化疗所致卵巢早衰动物模型的建立

目的 探索建立化疗所致卵巢早衰动物模型的方法。方法 以Wistar雌性大鼠为研究对象，以5种不同剂量和方案腹腔注射环磷酰胺，观察大鼠一般情况、动情周期、性激素（雌二醇和卵泡刺激素）水平、卵巢重量及形态学、各级卵泡数的变化。结果 环磷酰胺可引起大鼠体重明显下降，动情周期紊乱，低雌激素血症，高促性腺激素血症，卵巢重量明显减轻，卵巢间质增生明显，窦前及窦状卵泡数减少，与对照组相比均有明显差异。结论 采用腹腔注射环磷酰胺负荷剂量50 mg/kg后以8 mg/(kg ·d) 的维持剂量连续注射14d的方案建模，大鼠卵巢功能明显衰退，卵巢组织学及内分泌改变与临床卵巢早衰患者相似。该方法简便易行、成模时间短、成功率高、死亡率低，是建     

化疗性卵巢功能早衰动物模型及患者血清miR-21水平的变化

目的 检测化疗性卵巢功能早衰(CIPOF)大鼠动物模型及患者血清microRNA-21 (miR-21)的水平,探讨miR-21与CIPOF的发生是否存在相关性.方法 采用腹腔注射环磷酰胺建立CIPOF动物模型,在建模后第1、15天尾静脉采血,QT-PCR法检测血清miR-21水平,同时检测雌二醇(E2)及卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢结构,并行相关性分析.收集2014年1月-2015年6月就诊的CIPOF患者30例,以及健康体检的育龄女性30例作为对照,检测血清miR-21水平,同时与其他检测指标[黄体生成素(LH)、E2、FSH、泌乳素(PRL)]进行相关性分析.结果 CIPOF动物模型及患者血清miR-21水平分别较对照组明显降低,差异有统计学意义0=15.467,P=0.000;t=10.197,P=0.000).动物模型中miR-21分别与E2,始基、初级、次级及窦状卵泡数目呈正相关(r=0.750,P=0.000;r=0.403,P=0.006;r=0.704,P=0.000;r=0.783,P=0.000;r=0.849,P=0.000),与FSH呈负相关(r=-0.801,P=0.000).临床患者中miR-21与E2呈正相关(r=0.817,P=0.000),与FSH、LH呈负相关(r=-0.771,P=0.000;r=-0.784,P=0.000),与PRL无相关性(r=0.204,P=0.207).结论 在CIPOF动物模型及患者血清中miR-21水平降低,与卵巢功能下降呈正相关,提示miR-21可能参与CIPOF的发病过程,有望成为防治CIPOF的新靶点.     

腹腔镜器械在开腹卵巢癌肿瘤细胞减灭术中的应用

目的探讨腹腔镜器械（超声刀和血管闭合切割系统）在开腹卵巢癌肿瘤细胞减灭术中的应用价值。方法回顾性分析2010年1月～2013年6月45例开腹卵巢癌肿瘤细胞减灭术的临床资料,前30例使用传统开腹器械,后15例使用腹腔镜器械。比较2组的切口长度、手术时间、术中出血量、术后排气时间以及术后并发症的差异。结果与传统开腹器械相比,使用腹腔镜器械可缩小切口长度[（13．4±2．2）emVS．（20．2±2．7）cm,t=－8．391,P：0．000],缩短手术时间[（160．7±30．1）min vs．（205．7±31．3）min,t=一4．610,P=0．000],减少术中出血量[（286．7±76．7）mlVS．（403．3±80．9）ml,t=－4．639,P=0．000],缩短住院时间[（10．3±2．2）dVS．（12．1±2．3）d）,t：－2．523,P=0．015]。2组术后均无并发症发生。结论腹腔镜器械在开腹卵巢癌肿瘤细胞减灭术中有着良好的应用前景,值得推广。     

单纯激素替代治疗卵巢早衰成功自然妊娠1例

患者,女,27岁,因月经周期缩短3月余,于2014年9月13日在本院门诊就诊。患者既往月经规律,初潮13岁,3～4 d／28～30 d,经量中等。2014年6月无明显诱因出现月经周期缩短,缩短至15 d,月经量无明显改变,无痛经,无明显潮热、烦躁、失眠等不适。患者既往无腮腺炎病史,无手术、放疗、化疗史,家族史无特殊。已婚,孕0产0。2014年9月13日B超：子宫前位,大小48 mm ×30 mm ×37 mm,内膜厚约9 mm;右卵巢大小24 mm ×11 mm ×16 mm,未见卵泡;左卵巢大小27 mm ×17 mm×22 mm,内见不纯液性暗区15 mm×13 mm ×14 mm,内见雾状光点。9月27日（月经第3天）查性激素：FSH 38．97 IU／L,黄体生成素（ LH）9．16 IU／L,雌二醇（ E2）＜73 pmol／L,睾酮（ T ）0．46μg／L。抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗心磷脂抗体阴性,甲状腺功能正常;染色体：46, XX;未见染色体结构异常。诊断为卵巢早衰（ premature ovarian fail－ure,POF）,给予戊酸雌二醇片／雌二醇环丙孕酮片周期治疗。服药期间,月经3～4 d／25 d,月经量较前无明显改变。服用戊酸雌二醇片／雌二醇环丙孕酮片7个月后,3月23日（月经第3天）查性激素：FSH 40．23 IU／L, LH 11．44 IU／L, E234 pmol／L,T 0．46 ug／L。2015年3月26日B超（月经第6天）：子宫前位,大小44 mm ×25 mm ×37 mm,内膜厚约4 mm;右卵巢大小23 mm ×11 mm ×20 mm,卵泡3 mm ×2 mm、2 mm ×1 mm;左卵巢大小23 mm ×10 mm ×19 mm,卵泡3 mm ×2 mm、2 mm ×1 mm。继续服戊酸雌二醇片／雌二醇环丙孕酮片。2015年7月15日（月经第3天）查FSH 7．18 IU／L, LH 3．02 IU／L, E2361 pmol／L。患者激素水平有所改善,卵巢功能有所恢复,嘱其积极备孕。8月18日,患者停经37 d,查孕酮28．83μg／L,β人绒毛膜促性腺激素2326 IU／L,证实妊娠,予口服地屈孕酮片安胎治疗1个月。8月26日 B超：宫内早孕,孕囊大小如孕4～5周。患者定期产检未见明显异常。于2016年4月29日顺产1活男婴,出生体重3．2 kg。     

妇产科学双语教学的探索与体会

为适应医学发展的形势和教学改革的要求,南方医科大学珠江医院近3年推行了妇产科学双语教学。本文对这一教学模式的实施进行了探讨,总结了教学过程中存在的问题,提出了提高教学质量的方法。     

宫腔镜子宫内膜电切术在治疗难治性功能失调性子宫出血中的应用

目的探讨宫腔镜子宫内膜电切术治疗难治性功能失调性子宫出血（功血）的效果。方法 2006年8月-2008年9月,采用宫腔镜子宫内膜电切术（transcervical resection of endometrium,TCRE）治疗反复药物治疗无效的功血36例,术前诊断性刮宫子宫内膜病理为单纯性增生23例,息肉样增生13例。术后第1、3、6、12个月随访。结果 36例TCRE手术均顺利完成。无子宫穿孔、过度水化综合征和盆腔脏器电损伤等并发症。均完成1年随访,闭经29例（80.6%）,点状出血5例（13.9%）,月经少2例（5.6%）。术后6个月FSH与术前差异无显著性（P〉0.05）。结论 TCRE是治疗难治性功血的微创技术,具有安全有效、不影响卵巢内分泌功能等优点。     

过继转移过表达Peli1的Treg细胞对自身免疫性早发性卵巢功能不全的修复作用

目的探讨过继转移过表达Pellino-1（Peli1）的调节性T细胞（Treg细胞）对自身免疫性早发性卵巢功能不全（POI）的卵巢功能是否有修复作用以及对其免疫功能是否具有调控作用。方法采用透明带3多肽（pZP3）构建自身免疫性POI小鼠模型,将构建的过表达Peli1的慢病毒表达载体（LV-Peli1）转染至Treg细胞,最后将过表达Peli1的Treg细胞过继转移到模型小鼠体内。POI模型小鼠随机分为4组（n=5）,分别为LV-Peli1-POI组、LV-POI组、Treg-POI组及POI模型组。H-E染色观察各组卵巢结构并行各级卵泡计数,免疫组化实验（IHC）检测Ki-67增殖蛋白及CD3+T细胞表达水平,TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况,ELISA法检测各组小鼠血清卵巢激素促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）及细胞免疫因子IL-10、TGF-β的表达水平,考察过表达Peli1对自身免疫性POI的作用。结果与LV-POI组、Treg-POI组及POI模型组相比,LV-Peli1-POI组中各阶段卵泡数目（始基卵泡488.00±19.24个、初级卵泡320.00±29.15个、次级卵泡472.00±23.87个、成熟卵泡41.00±7.42个）均增加、增殖蛋白Ki-67表达增强、卵巢颗粒细胞凋亡减少、FSH表达水平下降、E2表达水平升高（P＜0.05或P＜0.01）;LV-Peli1-POI组的CD3+ T细胞的表达数量减少,细胞免疫因子IL-10和TGF-β表达水平升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论 过继转移过表达Peli1的Treg细胞可有效促进POI卵巢颗粒细胞增殖、抑制其凋亡,同时改善POI小鼠的卵巢内分泌功能和调节免疫因子,对自身免疫性POI有一定的修复作用。     

骨髓间充质干细胞移植修复化疗所致卵巢损伤的实验研究

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对化疗所致卵巢损伤的影响。方法:采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立化疗所致大鼠卵巢损伤模型,并随机分为模型组、实验对照组及移植组。同龄正常大鼠作为空白对照组。移植组在建模结束后每侧卵巢注射绿色荧光标记约1×106个MSCs。于移植后1、15、30、45天及60天,留取各组血标本,并于后4个时间点分批处死大鼠,留取卵巢标本。荧光显微镜下观察绿色荧光及其分布情况。阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期的变化;以化学发光法检测雌二醇(E2)浓度,放射免疫法检测卵泡刺激素(FSH)浓度;计数各级卵泡数。结果:移植MSCs后15天,移植组卵巢组织内可见到明亮的绿色荧光,持续至移植后2月。绿色荧光分布在卵巢间质组织。移植组30%(6/20)的大鼠在移植后15~30天内恢复正常的动情周期,在移植后30~60天内又有4只大鼠恢复正常的动情周期。移植后15、30、45天和60天时,移植组E2浓度高于实验对照组相应时间点E2浓度,而FSH浓度则低于实验对照组相应时间点FSH浓度,差异有显著性。移植45、60天时,移植组各级卵泡数目均高于模型组和实验对照组,低于空白对照组。结论:骨髓间充质干细胞可以在环磷酰胺损伤的大鼠卵巢组织中存活、迁移,但其分化为卵泡组分的可能性小。骨髓间充质干细胞移植可修复环磷酰胺损伤的卵巢组织,部分改善卵巢内分泌功能。     

多囊卵巢综合征患者血清半乳糖凝集素-3水平的变化及意义

目的通过比较初诊多囊卵巢综合征(PCOS)患者与正常妇女空腹血清中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)水平的差异,初步探讨Galectin-3在PCOS发生发展中的作用。方法选取2017年5-9月在南方医科大学附属佛山妇幼保健院初诊的PCOS患者90例为研究组,另选取同期在该院就诊的年龄及体重匹配的妇女90例作为对照组。记录两组患者临床资料,测量妇科内分泌五项、血脂四项;测定空腹血糖和胰岛素水平,ELISA法测定Galectin-3水平;分析检测指标之间及其与临床指标的关系。结果研究组Galectin-3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS肥胖组和对照肥胖组Galectin-3水平分别高于PCOS非肥胖组和对照非肥胖组,PCOS肥胖组Galectin-3水平高于对照肥胖组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。PCOS胰岛素抵抗组Galectin-3水平高于对照胰岛素抵抗组和PCOS非胰岛素抵抗组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清中Galectin-3水平与BMI、TG、HOMA-IR、T和多毛评分呈正相关关系(P<0.05)。结论 PCOS患者血清Galectin-3水平升高,与胰岛素抵抗、雄激素水平及多毛评分呈正相关关系,其可能通过胰岛素抵抗及高雄激素水平参与了PCOS的发生。     

磷酰胺氮芥对大鼠卵巢功能损伤的体外实验研究

[摘要] 目的：研究磷酰胺氮芥（Glyciphosphoramide ,PM）引起体外培养大鼠卵巢结构和内分泌功能损伤的最低剂量。方法：实验分为4组,每组12个卵巢,来源于出生8周的Wistar大鼠。实验1、2、3组培养基中加入浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的PM,培养48h后均隔天全量更换不含PM的培养基。正常对照组培养基中不含PM。在PM加入前及加入后2d（48h）、6d时更换的培养基中用放射免疫法测定其雌二醇（E2）浓度。在加入PM6d时取出大鼠卵巢,称湿重,HE染色,显微镜下观察各期卵泡形态并计数总卵泡数量。结果：加入PM后2d及6d的3个实验组的E2浓度均低于正常对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,且3个实验组间两两比较差异也均有统计学意义。加入PM6d,3个实验组分别与正常对照组比较,卵泡数差异均有统计学意义;3个实验组间两两比较,卵泡数量差异亦均有统计学意义。结论：PM浓度为10μg/mL时已能引起体外培养大鼠卵巢结构及功能的损伤。