针刺时脂肪组织瘦素基因与细胞凋亡的实验研究

目的:探讨针刺单纯性肥胖大鼠时脂肪组织瘦素基因与细胞凋亡的变化。方法:采用RT-PCR技术测定各组大鼠脂肪组织瘦素基因表达水平的变化,运用TUNEL法检测脂肪细胞凋亡的变化,观察二者的相关性。结果:肥胖组脂肪组织中瘦素基因表达水平显著高于正常组(P<0.01),而脂肪细胞凋亡指数明显低于正常组(P<0.01);针刺组脂肪组织中瘦素基因表达水平较肥胖组明显下降(P>0.05),而脂肪细胞凋亡指数较肥胖组却明显升高(P<0.01);且肥胖组脂肪组织瘦素基因表达与其脂肪细胞凋亡指数呈显著负相关(P<0.01)。结论:针刺可使单纯性肥胖大鼠瘦素抵抗作用被破坏和促进脂肪细胞凋亡,可能是针刺减肥的重要机制。     

老鼠簕对四氯化碳性致肝纤维化大鼠的治疗机制研究

目的 研究老鼠簕对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGFβ1)与Smad3 mRNA表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分成5组:空白对照组、模型对照组、秋水仙碱组、老鼠簕乙醇浸膏低剂量组和老鼠簕乙醇浸膏高剂量组.除空白对照组外,其余4组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型.秋水仙碱组、老鼠簕乙醇浸膏低剂量组和老鼠簕乙醇浸膏高剂量组分别于4周后给予相应的药物,空白对照组给予等容量的生理盐水,1次/d.8周后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中TNF-α,TGFβ1 与Smad3 mRNA的表达.结果 与空白对照组相比,模型对照组TNF-α,TGFβ1 与Smad3 mRNA表达增强(0.23±0.18vs0.49±0.28,0.29±0.16vs1.79±2.13, 0.52±0.36vs0.99±0.53,P<0.01);老鼠簕乙醇浸膏高、低剂量组(2.0,1.0 g·kg-1)较模型对照组TNF-α,TGFβ1 与Smad3 mRNA表达减弱(1.0 g·kg-1:0.29±0.21vs0.49±0.28,0.62±0.44vs1.79±2.13, 0.59±0.34vs0.99±0.53,P<0.05;2.0 g·kg-1:0.16±0.13vs0.49±0.28,0.66±0.51vs1.79±2.13, 0.53±0.41vs0.99±0.53,P<0.05).结论 老鼠簕能够抑制大鼠肝纤维化肝组织TNF-α,TGFβ1 与Smad3mRNA的表达.     

普罗布考对过氧化氢诱导新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子-α生成的影响

目的探讨普罗布考对过氧化氢诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α生成的影响。方法培养新生大鼠心肌细胞,随机分为A,B,C,D 4组,A组加入0.2 mmol/L过氧化氢;B,C,D组分别给予1,10,100μmol/L普罗布考预处理6 h后,再分别加入0.2 mmol/L过氧化氢继续孵育6 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测心肌细胞TNF-α mRNA、Bcl-2 mRNA及Bax mRNA表达情况;ELISA法检测细胞培养液中TNF-α水平。结果与A组比较,B,C,D组细胞凋亡率均明显降低,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高,心肌细胞TNF-αmRNA表达及细胞培养液中TNF-α水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。心肌细胞凋亡率与培养液中TNF-α水平呈正相关(r=0.874,P<0.01)。多元线性回归分析结果表明,凋亡率与培养液中TNF-α水平独立相关(β=0.122,P<0.01)。结论普罗布考抑制过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制与抑制TNF-α生成有关。     

卵叶三脉紫菀化学成分的研究

目的研究卵叶三脉紫菀根部的化学成分。方法采用柱层析(CC)对植物中的提取物进行分离提纯,并利用现代波谱方法(1H-NMR,13C NM,HMBC,MS,IR)分析鉴定,确定化合物的结构。结果从该植物的乙酸乙酯部分分离出4个化合物,它们的结构分别鉴定为:2β,3,β16α-三羟基-23α-醛基降碳-12-齐墩果烯(I)、(24R)-5(-豆甾-7,22(E)-二烯-3(-醇(II)、谷甾醇(III)、1,3-二亚油酸甘油酯(IV)。结论I为新化合物,II-IV均为首次从该植物中分离获得。     

家犬心脏左心室的形态学观测

目的观测家犬心脏左心室的解剖结构,为比较解剖学积累资料。方法1.44 mol.L-1甲醛溶液固定新鲜家犬心脏45个,解剖并观测左心室结构。结果家犬心脏左心室呈圆锥形,位于心脏左下方,分为左心室流入道及流出道,其流入道主要结构为二尖瓣复合体,包括瓣环、瓣膜、腱索、乳头肌。二尖瓣环周径平均(49.16±10.00)mm。内侧瓣、外侧瓣的高度分别为(14.28±3.14)和(9.27±1.99)mm,宽度分别为(25.74±5.21)和(21.50±6.33)mm;腱索总数平均为(16.72±2.76)条,假腱索总数平均为(4.69±3.38)条,假腱索出现率为100%。左心室流出道主要结构为主动脉瓣环、主动脉瓣、主动脉窦。主动脉瓣环周径平均为(34.55±8.00)mm,左瓣高度、右瓣高度、后瓣高度分别为(6.85±1.76)、(7.19±1.75)和(7.52±1.79)mm,其宽度分别为(11.47±3.02)、(11.67±2.99)和(11.74±2.46)mm。结论家犬心脏左心室结构与人心相似,但大小及假腱索、腱索总数有一定差异。     

硫化氢对肾血管性高血压大鼠动脉舒张功能的调节作用

目的探讨硫化氢(H2S)对肾血管性高血压模型大鼠血压及颈总动脉血管舒张功能的影响。方法采用"两肾一夹(2K1C)"法建立肾血管性高血压模型。大鼠随机分为假手术组、双肾一夹(2K1C)模型组、2K1C+Na HS(H2S供体)组及PPG(H2S代谢酶抑制剂)组。术前及术后每周测量1次大鼠尾动脉收缩压(SBP)。测定颈总动脉血管形态学指标(血管外周、壁厚、壁厚与外周径的比值),观察颈总动脉的ACh介导的内皮依赖性舒张作用;免疫组化检测颈总动脉一氧化氮合成酶(e NOS)、内皮素-1(ET-1)的表达。结果PPG组及2K1C组大鼠尾动脉血压与sham组比较明显升高(P<0.05);与模型组比较,2K1C+Na HS组血压明显降低,大鼠颈总动脉壁厚外径比减小,颈总动脉对ACh介导的内皮依赖性舒张效应增强,颈总动脉一氧化氮合成酶(e NOS)含量升高、ET-1含量降低。结论给予外源性的硫化氢供体可降低血压,缓解肾血管性高血压的形成,其作用可能与改善颈总动脉血管功能有关。     

Lactuside B对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响

目的探讨高翅果菊提取物Lactuside B(LB)对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为6组(8只/组)即模型组、假手术组、阳性对照组、LB高剂量、中剂量和低剂量组。采用大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h和72 h动物模型、各组在相应时间点处死一半动物,以RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段NGF mRNA的表达情况。结果模型组NGFmRNA在海马和纹状体表达明显增多,再灌注72 h海马和纹状样NGF mRNA表达显著下降;在海马,用药后LB各剂量组NGF mRNA表达增多,与模型组比较有显著差异(P<0.01);与阳性对照组比较中、低剂量组有显著差异(P<0.01),且中、低剂量组用药72 h时NGF mRNA表达较多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。在纹状体,LB各剂量组NGF mRNA表达同样增加,与模型组比较有显著差异(P<0.01),与阳性对照组比较其低、中、高剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05),LB用药72 h时中、低剂量组NGF mRNA表达更多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。结论 LB对大鼠海马和纹状体的NGF基因产生了较大的影响,其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与LB能够上调二部位的NGF mRNA有关。     

乌拉地尔对急性脊髓损伤大鼠血清内皮素和降钙基因相关肽的影响

目的通过观察乌拉地尔（ura）对脊髓损伤大鼠血清内皮素-1（ET—1）和降钙素基因相关肽（CGRP）水平的影响,探讨其对神经保护的作用机理。方法按无菌手术的要求进行脊髓T10右侧半横断手术,术后腹腔注射乌拉地尔（30mg／kg或10mg／kg）,连续3d。取血,采用放免法测定血清ET-1和CGRP含量。结果急性脊髓损伤后,模型大鼠血清ET-1含量明显升高（P〈0．01）,cGRP明显降低（P〈0．01）;与损伤对照组相比,使用乌拉地尔后,其血清ET-1含量明显降低（P〈0．05）,而CGRP明显升高（P〈0．05）。结论急性脊髓损伤可导致血清ET-1升高、CGRP降低。乌拉地尔可通过降低血清ET-1水平和升高CERP水平而发挥对脊髓神经元的保护作用。     

外源性糖基化终末产物对体外培养的内皮细胞损伤机制的研究

目的:探讨外源性糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用机制.方法:外源性AGEs与HUVEC共孵12 h,以组胺(Hi)和过氧化氢酶(CAT)为对照,检测内皮细胞的活性、单层通透性、凋亡率及细胞培养液生化指标,并且观察内皮细胞形态学改变.结果:外源性AGEs呈剂量依赖性(40 mg/L、120 mg/L、160 mg/L)地降低了内皮细胞的活性、增加了内皮细胞的单层通透性及凋亡率、增加了细胞培养液中丙二醛(MDA)含量,并降低了过氧化物歧化酶(SOD)的含量(均P < 0.05),与阳性对照组Hi的作用相当(均P ＞ 0.05).CAT明显抑制了外源性AGEs对内皮细胞的损伤作用.结论:外源性AGEs诱导血管内皮细胞损伤,其机制可能与氧化应激有关.