过表达TrxR1重组HEK293细胞株的构建和鉴定

目的 构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）的HEK293细胞株,为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。方法 通过PCR扩增,连接转化以及Sanger双脱氧测序构建并筛选出TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-PuroTXNRD1,转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株。后续研究分为3组进行：①TrxR1过表达HEK293细胞：pLVX-Puro-TXNRD1载体稳定转染细胞;②对照HEK293细胞：pLVX-Puro空载病毒载体稳定转染细胞;③正常HEK293细胞;通过RT-qPCR、Western blot实验检测上述3组细胞中TrxR1的mRNA以及蛋白表达情况;通过胰岛素终点法以及TRFS-green探针成像检测上述3种细胞内TrxR1的酶活力;通过CCK8实验检测上述3种细胞对TrxR1特异性抑制剂auranofin的敏感性。结果 构建载体经DNA测序,成功获得插入TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1。与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1的mRNA和蛋白高表达,且酶活力也同样显著上升（P<0.005）;而与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,auranofin对HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1酶活力以及细胞增殖的抑制效率均显著下降（P<0.005）。结论 通过构建pLVX-Puro-TXNRD1慢病毒载体,成功获得过表达TrxR1酶的HEK293细胞株,该细胞对特异性靶向TrxR1的抑制剂的抗增殖作用具有抵抗,因而可用于靶向TrxR1药物的筛选。     

基于智能“云随访”APP的延续护理对婴儿湿疹的预防作用

目的探讨延续性护理干预配合智能"云随访"APP对婴儿湿疹的预防效果。方法将340例新生儿随机分为观察组和对照组各170例。对照组行常规随访,观察组在此基础上采用智能"云随访"APP进行随访。结果随访至婴儿6月龄时,观察组婴儿湿疹发生率显著低于对照组,湿疹持续时间显著短于对照组;观察组乳母经常进食致敏食物的比例显著高于对照组(P0.05,P0.01)。结论利用智能"云随访"APP对乳母饮食及婴儿喂养进行个性化指导,可提高乳母对致敏食物的认识,有效预防婴儿湿疹及复发率。     

葛根素配合穴位中频电刺激及利百素凝胶对椎动脉型颈椎病的治疗作用

目的:探讨葛根素静脉滴注配合中频电及利百素凝胶综合治疗椎动脉型颈椎病的协同疗效。方法:将83例椎动脉型颈椎病患者随机分为观察组43例和对照组40例,2组均进行葛根素静脉滴注,观察组另加用颈项部中频电治疗及利百素凝胶颈部涂抹,共治疗10天。治疗前后采用《颈性眩晕症状与功能评估量表》进行疗效评定。结果:2组治疗后症状与功能评估总分值均提高(t=-40.065,P<0.001和t=-36.428,P<0.001),但观察组改善指数明显大于对照组(t=-9.263,P<0.001)。结论:葛根素静脉滴注配合中频电及利百素凝胶综合治疗椎动脉型颈椎病疗效明显优于单纯葛根素静脉滴注。     

面部自体脂肪填充手术护理体会

随着脂肪存活理论和脂肪干细胞作用的不断研究,自体脂肪颗粒移植的应用范围不断扩大,长期治疗效果不断提高[1]。自体脂肪移植术后受区手感自然、面容老化明显改善及费用相对适中等而受到求美者的亲睐[2]。自体脂肪充填被临床广泛应用于鼻唇沟过深,鼻部塌陷、双颞狭窄、下颌短缩、鱼尾纹、眉间皱等面部填充美容手术。由于面部填充部位血运丰富,手术受术区面积小,移植的脂肪颗粒少,能够维持受区的一定体积,容易存活,术后逼     

胶质瘤中PTB调控长非编码RNA选择性剪接的筛选

目的探究在神经胶质瘤发生发展过程中PTB调控选择性剪接的长非编码RNA。方法全转录组芯片分析筛选受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA。提取胶质瘤和正常细胞系及临床病例组织样品和敲低PTB的神经胶质瘤细胞总RNA,实时荧光定量PCR验证候选基因不同剪接异构体的表达及比值变化。核质分离实验鉴定长非编码RNA细胞定位。结果筛选出16条受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA,其中linc00882的不同剪接异构体的表达模式受PTB调控所产生的差异最明显。检测到linc00882定位于细胞质。结论神经胶质瘤中PTB蛋白参与长非编码RNA linc00882的选择性剪接。     

一个纤维蛋白原γ链g．7590G〉T杂合突变导致遗传性低纤维蛋白原血症家系的分析CSCD

目的对一个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行基因突变分析,并探讨其发病的分子机制。方法采集先证者及其家系成员（3代共9人）的外周血样,用自动化血凝仪分析凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）和凝血酶时间（thrombin time,TT）;用凝血酶凝固法（Clauss法）与免疫比浊法分别测定血浆纤维蛋白原的活性（fibrinogen activity,Fg∶C）和抗原水平（fibrinogen antigen,Fg∶Ag）;用PCR扩增纤维蛋白原FGA、FGB和FGG基因的所有外显子及其侧翼序列,对PCR产物进行纯化后直接测序;用Swiss软件对突变蛋白进行预测。结果先证者APTT、PT和TT均延长,Fg∶C（0.69 g/L）和Fg∶Ag（0.72 g/L）明显降低;其母亲、外祖母Fg∶C分别为0.99 g/L和0.83g/L,Fg∶Ag为1.02 g/L和0.87 g/L,均有不同程度的降低。其他家系成员的凝血指标均在正常范围。先证者FGG基因第8外显子存在7590位置的G〉T杂合突变,导致纤维蛋白原D结构域的313位丝氨酸突变为异亮氨酸（Ser313Ile）;其母亲和外祖母亦为Ser313Ile杂合子,其他家系成员则为野生型。模型分析显示Ser313突变为Ile后,同Asn319、Asp320之间的氢键消失,可能影响钙离子的正常结合。此外,该突变导致中性非极性的Ser变成了非极性、疏水性的Ile,使侧链变长,可能影响纤维蛋白原的折叠、构象及稳定性,导致血浆纤维蛋白原水平降低。结论纤维蛋白原γ链Ser313Ile的杂合突变是引起该家系遗传性低纤维蛋白原血症的原因。     

实时剪切波弹性成像评价先天性肌性斜颈胸锁乳突肌

目的 应用实时剪切波弹性成像（SWE）技术评价先天性肌性斜颈（CMT）患儿胸锁乳突肌（SCM）。方法 对130例初诊CMT患儿进行二维超声检查,根据二维超声表现确定其二维分型（Ⅰ~Ⅳ型）,采用SWE测量患侧、健侧SCM弹性模量平均值（E_mean）;对患侧二维超声表现分型与E_mean进行相关性分析;运用ROC曲线计算各型的E_mean截断值。结果 CMT患儿各二维超声表现分型健侧与患侧SCM的E_mean差异有统计学意义（P<0.05）。各二维超声表现分型与患侧E_mean呈正相关（r_s=0.76,P<0.05）。利用ROC曲线获得Ⅰ~Ⅳ型E_mean截断值分别为15.35 kPa、29.60 kPa、38.05 kPa及47.80 kPa。结论 SWE技术可客观量化显示SCM硬度,评估CMT患儿胸锁乳突肌纤维化严重程度,具有较高临床价值。     

儿童及青少年甲状腺癌的流行病学及病因特点

甲状腺癌在儿童及青少年中较为少见,其病理学类型以甲状腺乳头状癌（PTC）为主。不同年龄阶段儿童及青少年甲状腺癌的流行病学特点、病理学类型、临床表现及预后存在差异。儿童时期电离辐射暴露是甲状腺癌唯一确定的危险因素,并存在线性的剂量-效应关系。5%～10%的儿童及青少年甲状腺癌病人有甲状腺肿瘤相关疾病的家族史,具有家族性非髓样甲状腺癌家族史的儿童及青少年患癌风险更高。与成人不同,儿童甲状腺癌中RET/PTC基因重排更为常见,可能是电离辐射相关的致癌因素。家族性非髓样甲状腺癌表现出类似低外显率的常染色体疾病或多基因疾病模式,并具有较高的遗传异质性,其中关键的遗传分子改变目前仍不清楚。儿童及青少年中自身免疫性甲状腺疾病与甲状腺癌的共患率呈逐年上升趋势,我国儿童合并桥本甲状腺炎时发生PTC的风险更高。超重和肥胖可能与儿童及青少年期甲状腺癌的发生有关,并且会增加成年后甲状腺癌的患病风险。儿童时期碘缺乏可导致甲状腺功能减退、甲状腺肿、发育异常等诸多问题;当暴露于电离辐射后,碘缺乏地区的儿童成年后具有更高的甲状腺癌发病率。此外,儿童甲状腺癌还受重金属、食品添加剂、环境致癌物等其他环境与营养因素的影响。儿童及青少年时期相关危险因素的暴露甚至会影响成年后的甲状腺癌的发生与疾病预后,但其具体机制仍有待进一步研究和探索。     

先天性左侧巨大肾盂积水

第一次查房 主治医师查房,入院第2天。 住院医师 汇报病史：患儿,男,生后2h,因“生后腹胀2h”入院。患儿系GIP1,胎龄38＋2周,低位产钳助产娩出,羊水清,脐带、胎盘无异常,胎膜早破27h,出生体重3715g,生后Apgar评分生后1min9分,5min10分。生后发现腹胀明显,在外院B超提示：新生儿左肾积水、左肾旁不规则液性占位。以“腹胀待查”收住我科。     

先天性心脏病术后早期心律失常27例分析

目的 了解27例先天性心脏病患儿术后早期心律失常的种类和治疗效果.方法 选取2011年6月至8月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心胸外科行先天性心脏病手术,在术后早期出现各种心律失常,并进行1h动态心电图监测的患儿,共27例,对其术后早期心律失常进行分析.结果 27例患儿的中位年龄7个月（P25为0.6个月,P75为192个月）,中位体重为6 kg（P5为2.5 kg,P75为47 kg）,术后Holter检查监测心律失常的中位时间为术后25 h（P25为10 h,P75为146 h）.先天性心脏病术后早期心律失常以房性早搏、室性早搏为主,简单型先天性心脏病无恶性心律失常发生.复杂型先天性心脏病中,严重心律失常以交界性异位性心动过速多见,治疗给予静脉注射胺碘酮、降温治疗,死亡1例.结论 复杂型先天性心脏病术后易出现交界性异位性心动过速,发生时间多位于术后24 h内,及时发现并在降温、维持水、电解质平衡、合理使用抗心律失常药物和正性肌力药物治疗下,治疗效果良好.