小干扰RNA非病毒递送载体的研究进展

虽然RNA干扰应用在哺乳动物细胞中的时间较短,但siRNA强效抑制靶基因表达的功能使它成为目前广泛研究的一种药物。siRNA作为新型的基因药物可有效治疗多种恶性疾病,比如癌症、病毒性感染疾病、遗传及代谢紊乱性疾病等。siRNA在体内不稳定,易被核酸酶降解,有触发免疫反应的倾向,因此选择安全稳定的载体将其递送到靶组织靶细胞是siRNA在体内发挥作用的前提。非病毒载体低毒、低免疫反应且结构可控,目前已被广泛使用来解决基因递送过程中遇到的困难。文章主要综述了近年来研究广泛的siRNA非病毒递送载体:脂质体、阳离子聚合物、树枝状大分子、无机纳米材料等。     

谷物萃取液和阳离子界面活性剂治疗儿童鼻窦炎疗效观察

目的观察谷物萃取液和阳离子界面活性剂(A.SAP生物抗菌剂)治疗儿童鼻窦炎的疗效。方法将门诊6~8岁儿童鼻窦炎患儿80例随机分成两组,第1组,桉柠蒎胶囊,0.12/次,2次/日,连服7日,谷物萃取液和阳离子界面活性剂混合液(A.SAP生物抗菌剂)鼻腔取代治疗,1次/d,连用5日。第2组,单用桉柠蒎胶囊,0.12/次,2次/日,连服7日。7日后两组病例之间相互对比疗效。结果第1组的有效率为97.5%,第2组的有效率为82.5%,第1组和第2组疗效比较差异显著,有统计学意义。结论谷物萃取液和阳离子界面活性剂混合液(A.SAP生物抗菌剂)行鼻腔取代治疗儿童鼻窦炎疗效确切。     

诱导痰炎性标志物对老年人晚发哮喘严重程度判断和鉴别诊断的价值

目的探讨老年人晚发哮喘(LOA)患者诱导痰中嗜酸细胞和嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)水平与其严重程度的关系及与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的鉴别诊断价值。方法随机选择54名LOA患者,检测肺功能并分别采用瑞氏染色及荧光免疫法检测高渗盐水诱导痰中嗜酸细胞数量和ECP水平。选择25例老年COPD患者和10例老年健康人作为对照。结果LOA患者诱导痰中嗜酸细胞数量和ECP水平与患者第一秒用力呼气容积占用力肺活量百分比呈显著负相关(r值为-0.68、-0.61,均为P<0.01)。患者诱导痰中嗜酸细胞数量〔(19.4±8.1)%〕和ECP水平〔(391±186)μg/L〕显著高于老年COPD组〔(3.1±1.4)%和(51±26)μg/L,P<0.01〕和老年健康组〔(1.2±0.7)%和(44±22)μg/L,P<0.01〕。以诱导痰中嗜酸细胞≥7%和ECP≥100μg/L为判别标准与COPD鉴别,诊断哮喘的敏感性分别为85.2%和87.0%;特异性分别为84.0%和88.0%。联合检测两者的敏感性和特异性分别为92.6%和92.0%。结论诱导痰中嗜酸细胞和ECP水平可了解LOA的严重程度,并有助于与老年COPD的鉴别。     

桂龙咳喘宁胶囊联合福多司坦治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期应用桂龙咳喘宁胶囊联合福多司坦治疗的效果。方法 2015年2月-2018年4月天津市宝坻区人民医院呼吸科收治的114例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者,随机分成对照组(n=57)和治疗组(n=57)。对照组口服福多司坦片,0.4 g/次,3次/d,餐后服用。治疗组患者在对照组基础上口服桂龙咳喘宁胶囊,3粒/次,3次/d。两组均连续治疗14 d。比较两组临床疗效和呼吸系统症状体征的缓解时间,治疗前后肺功能参数[第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比(FEV1占预计值%)、FEV1与用力肺活量(FVC)比值(FEV1/FVC)、呼气峰值流量(PEF)]值、慢性阻塞性肺疾病患者自我评估测试问卷(CAT)评分、外周血嗜酸性粒细胞绝对值(EOS#)及中性粒细胞(NEUT)与淋巴细胞(LYM)比值(NLR)和血清学相关指标[嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、白介素(IL)-13、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、总抗氧化能力(TAC)]水平变化,不良反应发生情况。结果对照组和治疗组的总有效率分别是86.0%、96.5%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,治疗组咳嗽、咳痰等急性加重的呼吸系统症状体征的缓解时间均显著更短(P<0.05)。与治疗前对比,两组治疗后FEV1占预计值%、FEV1/FVC及PEF值均显著增高(P<0.05),CAT评分则均显著降低(P<0.05);但治疗后,治疗组上述肺功能参数值较对照组同期均显著更高(P<0.05),而CAT评分显著更低(P<0.05)。两组治疗后外周血EOS#、NLR值及血清ECP、IL-13、8-OHdG水平均显著低于治疗前(P<0.05),血清TAC水平则均显著升高(P<0.05);且治疗后,治疗组以上指标(EOS#、NLR、ECP、IL-13、8-OHdG、TAC)的改善效果均更显著(P<0.05)。两组均无严重不良反应发生。结论桂龙咳喘宁胶囊联合福多司坦治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的整体疗效显著,能有效缩短稳定患者病情的时间,改善肺通气功能,缓解气道炎症及全身炎症状态,纠正氧化/抗氧化失衡,具有一定的临床推广应用价值。     

TRPM家族对细胞钙/镁平衡调控的研究进展

TRPM通道是TRP通道超家族的一员.包括TRPM1至TRPM8八个成员,除TRPM4与TRPM5外,其余成员对Ca2+和Mg2+均具有一定通透性.其中TRPM1、TRPM2、TRPM3和TRPM8主要参与调控细胞Ca2+的平衡,而TRPM6和TRPM7是调控细胞Mg2+平衡的关键通道.TRPM家族成员分布广泛,调节机制各异,对于细胞钙/镁平衡等一系列生理功能具有重要调控作用.     

舒血宁对支气管哮喘急性发作期患者血清ECP和IL-5的影响

目的:探讨舒血宁注射液对支气管哮喘急性发作期患者血清ECP和IL-5的影响。方法:将80例重度支气管哮喘急性发作期患者随机分为常规治疗组和联用舒血宁治疗组,观察两组患者治疗前后血清ECP和IL-5水平的变化,并比较两组的临床疗效。结果:常规治疗组与舒血宁组患者治疗前血清ECP和IL-5水平均显著高于对照组,而治疗后,联用舒血宁治疗组患者血清ECP和IL-5的水平均明显低于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。且联用舒血宁治疗组临床总有效率明显高于常规治疗组(P<0.05)。结论:在常规疗法的基础上联用舒血宁注射液可以降低重度支气管哮喘急性发作期患者血清ECP和IL-5水平,从而减轻患者的临床症状,临床疗效良好。     

喘嗽宁片联合丙酸氟替卡松治疗咳嗽变异性哮喘的临床研究

目的研究喘嗽宁片联合丙酸氟替卡松吸入气雾剂治疗咳嗽变异性哮喘的临床疗效。方法选取2017年3月—2019年1月宝鸡市中医院收治的100例咳嗽变异性哮喘患者为研究对象,采用随机对照组法将所有患者随机分为对照组和治疗组,每组各50例。对照组患者雾化吸入丙酸氟替卡松吸入气雾剂,2揿/次,2次/d;治疗组患者在对照组的基础上口服喘嗽宁片,4片/次,3次/d。两组患者持续治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组的肺功能指标、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平和炎性因子水平。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为78.00%、92.00%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1)和FEV1/FVC均明显升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);并且治疗组患者肺功能指标明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者EOS计数和ECP水平均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组患者EOS计数和ECP水平明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著降低,白细胞介素-10(IL-10)水平显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组患者hs-CRP、TNF-α、IL-10水平明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论喘嗽宁片联合丙酸氟替卡松吸入气雾剂治疗咳嗽变异性哮喘具有较好的临床疗效,能改善肺功能,降低血清炎性因子水平,具有一定的临床推广应用价值。     

磁性阳离子高分子脂质体结合野生型p53投递系统的构建

目的用合成的磁性阳离子高分子脂质体与野生型p53(WTp53)基因质粒结合,构建靶向纳米载体投递系统,为进一步行静脉内皮细胞转染奠定基础。方法应用大肠杆菌重组质粒扩增法扩增WTp53质粒DNA,合成的磁性阳离子高分子脂质体为羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐/胆固醇(OQCMC/Chol)包覆油溶性Fe3O4的载体粒子。在不同的pH值及不同的WTp53质粒DNA和载体粒子质量比的条件下,将WTp53质粒DNA与OQCMC/Chol超微磁性载体粒子进行混合,并分别进行DNA结合实验和沉淀实验。观察电泳结果,并用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。在DNaseⅠ模仿体内酶的环境下,将其加入制备好的超微载体投递系统中,电泳后观察投递系统对DNA的保护作用。应用透析系统模拟体内环境,观察超微投递系统载体与基因分离情况,并利用紫外分光光度计测量超微载体投递系统累积缓释曲线。结果应用透射电镜观察OQCMC/Chol超微磁性载体粒子和WTp53结合后的投递粒子。在pH 7条件下,WTp53质粒DNA和载体粒子质量比为1∶0.6,p53质粒DNA与OQCMC/Chol超微磁性载体粒子经过直接静电作用几乎100%结合,并证实该投递系统对DNA具有较好的保护作用。超微载体投递系统在7～12 h左右有明显的突释波峰,到第54小时以后,超微载体释放浓度变化缓慢,并可持续释放9 d以上。结论成功构建磁性阳离子高分子脂质体结合WTp53投递系统,将为进一步行细胞转染奠定可靠的基础,并为构建血管内靶向定位基因投递新方法和新技术提供可靠理论依据。     

人增生性瘢痕成纤维细胞最佳转染条件:α_1(I)型前胶原基因反义寡核苷酸转染的实验

目的:选择α1(I)型前胶原基因反义寡核苷酸转染人增生性瘢痕成纤维细胞的最佳条件。方法:实验于2003-10/2004-06在中山大学附属第一医院外科实验室进行。以阳离子脂质体Oligofectamine转染体外培养的第2～6代人增生性瘢痕成纤维细胞,应用荧光显微镜记录荧光素在细胞内的空间分布,用流式细胞术作荧光细胞计数和观察细胞凋亡,通过不同细胞接种数量、反义寡核苷酸浓度和脂质体量转染条件的比较,逐步获得各转染过程中的最佳条件。结果:①在6孔板上转染反义寡核苷酸,所用各转染条件未引起细胞凋亡。②其最佳转染条件为:接种细胞数量32.25×104/皿,反义核酸浓度150nmol/L,脂质体量3μL/孔;转染后细胞浆和细胞核内均有荧光素聚集。结论:获得α1(I)型前胶原基因反义寡核苷酸转染的人增生性瘢痕成纤维细胞的最佳转染条件,可为下一步试验提供基础。     

细辛脑对成人哮喘患者血清IL-25、ECP、IL-27的影响

目的：观察细辛脑治疗成人哮喘患者血清白细胞介素-25（IL-25）、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）、白细胞介素-27（IL-27）的影响。方法：100例支气管哮喘患者随机分为观察组（55例）和对照组（45例）,对照组给予常规对症治疗（吸氧、解痉平喘、抗感染等）,观察组在常规治疗基础上加用细辛脑注射液24mg加入0．9％氯化钠注射液250ml,ivd,qd,疗程14d。比较两组临床疗效,检测两组患者血清IL-25、ECP、IL-27治疗前后水平的变化。结果：观察组总有效率为92．7％,高于对照组（P〈0．05）。细辛脑可以降低支气管哮喘患者血清IL-25、ECP、IL-27浓度的浓度,差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论：细辛脑注射液可降低哮喘患者血清中IL-25、ECP、IL-27浓度,抑制炎症细胞生成,可以减轻哮喘患者的气道炎症反应。