰素起抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平。     

互动式健康教育护理在烧伤患者中的应用效果

目的探讨互动式健康教育护理在烧伤患者中的应用效果。方法选取2020年6月至2021年12月于济南市中心医院接受治疗的二度烧烫伤患者80例为研究对象,根据随机数字法分为对照组和观察组,各40例。对照组实施常规护理干预,观察组实施互动式健康教育护理。对比两组患者知识掌握程度,并使用温哥华瘢痕量表(Vancouver Scar Scale,VSS)和疾病自我管理评分量表(Chronic Disease Self-Managerment Study Measure,CDSMS),分别测评两组患者瘢痕情况和自我管理能力。结果入院当日,两组各项临床指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);出院前1 d,观察组知识掌握程度及CDSMS评分均高于对照组,且VSS评分低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论实施互动式健康教育护理能够有效改善烧伤患者瘢痕情况,提升其知识掌握度,从而改善自我管理能力。