2,3,7,8-四氯二苯并二恶英哺乳期暴露对仔鼠牙齿的显微硬度分析

目的探讨哺乳期二恶英类物质2,3,7,8-四氯二苯并二恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,2,3,7,8-TCDD)暴露对大鼠釉质和牙本质显微硬度的影响。方法应用给予低浓度2,3,7,8-TCDD染毒方法,建立哺乳期2,3,7,8-TCDD暴露模型,收集日龄60 d大鼠牙齿作为实验样品。2,3,7,8-TCDD暴露组和对照组大鼠下颌切牙沿牙长轴切割,抛光后在不同选择区域行维氏显微硬度的测定。结果同对照组相比,2,3,7,8-TCDD暴露组压痕较深。釉质平均显微硬度比较,2,3,7,8-TCDD暴露组明显降低,两组差异有显著性(P<0.01)。牙本质平均显微硬度比较,2,3,7,8-TCDD组较低,两组有统计学意义(P<0.01)。结论 2,3,7,8-TCDD暴露对牙齿硬组织质量有影响,牙齿的机械抗力降低。     

牙周非手术治疗对2型糖尿病伴慢性牙周炎患者牙周炎症控制及血清C反应蛋白水平影响的研究

目的探讨牙周非手术治疗对中国广州地区汉族人群2型糖尿病伴慢性牙周炎患者牙周状况及血清C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）的影响。方法筛选135例2型糖尿病伴慢性牙周炎患者,以2∶1的比例随机分为治疗组和对照组。治疗组90例接受牙周非手术治疗,对照组45例暂不进行牙周治疗,仅行与治疗组相同的口腔卫生宣教。观察2组患者基线及干预后6个月的牙周探诊深度（probing depth,PD）、附着丧失（attachmentloss,AL）及血清CRP水平的变化情况。结果基线时Logistic回归分析显示平均PD是预测高水平CRP的危险因素（P〈0.05）。相关性分析显示CRP与平均PD相关（r=0.230,P=0.009）,与平均AL不相关（P〉0.05）。治疗后,治疗组PD减少（0.48±0.45）mm,AL减少（0.32±0.51）mm,CRP下降（1.56±5.03）mg/L。治疗前后,治疗组PD（t=10.014,P=0.000）、AL（t=5.888,P=0.000）及血清CRP水平（t=3.157,P=0.000）的差异均有统计学意义;干预前后对照组各项指标变化的差异均无统计学意义（P〉0.05）。两组平均PD（t=-3.318,P=0.001）的差异有统计学意义,而两组间平均AL和血清CRP水平的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论牙周非手术治疗可有效改善2型糖尿病伴慢性牙周炎患者的牙周状况,尚不能确认牙周非手术治疗可显著改善2型糖尿病伴慢性牙周炎患者的血清CRP水平。     

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目的探讨母鼠哺乳期2,3,7,8-四氯二苯并二恶英(2,3,7,8-TCDD)暴露对仔鼠牙齿超微结构的影响。方法于2009—2010年,在广东省口腔疾病临床实验室,通过母鼠颈部皮下注射2,3,7,8-TCDD溶液(10μg/kg)方法,建立哺乳期2,3,7,8-TCDD暴露模型,收集日龄60d仔鼠带有切牙的下颌骨作为实验样品。将日龄60d的实验组和对照组(母鼠颈部皮下注射玉米油)仔鼠的下切牙样本,经固定、脱水、喷金后行扫描电镜观察,并行牙本质小管直径以及釉柱直径的测量。结果实验组仔鼠的牙齿硬组织结构发生改变,出现组织缺陷和矿化不良结构。下切牙釉柱直径和牙本质小管直径,实验组均小于对照组,差异有统计学意义[釉柱直径比较:(5.74±1.13)μm对(6.08±1.74)μm,P<0.01;牙本质小管直径比较:(1.27±0.39)μm对(1.49±0.44)μm,P<0.01)]。结论母鼠哺乳期2,3,7,8-TCDD暴露破坏了子代大鼠牙齿的超微结构。     

我国牙周病学研究近五年进展

在过去的五年里,我国牙周病学研究有了长足的进步,我们欣喜地看到在国际知名牙周病学专业杂志上经常有中国学者的研究论著发表,说明我国牙周病学研究已跻身国际舞台,为世界牙周病学的发展发挥着越来越重要的作用.现回顾2005年以来我国学者在牙周病学研究领域取得的主要成果,在向读者展示我国牙周病学研究成绩的同时,对存在的问题和今后的研究方向提出个人观点.     

四种方法获取DNA用于检测IL-1基因多态性的比较分析

目的：录求一种能方便、简便、有效地获取患者ＤＮＡ的方法,以用于检测患者基因多态性。方法：采用４种方法获取患者ＤＮＡ,即静脉血中用酚－氯仿法抽提,指尖血血痕中用Ｃhelex-100法抽提,颊粘拭子中用Ｃhelex-100法抽提及直接用干燥血痕作为ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ模板,对同一个体分别用４种来源的ＤＮＡ检测其ＩＬ－１基因多态性,比较结果的特异性和敏感性。结果：颊粘膜拭子抽提ＤＮＡ作基因多态性分析特异性高、敏感性强,优于静脉血酚－氯仿法抽提ＤＮＡ,且取颊粘膜拭子无创、方便,Ｃhelex-100法抽提ＤＮＡ比酚－氯仿法更简单、快速。结论：颊粘膜拭子结合Ｃhelex-100法抽提ＤＮＡ适于对牙周炎患者作基因多态性分析。     

常用抗菌药物对牙龈卟啉单胞菌体外抗菌活性的影响

目的:探讨牙周炎主要病原菌牙龈卟啉单胞菌(Pg)对常用抗菌药物的敏感性。方法:从成人牙周炎患者龈下菌斑中分离、通过PCR鉴定106株牙龈卟啉单胞菌的临床分离株,通过Kirby-Bauer纸片扩散法测定该菌对克林霉素、复方磺胺甲唑、四环素、头孢唑啉、乙酰螺旋霉素、头孢氨苄和青霉素G的敏感性。结果:Pg对上述药物敏感率分别是9314%、7813%、6014%、5616%、4016%、1014%和0。结论:抗牙龈卟啉单胞菌药物以其作用大小依次为克林霉素、复方磺胺甲唑、四环素、头孢唑啉、乙酰螺旋霉素和头孢氨苄,该菌对青霉素G不敏感。     

人牙周膜细胞群多向分化潜能的实验研究

目的研究体外培养的人牙周膜细胞群（hPDLP）向成骨和成脂方向分化的潜能,为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源。方法组织块法分离培养人牙周膜细胞群,流式细胞术检测间充质干细胞标记CD146和STRO-1的表达;利用茜素红、油红O染色、免疫组化以及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）等检测hPDLP的多向分化标志。结果第1代hPDLP的CD146和STRO-1阳性率分别是27.20%±3.98%和4.23%±4.08%;经矿化诱导可以形成矿化结节,有钙盐沉积;经成脂诱导可见特异性脂滴形成,特异性转录因子过氧化物酶体激活物增生受体2（PPARγ2）和脂蛋白脂酶（LPL）表达上调。第8代hPDLP相对第1代的矿化能力没有差异,但成脂方向分化潜能减弱。结论体外培养的hPDLP具有向成骨和成脂样细胞分化潜能,第1~3代细胞群明显具有牙周膜干细胞的多向分化潜能优势。     

mtHSP70/HSV-tk重组沙门菌抗小鼠黑色素瘤的作用

摘要：目的研究携带结核杆菌热休克蛋白70（mtHSP70）、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶（HSV-TK）双基因的重组沙门菌瘤内注射
抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应。方法构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注
射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估。结果瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照
组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变。结论减毒沙门菌携带
的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用。
     

结核杆菌热休克蛋白70与绿色荧光蛋白基因真核共表达质粒的构建

目的 利用pIRES-EGFP载体构建含有人巨细胞病毒(cytomegaloviru,CMV)启动子调控表达的结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子真核表达载体pCMV-hsp70-IRES-EGFP.方法 根据mtHSP70基因全长cDNA的特异引物PCR扩增获得mtHSP70基因序列.将PCR产物进行T载体克隆获得重组质粒PMD-18T-mtHSP70,测序分析选定序列正确的克隆提取质粒,用限制性内切酶Xho I和EcoR I酶切pMD 18 T-TK和pCMV-IRES-EGFP质粒.将mtHSP70基因定向亚克隆至pCMV-IRES-EGFP载体,酶切鉴定,构建获得含mtHSP70和EGFP基因的重组质粒.Lipofectamine介导下转染B16细胞,并分别在荧光显微镜下观察EGFP的表达和以Western blot检测mtHSP70蛋白表达情况. 结果 酶切见特异酶切图谱,该载体在瞬时表达时获得mtHSP70/EGFP的良好表达.结论 含mtHSP70和EGFP基因双顺反子真核表达载体pCMV-mtHSP70-IRES-EGFP构建成功,为研究基于以GFP为报告基因的mtHSP70的肿瘤DNA疫苗对肿瘤的治疗作用及机制奠定了实验基础.