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31.
目的:制备抗人肌纤生成调节因子-1(hMR-1)的多肽抗体,并对其纯度、特异性、效价及适用性进行检测和鉴定。方法:TMHMM、DNAstar等软件分析hMR-1蛋白序列,选取2段优势抗原序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,混合后免疫家兔。抗血清经过免疫亲和层析法纯化得到多克隆抗体。用ELISA法检测效价,Western blotting和细胞免疫荧光(immunocytofluorescent,ICF)法鉴定其特异性和适用范围,并观察其在乳鼠心肌细胞中的应用情况。结果:(1)抗体效价达1∶105,Western blotting检测到与预测分子量17kD相符的条带,ICF图像背景低,阳性结构清晰。(2)乳大鼠心肌细胞实验发现荧光信号浓集于核周,过表达hMR-1后荧光强度明显高于空载对照和正常对照。结论:制备的抗hMR-1多肽抗体效价及特异性可用于Western blotting及ICF实验,可识别人源性和大鼠源性抗原表位,该工作将为进一步深入研究新基因hMR-1的功能奠定基础。 相似文献
32.
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目的 在果蝇S2细胞中表达人趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1),并对其分泌形式进行功能研究.方法 构建pMT/V5-His-CKLF1表达质粒,转染S2细胞,筛选并鉴定阳性细胞克隆,用兔抗人CKLF1多肽抗体对其培养上清进行Western blot检测,并分析其趋化活性和促C2C12细胞增殖活性.结果 RT-PCR证明CKLF1在S2细胞中高效转录;通过Western blot在细胞培养上清中可检测到表达的重组CKLF1蛋白;其对人外周血中性粒细胞和淋巴细胞有较弱的趋化活性,对C2C12细胞具有增殖促进作用.结论 在果蝇S2细胞中成功表达了人重组CKLF1,并证实其存在分泌形式且具有趋化活性和促C2C12细胞增殖活性. 相似文献
34.
目的:探讨宫颈电热圈锥切术(LEEP)治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床价值,分析高危型人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况与疗效的相关性。方法:对阴道镜活检诊断为CIN的102例予LEEP术治疗,采用阴道镜和PCR荧光定量检测高危HPV进行随访,观察治疗效果。结果:LEEP术后随访半年,治愈82例,治愈率达80.4%。病变残留20例(19.6%),复发14例(13.7%)。在所有患者中,高危型HPV检测阳性率为76.5%。CINⅢ患者高危型HPV阳性率(90.0%)较CINⅡ患者(69.0%)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。高危型HPV阳性组LEEP术后病变残留率与HPV阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CIN复发14例中,13例高危型HPV阳性,与HPV阴性复发率比较有差异(P<0.05)。因病变残留或复发而再次行LEEP术的26例中,23例(88.46%)高危型HPV阳性。结论:LEEP术治疗CIN疗效确切、安全、成功率高,是诊断和治疗CIN有效且理想的方法。高危型HPV阳性与否与CIN复发有关。 相似文献
35.
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新细胞因子IL-24研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
白细胞介素 2 4 (Interleukin 2 4 ,IL 2 4 ) ,原名黑色素瘤分化相关抗原 7(melanomadifferentiation associat edantigen ,MDA 7) ,是 1995年JiangH等人利用减数杂交技术 ,从 β干扰素 (Interferon β ,IFN β)和蛋白激酶C激活剂MEZ诱导分化的人恶性黑色素瘤细胞H0 1细胞中克隆的新基因 ,该基因在诱导分化的黑色素瘤细胞中高表达 ,并能促进黑色素瘤细胞分化 ,因此最初命名为MDA 7[1] 。基因结构和染色体定位分析发现 ,人MDA 7由7个外显子和 6个内… 相似文献
37.
患者 ,女 ,2 7岁 ,孕 3产 3,发现下腹包块一月 ,下腹隐痛伴发热十余天。无尿频、便秘 ,无腹胀于1999年 10月 2 6日入院。查体 :体温正常 ,心肺(— ) ,下腹可及一包块 ,上达脐上四指半 ,下缘不清 ,表面不平滑 ,质实 ,活动差 ,无压痛。妇检 :盆腔内可及一孕 7+月大小包块 ,活动差 ,囊实性 ,无压痛 ,表面不平滑 ,子宫触诊不清。CT示 :左中下腹巨大囊实性肿瘤 (恶性 ) ,腹盆腔内积液 ,右卵巢及子宫直肠陷窝内结节。入院诊断 :巨大卵巢肿瘤 (扭转、出血坏死 )。完善有关检查后行剖腹探查术示 :肿瘤约16cm× 18cm× 10cm大小 ,由大网膜包… 相似文献
38.
39.
一个新的多功能细胞因子—趋化素样因子 总被引:3,自引:0,他引:3
细胞因子是在免疫和炎症反应中起重要作用的小分子蛋白质,克隆和研究新的细胞因子具有重要的理论意义和应用价值。我们利用抑制性减数杂交技术(SSH),从PHA刺激的U937细胞中成功克隆了一个新的细胞因子趋化素样因子1(CKLF1)。CKLF1全长cDNA包括530个碱基,有一个编码99个氨基酸的完整开放读码框架。CKLF1存在其他三种变异体,命名为CKLF2,3,4,分别编码152,67和120个氨基酸,其中,CKLF2是CKLF的全基因产物。亚细胞定位和Western blot分析发现,CKLF1和CKLF3主要为分泌性表达,而CKLF2和CKLF4主要以膜结合形式表达。CKLF1与已发现的其他细胞因子之间没有明显的同源性,CKLF1在PHA刺激的U937细胞中的表达可被IL-10部分抑制。重组的CKLF1在体内外对嗜中性细胞、单核细胞和淋巴细胞具有明显的趋化活性;在体内能引起肺部明显的炎性改变,与CKLF1转基因小鼠的肺部病变相;CKLF1还能刺激骨髓细胞和小鼠骨骼肌细胞增殖。CKLF2能促进小鼠肌母C2C12细胞增殖和分化,促进BALB/c3T3细胞增殖,并能拮抗撤血清引起的细胞凋亡,以上结果表明CKLF1可能在炎症和骨骼肌再生过程中发挥重要作用。在CKLF1,2的序列基础上,利用生物信息学方法克隆了小鼠CKLF2,4和大鼠CKLF1,2,它们与人CKLF1,2,4有相似的结构和功能;在人和小鼠CKLF的序列基础? 相似文献