CLONING PROMOTER OF HUMAN SATBl GENE AND EFFECT OF ATRA AND CoCl_2 ON ITS ACTIVITY

Objective To explore the structure and activity of SATBI promoter in different cells, ATRA and CoCl2 effect on its activity. Methods Using luciferase system to assay the promoter activity of human SATB1 gene, three luciferase reporter vectors were constructed which driven by different regions of 5' untranslated sequence from human SATB1 gene, called pGL3-SP2946-luc, pGL3-SP1718-luc and pGL3-SP751-luc, and transfeted into Jurkat T,K562, U937 and Hela cells transiently using lipofectinamine, the expression activity was detected at different dosage of ATRA and CoCl2 treatment for different time course. Results The reporter gene expression from SATB1 promoter were high activity in U937 cell, moderate in Jurkat T cell, low activity in K562 cell and showed no obvious activity in Hela cell, the reporter gene expression from pGL3-SP751-luc kept on the higher lever in Jurkat T,K562 and U937 cells than the other two vectors. We also found that the repressive effect of CoCl2 on SATBI' s mRNA expression and the relative luciferase expression from pGL3-SP751~luc in U937 cell was down-regulated obviously by ATRA and CoCl2 in the concentration- and time-dependent manners. Conclusion SATB1 promoter drives gene expression with cell-specificity and its core promoter region maybe exist in the - 751 ~ - 9bp of 5' untranslated region of human SATBI gene. Combined with the experiment result we found before that SATB1 was down-regulated by ATRA in U937, the results imply that STAB1 maybe is down-regulated by ATRA and CoCl2 through its promoter in the differentiation of myeloid cell line-U937.     

高职院校康复治疗技术专业教学模式探讨

近10年来我国的康复医学教育得到空前发展。尤以高职高专层次的学历教育发展更为迅猛，但在本层次学历教育中还存在诸多不规范之处。结合我院康复治疗技术专业教学模式建立的基本思路及实践，探讨具有高职特色的康复治疗技术专业的教学模式，并提出相应对策。     

核基质结合区修饰的附着体载体介导的EGFP基因体外表达

目的 建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系.方法 采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR.采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶链反应检测EGFP表达阳性的COS-7细胞比例、荧光表达强度及EGFP基因的转录.通过Southern印迹和质粒还原实验分析质粒DNA在细胞中存在的形式.结果 本实验构建的重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR在转染进入COS-7细胞后以染色体外附着体的形式存在.由于EBVR的存在,可以在体外获得EGFP较长时间的稳定表达.IFN-MAR替代OriP后,仍可在体外获得EGFP的稳定表达.结论 MAR修饰的EBV附着体载体可以在体外获得外源基因高效稳定的表达.     

附桂骨痛胶囊对T淋巴细胞转化影响的实验研究

目的通过附桂骨痛胶囊对胶原诱导性关节炎(C IA)小鼠T淋巴细胞转化影响的实验研究,初步探讨附桂骨痛胶囊对骨性关节炎治疗作用机理。方法建立成年ICR小鼠胶原诱导性关节炎,通过MTT法测取小鼠脾脏淋巴细胞转化率。结果通过统计学处理,该药能够明显降低小鼠T淋巴细胞转化率(P<0.05)。结论附桂骨痛胶囊调节抗进的T淋巴细胞反应性,降低增值能力,可能是该药治疗骨性性关节炎机理之一。     

过表达Notch1对肿瘤细胞增殖的影响

目的通过在肿瘤细胞内过表达Notch1胞内段活性部分,模拟细胞Notch途径的上调,检测细胞增殖状态的变化。方法利用包含Notch1胞内段的逆转录病毒感染实验细胞。通过CBF-1报告载体检测细胞内Notch信号的激活程度,MTS法检测细胞增殖情况,并对细胞的周期分布进行检测。结果Notch1胞内段的表达引起Notch信号在不同细胞中的上调,并引起Hela和HepG2细胞的增殖抑制和BGC-823细胞的增殖加速,而对Chang细胞的增殖没有明显影响。结论Notch信号的上调能引起不同肿瘤细胞增殖状态的变化,对Notch在肿瘤基因治疗中的应用具有重要意义。     

高职康复治疗技术课程考核改革的探索与研究

根据高职教育的培养目标,以就业为导向,以专业技术标准为基础,对康复治疗技术课程考核进行改革,以便充分发挥考核在高职教育中的作用.     

肤康洗剂的制备及应用

肤康洗剂是我院用于治疗皮肤瘙痒、疥疮、湿疹等疾病的一种外用制剂,疗效显著,现报道如下.     

α1受体拮抗剂DDPH模拟代谢物的合成及其降压活性^1

设计并合成了１１个α１受体拮抗剂ＤＤＰＨ模拟代谢物（Ｉ１）～（Ｉ１１）,目的物相应的醚酮（Ⅶ１）～（Ⅶ３）,（Ⅷ）和取代苯乙胺（Ⅲ１）～（Ⅲ３）经缩合、还原及成盐制得,化合物（Ⅶ１）,（Ⅶ２）是以２,６－二甲苯氧丙酮经硝化、还原、重氮化、水本酚得,化合物（Ⅷ）以２－甲苯酚为原料,经羟甲基化并与溴丙酮综合制得,目的物及重要中间体的结构经元素分析、红外光谱、核磁共振谱和质谱确证,目的物的急性降压试验表     

C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达

目的 研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT／enhancerbinding proteins，C／EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide 3-kinase，PI3Kγ)基因的影响。方法 将C／EBPε基因的真核表达载体pcDNA3．1-C／EBPε电穿孔转染U937细胞，G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后，用RT-PCR与Western blot的方法，分别检测转染细胞与对照细胞中C／EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果 过量表达转录因子C／EBPε后，可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论 核内转录因子C／EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。     

有氧运动对老年小鼠骨骼肌抗氧化能力的影响

以C5 7BL/6J雄性小鼠跑转笼为运动方式 ,研究了从 5月龄开始为期 8个月 (小鼠达 13月龄 )或 15个月 (小鼠达 2 0月龄 )的长期有氧运动对小鼠骨骼肌氧化与抗氧化水平的影响。结果发现 ,小鼠骨骼肌细胞浆GSH -Px活性随增龄而升高 ,CuZnSOD活性在衰老早期升高 ,而后下降 ;脂褐素含量随增龄明显增多。提示衰老过程中自由基生成速率可能增加 ,机体氧化与抗氧化水平失衡。长期有氧运动通过适当的增加机体的氧化应激 ,诱导细胞抗氧化酶的增加 ,削弱自由基对机体的氧化损伤 ,延缓与年龄相关的退行性变的发生。