Ag43/FGFR1嵌合蛋白疫苗诱导小鼠产生特异性抗体的研究

目的 了解Antigen43/成纤维细胞生长因子1型受体(Ag43/FGFR1)重组嵌合蛋白作为疫苗能否诱导小鼠产生抗自身FGFR1抗体.方法 利用重组的Ag43/FGFR1嵌合蛋白作为疫苗免疫BALB/c小鼠,分别用Westernblot、酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶联免疫斑点实验(ELISPOT)方法检测小鼠血清中产生的抗体及其亚型和脾脏中分泌抗FGFR1抗体的特异B淋巴细胞情况.结果 Western blot和ELISA检测发现,Ag43/FGFR1蛋白免疫组可以有效诱导产生抗自身FGFR1抗体,而小鼠FGFR1自身蛋白对照组、Ag43蛋白对照组、生理盐水对照组均未发现抗自身FGFR1抗体.ELISPOT检测发现,与各对照组相比,Ag43/FGFR1蛋白免疫组分泌抗自身FGFR1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(均P<0.01).ELISA检测发现主要抗体亚型IgG1和IgG2b明显升高.结论 Ag43/FGFR1重组嵌合蛋白质疫苗免疫小鼠能够诱导产生抗小鼠FGFR1的自身抗体,可以考虑应用于抗肿瘤血管生成研究.     

曲古抑菌素A增加人肝癌Bel7402细胞对TRAIL敏感度的实验

目的 探讨曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)联合肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对肝癌细胞Bel7402增殖凋亡的影响及其机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法分别检测TSA、TRAIL及低浓度TSA联合TRAIL处理Bel7402细胞的生长抑制率;4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色法对药物联合处理后的细胞进行凋亡形态学观察;免疫细胞化学和Western blot技术观察药物联合作用后p65蛋白在细胞中表达和定位的变化.结果 不同浓度TSA作用6、12和24 h对人肝癌Bel7402细胞的增殖没有明显抑制作用,而作用48 h后的细胞增殖抑制率明显升高,和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);不同浓度TRAIL处理Bel7402细胞存活率没有明显改变;低浓度TSA(20 ng/ml)预处理能够增加Bel7402细胞对TRAIL治疗的敏感度,TSA预处理联合TRAIL(100ng/ml)作用细胞24 h后,细胞生存率为(57.1±5.4)％,和单独药物处理组及对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);DAPI染色显示TSA和TRAIL联合作用后Bel7402细胞有核凋亡出现.荧光显微镜观察证明单独应用TSA(200 ng/ml)或TRAIL(100 ng/ml)处理的细胞p65蛋白有部分核内移位,而两种药物联合应用导致p65蛋白表达量降低,并且发生明显的核内转移和集聚.结论 低浓度TSA能够增加肝癌Bel7402细胞对TRAIL的敏感度;其机制可能是两种药物联合应用降低p65的表达和活性,从而诱导Bel7402细胞凋亡.     

HPV感染、P53及Survivin蛋白表达与非小细胞肺癌的相关性

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染在非小细胞肺癌(NSCLC)发生中的病因学意义,并研究HPV感染与细胞凋亡、P53及Survivin蛋白表达之间的关系.方法 分别应用PCR、TUNEL和免疫组化法检测76例NSCLC及13例肺良性病变中HPV DNA、凋亡指数(AI)、P53和Survivin蛋白表达情况.结果 肺癌组HPV DNA检出率为40.8%(31/76),明显高于肺良性病变组[7.7%(1/13)],两者差异有显著性意义(P＜0.05).高、中分化肺癌HPV感染率明显高于低分化肺癌,吸烟者明显高于不吸烟者(均P＜0.05).NSCLC中P53和Survivin蛋白表达阳性率为63.2%(48/76)和42.1%(32/76),肺良性病变组均未见表达.NSCLC中HPV DNA阳性组P53蛋白表达阳性率明显高于阴性组(P＜0.05).P53蛋白表达阳性组中Survivin蛋白表达阳性率明显高于阴性组(P＜0.05).NSCLC中HPV DNA、P53和Survivin蛋白表达阳性组与阴性组之间的凋亡指数均有显著性差异(P＜0.05).结论 HPV感染可能是NSCLC发生的重要因素之一,HPV感染可能导致P53基因突变,突变的P53使Survivin蛋白表达增加,抑制凋亡,促进NSCLC的发生.     

非小细胞肺癌中COX-2、P-gp的表达及其与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）中COX-2、P—gp的表达及两者的相关性，以探讨COX-2在NSCLC多药耐药中的作用；分析NSCLC中COX-2、P—gp表达与人乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性。方法应用免疫组化法检测54例NSCLC及16例肺良性病变组织中COX-2、P-gp蛋自表达，应用PCR法检测两组中HPV16／18DNA的表达。结果①NSCLC中COX-2和P-gp表达阳性率分别为59．3％（32／54）和46．3％（25／54），远癌正常组织未见阳性表达；②COX-2阳性组中P—gp的表达阳性率为65．6％（21／32），明显高于COX-2阴性组的18．2％（4／22），两者有显著相关性（r=0．468，P〈0．05）；③肺腺癌中COX-2表达阳性率73．1％（19／26），明显高于肺鳞癌46．4％（13／28）（P〈0．05），NSCLC中COX-2表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期和吸烟史等无关（均P〉0．05）；④NSCLC中HPV16／18DNA总检出率为40．7％（22／54），肺良性病变组为6．3％（1／16），两者差异有显著性意义（P〈0．05）；32例COX-2阳性的病例中HPVDNA同时阳性有13例，22例COX-2阴性病例中有13例HPVDNA阴性，两者无相关性（P〉0．05）；HPVDNA阳性组与阴性组间P-gp的阳性表达率分别为40．9％（9／22）及50．0％（16／32），两组间差异无显著性意义（P〉0．05）。结论COX-2可能通过上调P—gp的表达而参与对NSCLC多药耐药的调节；NSCLC中COX-2、P-gp表达与HPV感染无协同作用。     

苦参碱对雄激素依赖性前列腺癌细胞的影响

目的：探讨苦参碱（Matrine）对雄激素依赖性前列腺癌细胞株（LNCaP）凋亡及前列腺特异抗原（prostate specific antigen,PSA）表达的影响。方法：分别用0.5g／L、1.0g／L、1.5g／L、2.0g／L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12h、24h、36h后MTT法检测细胞生长活性;24h后流式细胞仪测定细胞凋亡的变化;24h后Western印迹法检测细胞内Bel-2和Bax的表达;12h、24h、36h后化学发光法检测LNCaP细胞培养液中PSA的变化。结果：苦参碱能抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度苦参碱组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。苦参碱诱导LNCaP细胞凋亡,各浓度组凋亡细胞比例均显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;LNCaP细胞内Bcl-2含量呈浓度依赖性下降,Bax含量呈浓度依赖性升高（P〈0.01）;LNCaP细胞培养液中PSA的表达显著下降（P均〈0.05）。结论：苦参碱能显著抑制LNCaP细胞的体外生长,诱导其凋亡,并抑制PSA的表达。     

Furin在心血管系统发育和心血管疾病中的研究进展

心血管系统发育与心血管疾病是极其复杂的过程。Furin是一种内切蛋白酶,参与心血管系统发育及心血管疾病的发生和发展过程,具有重要的生物学功能。本文主要综述了Furin在心血管系统发育中的作用,并探讨了Furin与心血管疾病的关系,为预防和治疗各种心血管疾病提供了新的靶点。     

涎腺肌上皮瘤19例临床病理学分析

目的探讨涎腺肌上皮瘤的临床病理学特征、免疫表型和鉴别诊断。方法收集19例涎腺肌上皮瘤患者资料,观察其临床病理学特征并进行免疫组化染色观察。结果肿物直径1.2-5.0cm不等,发生于腮腺13例,腭部4例,颌下腺2例。免疫组化结果显示肌上皮瘤表达Calponin（100%）、S-100（94.7%）、SMA（73.7%）、CK（94.7%）GFAP阳性（78.9%）。结论肌上皮瘤是良性涎腺肿瘤,临床表现不典型,镜下瘤细胞形态复杂多样,容易误诊,鉴别诊断必须依据组织学和免疫表型综合判断。