在体家兔冠状动脉痉挛心率变异改变

目的:通过观察家兔冠状动脉痉挛时心率变异改变,探讨冠状动脉痉挛过程中心脏自主神经功能的改变,为心率变异检测应用于冠状动脉痉挛提供理论依据。方法:复制家兔动脉粥样硬化病理模型,药物垂体后叶素诱发冠状动脉痉挛。采用Powerlab/8sp多道生理仪采集心电波。利用Chart模块对电信号进行短程心率变异分析。结果:冠状动脉痉挛时,心率减慢,心率变异度减小;LF和HF明显增高,LF/HF明显降低;SDNN、RMSSD均增大;散点图呈“不规则状”,且矢量角度减小,矢量角度指数增加。结论:冠状动脉痉挛时,心脏自主神经功能平衡失调,心率变异谱发生改变。     

放射损伤、烧伤及放烧复合伤血清成分对冠状动脉平滑肌K~ 通道活动的影响

本实验研究了放射损伤、烧伤与放烧友合伤后血清低分子成份与血清脂质成分对培养的冠状动脉平滑肌r通道活动的影响，结果表明：伤后血清低分子与血清脂质使冠脉平滑肌钾离子通道开放活动加强，以复合伤血清作用最强，烧伤次之，放射损伤作用最弱。伤后血清成分激活平滑肌钾帘子通过的结果可能使血管舒张，提示：在复合伤后由冠状动脉收缩而加重心功能抑制的可能性不大。     

高频心电图及高速扩大心电图对冠心病诊断价值的评价

应用高频心电图（ＨＦＥｃＧ）和高速扩大心电图（ＨｓＭＥＣＧ）技术，对２３４例冠心病患者和２２２例正常人进行了对比研究。结果：ＨＦＥＣＧ六导切迹数正常值范围上限为３个，频率正常值范围上限为、７８．５Ｈｚ，ＨｓＭＥｃＧ的ＰｔｆＶ１正常值范围下限为－０．０２５８ｍｍ·ｓ；冠心病组的六导切迹数为５．１７±１．９９个，最高频率为１１４．６±６７．４Ｈｚ。ＰｔｆＶ１为－０．０３７±０．０１７ｍｍ·ｓ，均明显高于正常人（ｐ＜０．００１）；③对冠心病的诊断，若以六导切迹数＞４个为标准则敏感性、特异性、正确性分别为８１．９％、９８．２％、９１．２％，若以最高频率＞８０Ｈｚ为标准则敏感性、特异性、正确性分别为６６．３％、９４．６％、８２．４％，若以ＰｔｆＶ１＜－０．０２６ｍｍ·８为标准则敏感性、特异性、正确性分别为６９．５％、９５．５％、８０．１％；④不同ＥＣＧ检测技术对冠心病诊断的敏感性排序为ＨＦＥＣＧ切迹计数法＞ＨＦＥＣＧ频谱分析法＞ＨＳＭＥＣＧ的ＰｔｆＶ１法＞常规ＥＣＧ的ＰｔｆＶ１法。结果提示，ＨＦＥＣＧ和ＨｓＭＥＣＧ是诊断冠心病敏感性、特异性高的无创伤性检测技术。     

川芎嗪对猪冠脉平滑肌细胞KCa的影响

川芎嗪(ligustrazin，Lig)和阿魏酸钠(sodium ferulic，SF)是中药川芎中的两种主要成分，临床上已广泛用于缺血性心、脑血管疾病的治疗，获得较好疗效。迄今已有实验表明：二者均可降低冠脉血管阻力、增加冠脉血流、改善微循环等作用，且有多种机制参与了川芎嗪的舒血管作用。钙激活钾通道(Calcium-activated potassium channels，KCa)是血管平滑肌细胞膜上主要的外向电流通道，     

粉防己碱对豚鼠心肌细胞钾通道的影响

目的 :研究粉防己碱对豚鼠心肌细胞钾通道的影响。方法 :用内面向外膜片钳单通道记录法。结果 :Tet10 μmol·L-1时对钾通道影响不大 (P >0 .0 5 ) ,2 0 ,30 μmol·L-1使开放概率分别由药前的 0 .775± 0 .35 6降至 0 .2 31± 0 .2 73和 0 .2 2 1± 0 .2 30 ;变化幅度 (% )为 - 6 9.13± 2 9.6和 - 74 .93± 2 3.6 3(P <0 .0 5 )。结论 :一定浓度下Tet对心肌细胞钾通道具有阻滞作用。     

人心房肌KChlP2和SK2基因表达检测及方法研究

目的检测人心房肌KChIP2和SK2基因表达,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础。方法提取人心房肌组织总RNA,采用RT-PCR方法获取KChIP2、SK2、GAPDH、β-actin目的片段,与pMD-18Tvector连接成重组质粒,转化到大肠杆菌DH5α中,通过PCR和测序鉴定。提取含目的基因的质粒作为标准品。采用Taqman探针法与SYBR Green I法分别检测人心房肌SK2与KChIP2基因表达和构建标准曲线。结果人心房肌存在KChIP2和SK2基因表达,质粒标准品经过PCR鉴定并测序,与Pubmed数据库完全一致,标准曲线线性关系好,相关系数R2〉0.99。结论成功检测人心房肌KChIP2和SK2基因表达,构建的质粒标准品能用于后续实验。     

大鼠血清对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的:研究大鼠血清对猪冠状动脉平滑肌细胞(SMC)钙激活钾通道(KCa)的作用,为血清药理学方法与膜片钳技术结合应用于相关离子通道机制研究奠定基础.方法:用EGTA处理血清中的Ca2 、Mg2 等离子,用膜片钳单通道技术研究处理后的血清对SMC上的KCa的影响.结果:处理后的血清浓度依赖性的不可逆性的阻断SMC上的KCa.在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,血清10、50、100、150μl·ml-1,使通道开放概率从0.0285±0.0102分别降低到0.0205±0.0046(n=7,P>0.05)、0.0145±0.0007(n=7,P<0.05)、0.0045±0.0002(n=7,P<0.01)、0(n=7,P<0.01).在内面向外式膜片(inside-out patch)下,血清10、50、100、150μl·ml-1,使通道开放概率从0.3821±0.0491分别降低到0.1298±0.0331(n=7,P<0.05)、0.0405±0.0048(n=7,P<0.05)、0.0117±0.0011(n=7,P<0.01)、0.0008±0.0005(n=7,P<0.01).随着血清浓度的增加,通道活动逐步减少至完全抑制,这种作用冲洗后不可逆.结论:血清对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道有一定阻断作用.     

粉防己碱对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的:研究粉防己碱(Tet)对猪冠状动脉平滑肌细胞(SMC)钙激活钾通道(K_(Ca))的作用。方法:用膜片钳单通道技术确定通道的变化。结果:Tet 浓度依赖性地可逆性阻断 SMC 上的 K_(Ca)。细胞膜内侧面加入 Tet 20、30×10~(-6)mol·L~(-1)可分别使通道开放概率降低(58.2±20.3)%、(64.6±16.6)%,平均开放时间从(2.3±0.7)ms 减少到(2.0±0.8)ms 和(1.6±0.6)ms,平均关闭时间从(68.1±39.3)ms 减少到(64.0±62.4)ms 和(37.0±16.6)ms。随 Tet 浓度的增加,通道活动逐步完全抑制。结论:Tet 是一种天然有效的SMC 上 K_(Ca)抑制剂。     

慢性心房颤动患者心房肌KChIP2基因mRNA水平的定量检测

目的 心房颤动(房颤)是最为常见的快速性心律失常之一.钾通道相关蛋白2(K+channel interacting protein 2,KChIP2)是心肌细胞瞬时外向钾通道的重要辅助亚单位,在,Ito发挥正常功能中起着重要的作用.报告采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术通过对房颤时KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平进行定量研究,探讨KChIP2在房颤中的作用和对于瞬时外向钾通道的可能调控机制.方法 (1)30例风湿性心脏病患者分为两组:窦性心律组(窦律组)13例,持续性房颤组(房颤组)17例,取其常规切除的右心耳组织作为研究对象;(2)提取心房肌组织总RNA,通过RT-PCR和TA克隆技术构建含有目的 基因片段的质粒标准品;(3)以GAPDH为内参照基因,采用SYBR Green I法实时荧光定量PCR技术检测持续性房颤和窦律患者KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平.结果 (1)标准曲线和熔解曲线:标准曲线线性关系良好,相关系数R2＞0.99.熔解曲线呈明显单峰状,退火温度与预测值基本一致;(2)窦律组和房颤组KChIP2/GAPDH比值分别为0.2200±0.0388、0.1468±0.0452,房颤组KChIP2基因mRNA水平低于窦律组,P＜0.01;窦律组和房颤组Kv4.3/GAPDH比值分别为0.5257±0.1427、0.3946±0.1826,房颤组Kv4.3基因mRNA水平低于窦律组,P＜0.05.结论 与窦律患者相比,房颤患者KChIP2基因和Kv4.3基因明显下调,KChIP2和Kv4.3基因下调是房颤时Ito电流下调的分子基础.     

含丹参酮ⅡA 磺酸钠小鼠血清的制备及其对PCASM Cs的BKCa作用的初探

目的：探讨一种将中药血清药理学和电生理学技术结合的方法，并将该方法运用到中药丹参的有效成分丹参酮ⅡA磺酸钠（DS‐201）的舒血管机制研究。方法采用醇提法提取丹参有效成分，将该提取液给予小鼠灌胃，经眼球采血得到小鼠血清，用高效液相色谱法（HPLC）测定小鼠血清中DS‐201的含量，并将该含药血清应用于单通道膜片钳实验，研究其对猪冠状动脉平滑肌细胞（PCASMCs）大电导钙激活钾通道（BKCa ）的作用。结果含DS‐201血清浓度线性范围是0．73～1．91μg／mL （r＝0．9977），回收率是99．85％～101．47％，血药浓度为（7．32±4．25）μg／mL ；单通道膜片钳实验结果显示小鼠含DS‐201血清对PCASMCs的BKCa有激活作用，但差异无统计学意义（P＞0．05）。结论该研究建立的提取丹参有效成分丹参酮的醇提法简单、实用、可靠，且测定DS‐201含量的HPLC方法精确；应选取高质量丹参和（或）提高丹参在体内的生物利用度，才能更好地将血清药理学和电生理学技术结合在一起。