皂苷的生物转化研究进展

皂苷是存在于中药中的一类较复杂的糖苷类化合物.生物转化是利用各种酶体系对天然活性化合物进行合成与结构修饰.利用生物转化技术能对皂苷完成一些有机合成难以进行的反应,得到更具新药开发价值的目标化合物.综述近几年微生物和游离酶转化技术对皂苷结构修饰的研究进展,并探讨其生物转化研究的发展方向.     

小果菝葜化学成分的研究

目的 研究小果菝葜Smilax davidiana的化学成分.方法 采用60%乙醇回流提取,大孔吸附树脂SP825、Sephadex LH-20、硅胶和ODS柱色谱,以及制备HPLC等方法进行分离纯化,并根据化合物的光谱数据鉴定其结构.结果 从小果菝葜中分离得到12个化合物,分别鉴定为白藜芦醇(Ⅰ)、反式白藜芦醇-3-O-β-D吡哺葡萄糖苷(Ⅱ)、顺式白藜芦醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅳ)、3'-甲氧基一槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅴ)、儿茶素(Ⅵ)、表儿茶素(Ⅶ)、1'-O-苄基-α-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、1'-O-苯乙基-α-L-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅸ)、1'-O-苯乙基-β-D-呋哺芹菜糖基-(1-2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅹ)、2,4.6-三羟基苯乙酮-2,4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅺ)、3-甲基-正丁醇-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅻ).结论 化合物Ⅴ、Ⅶ～Ⅹ和Ⅻ为首次从菝葜属植物中分离得到,化合物Ⅰ～Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅺ为首次从该植物中分离得到.     

知母中知母皂苷BⅡ的TLC鉴别及HPLC法含量测定

目的:建立知母药材中知母皂苷BⅡ的 TLC 鉴别及 HPLC 含量测定方法。方法:TLC 法,展开剂:氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,显色剂:10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。HPLC 法,色谱柱:HiQ-sil C_(18)(5μm,4.6mm×250mm),流动相:甲醇-水(53:47),流速:0.8 mL·min~(-1),检测:蒸发光散射检测器(ELSD),漂移管温度:100℃,气体流速:2.6L·min~(-1)。结果:3批药材中知母皂苷 BⅡ成分的 TLC 分离效果均较好,HPLC 法测得知母皂苷 BⅡ的平均回收率为97.7%,RSD 为1.8%。结论:该方法准确可靠,可用于知母药材质量控制。     

知母有效成分对拟痴呆模型大鼠学习记忆的影响及机制

目的研究知母有效成分(化合物9714)对拟血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆的影响及其作用机制。方法采用双侧颈总动脉结扎(Commoncarotidarteryocclusion,CCAO)致拟VD模型大鼠,连续给药40d,以Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,以免疫组化法检测大鼠脑皮质BDNF、ICAM1、VCAM1的表达。结果化合物971410、20、40mg·kg-1组能明显缩短定位航行试验中d2、d3的逃避潜伏期,提高空间搜索试验中原平台象限游泳距离占总距离的百分比(P<0.05,P<0.01);20、40mg·kg-1组能明显增加模型动物脑皮质BDNF的表达,降低脑皮质ICAM1的表达(P<0.05,P<0.01)。结论化合物9714能提高拟VD大鼠的学习记忆能力,同时对缺血后的神经元损伤、炎性损伤具有一定的保护作用。     

穿山龙中甾体皂苷的分离鉴定

 目的分离、鉴定穿山龙即穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)根茎中的甾体皂苷类化合物。方法采用溶剂提取、硅胶柱色谱及制备高效液相色谱等方法进行分离,通过化学和光谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离得到4种甾体皂苷类化合物,其化学结构分别鉴定为:薯蓣皂苷(Ⅰ),纤细薯蓣皂苷(Ⅱ),26-O-β-D-吡喃葡萄糖基25(R)-22-羟基-呋甾-△⁵⁽⁶⁾-烯- 3β,26-二羟基-3-O-{[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)}-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ),26-O-β-D-吡喃葡萄糖基25(R)-22-羟基-呋甾-△⁵⁽⁶⁾-烯-3β,26-二羟基-3-O-{[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)}-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)。结论化合物Ⅲ,Ⅳ为首次从穿龙薯蓣中分离得到的呋喃甾烷型皂苷。     

天然产物的生物转化研究进展

以植物细胞培养、微生物和游离酶为生物催化剂的生物转化技术,广泛用于天然产物的合成和对先导化合物的结构改造,其反应包括水解、羟化、糖基化、酯化等多种类型,在生物转化体系的筛选、转化条件的优化、转化率的提高及酶的分离纯化方面取得了一些进展。这对于增加天然产物结构多样性、寻找药物先导化合物、促进珍稀物种资源可持续利用、提高生产效率、降低成本等多个环节均有广泛的应用价值。     

天王补心丸安神活性部位的筛选

目的 确定天王补心丸全方的安神活性部位。方法 采用协同睡眠、自主活动、抗惊厥等指标，观察天王补心丸的4个化学部位对小鼠的作用。结果 天王补心丸Ⅱ部位对小鼠有较好的协同睡眠、抗惊厥作用，天王补心丸Ⅲ部位对小鼠有较好的抑制自主活动、抗惊厥作用。结论 天王补心丸Ⅱ、Ⅲ部位为天王补心丸的安神活性部位。     

HPLC-CAD同时测定知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量

目的:建立HPLC-CAD方法同时测定知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量。方法:采用Acclaim-C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,3μm),以乙腈(A)-0.2%醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,15%A→21%A;10~12 min,21%A→23%A,12~30 min,23%A→25%A),流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃;电雾式检测器(CAD)参数:采集频率10 Hz,雾化温度55℃,滤波为5 s。结果:知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ均具有良好的线性关系(r>0.999),LOD分别为0.43 ng和1.20 ng,LOQ分别为1.28 ng和4.80 ng,精密度、重复性、24 h稳定性试验的RSD均小于3.0%,平均加样回收率分别为102.3%和95.2%。11批样品中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量范围分别为0.54%~1.69%和3.27%~5.57%。结论:建立的HPLC-CAD法可同时对知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ进行含量测定,为知母药材和饮片的检测分析和质量控制提供了新的方法。     

甾体皂苷化合物抑制血栓形成作用的研究

目的：观察甾体皂苷化合物(化合物9714)对血栓形成、血小板聚集及血液流变学的影响。方法：采用动静脉旁路血栓形成模型，测定化合物9714对血栓形成的影响；采用比浊法，测定其对大鼠血小板聚集的影响；采用大鼠急性血淤模型，测定其对血液流变学的影响。结果：化合物971410，20，40mg／kg组均能明显减轻血栓的干重及湿重；可抑制ADP、胶原诱导的大鼠血小板聚集；降低急性血淤大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集性，以及增强红细胞变形性。结论：化合物9714通过抑制血小板聚集、改善血液流变学来发挥其抗血栓形成作用。     

甾体皂苷化合物对局灶性脑缺血大鼠的保护作用

目的：研究甾体皂苷化合物(化合物9714)对局灶性脑缺血大鼠的影响。方法：采用FeCl3局部损伤血管，诱发血栓形成，造成局灶性脑缺血模型，观察化合物9714对模型大鼠神经症状、脑梗塞范围、脑水肿以及皮质血管脑血流量的影响。结果：化合物9714 20，40mg／kg组能明显减轻模型大鼠的神经症状及脑梗塞范围，增加模型大鼠的脑血流量；化合物9714 40mg／kg组能明显改善模型大鼠的患侧脑水肿程度，延长脑血流量下降50％所需时间。结论：化合物9714对血栓所致局灶性脑缺血性损伤具有明显的修复作用。