玄参多糖对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及肝胰岛素信号通路的影响

目的探究玄参多糖对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及肝胰岛素信号通路的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)注射法制备糖尿病大鼠模型,随机分成5组,分别为模型组、阳性药二甲双胍(200 mg/kg)组及玄参多糖低、中、高剂量(80、160、320 mg/kg)组,另设同周龄普通饲料喂养大鼠为对照组;ig给药6周后监测各组大鼠体质量及生存状态、空腹血糖(FBG)、血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)]、肾功能[肌酐(CREA)、血尿素氮(BUN)]、糖化血红蛋白(GHb)、空腹血清胰岛素(FINS)、C-肽、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标的变化;HE染色和油红O染色评估大鼠肝脏病理学变化及脂肪变性;Western blotting法检测肝胰岛素信号通路相关蛋白表达。结果玄参多糖能回升2型糖尿病大鼠体质量,改善代谢功能,降低大鼠FBG、GHb、ALT、AST、CREA、BUN、TC、TG、LDL-C、MDA水平,升高HDL-C、FINS、C-肽、SOD、CAT、GSH-Px水平;Western blotting结果表明玄参多糖能活化IRS-2/PI3K/Akt信号通路,升高过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)表达水平。结论玄参多糖能够改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢,其机制可能跟调控肝胰岛素信号通路有关。     

枸杞多糖对颅内动脉瘤大鼠NF-κB信号通路及血管内皮组织炎性损伤的影响

目的 探讨枸杞多糖(LBP)对颅内动脉瘤(IA)大鼠核蛋白因子-κB(NF-κB)蛋白通路及血管内皮组织炎性损伤的影响。方法 取SD雌性大鼠50只,采用切除双侧卵巢并结扎左侧颈总动脉及双侧肾动脉后支以构建IA模型,随机分为IA模型组、LBP低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,另取10只大鼠,只暴露卵巢、颈总动脉、双侧肾动脉后支,不进行摘除和结扎,作为对照组(Control组); 各组均于手术1周后,开始给药,Control组、IA模型组经灌胃给予生理盐水,LBP各剂量组灌胃给予相应剂量药物,1次/d,共给药30 d; 末次给药12 h后处死,取大鼠血液用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管内皮损伤标志物血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮素(ET)水平; 分离取出大鼠脑动脉(Wills)环,在40倍显微镜下检查大脑动脉(Wills)环病理改变,并检测动脉瘤血管壁厚度及动脉瘤体积; 取脑动脉瘤血管组织,用苏木精-伊红染色(HE)检测动脉瘤血管组织病理变化; 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测动脉瘤血管组织NF-κB,Toll样受体-4(TLR4)蛋白表达水平。结果 与Control组比较,IA模型组大鼠Willis环上凸起、管壁厚度和肿动脉瘤体积、动脉瘤内皮细胞空泡变性及炎性细胞浸润等病理损伤程度、血清IL-6,TNF-α,VEGF,ET水平、动脉瘤血管组织NF-κB和TLR4蛋白表达水平明显升高(P<0.05); 与IA模型组比较,LBP低、中、高剂量组大鼠Willis环上凸起、管壁厚度和动脉瘤体积、动脉瘤内皮细胞空泡变性及炎性细胞浸润等病理损伤程度、血清IL-6,TNF-α,VEGF,ET水平、动脉瘤血管组织NF-κB和TLR4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且LBP各剂量组上述指标水平呈剂量依赖性降低。结论 LBP可能通过抑制TLR4/NF-κB通路激活、降低炎症反应来减轻IA血管内皮组织损伤。     

伤寒Vi精制多糖分子大小测定中层析-比色法优化和层析-积分法比较

目的 优化层析-比色法，并对该方法进行分析方法验证；比较优化层析-比色法和层析-积分法，评价两方法测定伤寒Vi精制多糖分子大小的适用性。方法 优化比色法O-乙酰基标准曲线浓度范围，对该方法进行准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性的验证；应用优化层析-比色法和层析-积分法检测多批次伤寒Vi精制多糖分子大小，对结果进行统计学分析。结果 优化层析-比色法准确度回收率均为100%；样品的重复性相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为2.4%和0.0%，中间精密度RSD均为3.4%，连续5次测定标准曲线，决定系数均大于0.999 0，耐用性RSD为4.6%。优化层析-比色法和层析-积分法在检测伤寒Vi精制多糖分子大小时，差异无统计学意义（t=-1.372，P＞0.05）。结论  优化的比色法具有良好的准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性，两种方法均可用于检测伤寒Vi精制多糖分子大小。     

IDS 基因同义突变致黏多糖贮积症Ⅱ型一家系报告

目的探讨黏多糖贮积症Ⅱ型(MPSⅡ)的临床表现及基因变异。方法分析1例MPSⅡ先证者及其家系成员的临床资料、基因检测及艾杜糖-2-硫酸酯酶活性检测结果。结果先证者,男,15岁,体格发育障碍、听力下降。影像学示脑室系统扩大,椎骨、肋骨等骨发育不良。尿黏多糖阳性。IDS的8号外显子同义突变(c.1122CT)。先证者及其母亲的艾杜糖-2-硫酸酯酶活性分别为0、6.96 nmol/(4h·mg)。诊断为MPSⅡ。家系中有6例患者及1例疑似者,全为男性,除先证者外,还有1例存活,其余4例夭折。1例疑似者于孕7月余时产前诊断脑积水终止妊娠。检测到5例女性携带者。结论先证者经艾杜糖-2-硫酸酯酶活性检测和基因检测确诊为MPSⅡ,发现多名女性致病基因携带者及男性患者。     

溶瘤腺病毒修饰间充质干细胞裂解上清对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学特性的影响

目的评价溶瘤腺病毒(rAd)修饰间充质干细胞(MSC)裂解上清对小鼠乳腺癌4T1细胞生物学特性的影响。方法采用携带核心蛋白聚糖(DCN)基因的溶瘤腺病毒rAd.DCN和对照病毒rAd.Null感染MSC,命名为MSC.DCN和MSC.Null。感染后48 h,收集MSC.DCN,MSC.Null和MSC的裂解上清,将其与小鼠乳腺癌细胞4T1共培养,同时设4T1细胞对照组,用实时定量PCR法和Western印迹法检测小鼠乳腺癌4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达;通过Dye670标记,用流式细胞术检测4T1细胞增殖;用FITCAnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测4T1细胞凋亡;通过细胞划痕实验检测4T1细胞的迁移能力。结果 MSC.DCN裂解上清处理后,4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达均高于其余2组(P<0.01)。共培养3 d后,与细胞对照组相比,MSC组4T1细胞增殖指数下降(P<0.01);共培养3和5 d后,与MSC组相比,MSC.Null组和MSC.DCN组4T1细胞增殖指数下降(P<0.05),凋亡比例上升(P<0.05);MSC.Null与MSC.DCN组间差异无统计学意义。MSC,MSC.Null和MSC.DCN裂解上清与4T1细胞共培养12 h后,与细胞对照组相比,MSC组迁移率升高(P<0.01);与MSC组和MSC.Null组相比,MSC.DCN组迁移率下降(P<0.05)。结论MSC.DCN裂解上清可抑制小鼠乳腺癌细胞4T1细胞增殖和MSC裂解上清所诱导的4T1细胞迁移,同时促进4T1细胞凋亡。     

桑枝多糖通过调节肠道菌群降血糖的作用研究

目的探讨桑枝多糖(RMP)降血糖的机制。方法构建糖尿病小鼠模型,将模型小鼠分磷酸缓冲盐溶液(PBS)、RMP、二甲双胍(MF)治疗组,并设未造模的正常对照组;治疗后检测小鼠血糖、粪便和回肠内容物16SRNA、肠道菌群等。结果正常组(Normal)、PBS组、RMP组、MF组的平均血糖分别为5.4mmol/L、13.2mmol/L、5.6mmol/L、5.8mmol/L,PBS组血糖明显高于正常对照组、RMP组和MF组(P <0.05);在小鼠粪便和回肠内容物中,PBS组、RMP组及MF组16SRNA百分比分别为86.86%/80.00%、120.43%/125.11%、109.00%/112.86%,RMP组和MF组的16SRNA明显高于PBS组(P <0.05);RMP组、MF组与PBS组比较双歧杆菌属、肠球菌属、乳杆菌属、链球菌属、葡萄球菌属占比较高。结论桑枝多糖降低糖尿病小鼠血糖与调节肠道菌群的结构有密切的关系。