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目的构建弓形虫微线体MIC8的真核表达重组质粒。方法设计合成弓形虫MIC8引物,运用PCR方法扩增其基因片段克隆至真核表达质粒pCDNA3.1,从而构建重组表达质粒pCDNA3.1-MIC8。结果PCR扩增弓形虫MIC8基因序列正确,构建的重组表达质粒pCDNA3.1-MIC8经PCR、HindⅢ和XbaⅠ双酶切和测序鉴定正确。结论成功获得真核表达重组质粒3-pCDNA3.1-MIC8,为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础。 相似文献
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目的观察弓形虫MIC8基因对弓形虫病免疫保护性的效果。方法用PCR方法扩增弓形虫MIC8基因,定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组表达载体pEGFP-MIC8;MIC8-EGFP转染293T细胞,荧光显微镜观察表达情况;然后分别用质粒pEGFP-MIC8、pEGFP-N1空载体及生理盐水肌肉注射免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,末次免疫3周后用弓形虫RH株速殖子感染免疫小鼠。结果 PCR扩增弓形虫MIC基因序列正确,构建的重组表达载体pEGFP-MIC8鉴定正确,荧光显微镜下观察到重组质粒能够在293T细胞中表达。弓形虫攻击感染后,质粒pEGFP-MIC8免疫小鼠与对照组相比,小鼠的存活时间有一定的延长。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-MIC8对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性。 相似文献
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In order to investigate the anti-tumor angiogenesis activity with a recombinant Ag43/FGFR1 chimeric protein(AF)vaccine in a mouse H22 hepatoma model,tumor volume and survival rate of the mice were studied at a 3-day interval.Microvessel density(MVD)was detected by immunohistochemistry.The endothelial deposition of autoantibodies within tumor tissues was examined by immunofluorescent staining,and anti-FGFR1 antibody-producing B cells(APBCs)were tested by enzyme-linked immunospot(ELISPOT)assay.Compared with t... 相似文献
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Ag43/FGFR-1嵌合蛋白疫苗抗小鼠纤维肉瘤血管生成的实验研究 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:利用Antigen43(Ag43)/成纤维细胞生长因子I型受体(FGFR一1)重组嵌合蛋白作为疫苗,了解其是否具有抑制小鼠肿瘤生长的作用,并初步探讨其作用机理。方法:40只BALB/c雌性小鼠接种MethA细胞后第7天,随机分为Ag43/FGFR.1蛋白免疫组(AF组)、A酗3蛋白免疫组(Ag43组)、FGFR—1蛋白免疫组(FGFR一1组)和生理盐水对照组(NS组)4组,每组10只,观察免疫治疗后的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存曲线,分别用免疫组织化学方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD),免疫印迹(Western blot)方法检测抗自身FGFR—1的抗体,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞的数量。结果:Ag43/FGFR-1组与FGFR-1蛋白、A甜3蛋白、生理盐水对照组肿瘤组织MVD计数分别为11.9±2.3、59.6±3.8、60.6±1.2和61.9±3.4(P〈0.01);与对照组相比,Ag43/FGFR-1组肿瘤体积明显变小(P〈0.01),存活时间明显延长(P〈0.01),血清中发现含有抗自身FGFR-1的抗体且发现小鼠脾脏中分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(P〈0.01)。结论:Ag43/FGFR-1蛋白质疫苗能够诱导荷瘤鼠产生特异性免疫反应,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤的生长。 相似文献
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背景与目的:人乳头瘤病毒(HPV)是宫颈癌的主要病因,但近来发现在非小细胞肺癌(NSCLC)中能检测到HPV,两者间的关系已经引起了人们的重视。本研究探讨人乳头瘤病毒(HPV)16、18型感染与非小细胞肺癌(NSCLC)是否存在相关性及其意义。方法:应用PCR、免疫组化和TUNEL分别检测76例NSCLC及13例肺良性病变中HPV16、18型DNA及其原癌蛋白E6 E7、端粒酶hTERT、P53、MDM2、桩蛋白(paxillin)和细胞凋亡的表达。结果:NSCLC中HPV16、18型总阳性率为40.8%(31/76),而肺良性病变组阳性率为7.7%(1/13),差异有显著性(P〈0.05)。NSCLC中HPV阳性组与阴性组之间细胞凋亡、P53、MDM2、paxillin的表达均有显著性差异(P〈0.05),而端粒酶hTERT无显著性差异。HPV感染与组织学类型及淋巴结转移无关,而与组织分化程度有显著性差异(P〈0.05)。结论:HPV16、18型感染在NSCLC发生中可能有病因学意义,其致癌机制可能与细胞凋亡、P53、MDM2及paxillin表达变化有关。 相似文献
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非小细胞肺癌中肺耐药蛋白、酸性谷胱甘肽-S-转移酶的协同表达及其临床意义 总被引:6,自引:1,他引:6
目的探讨肺耐药蛋白(LRP)和酸性谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的协同表达及其临床意义。方法用SP免疫组化方法检测62例术前均未进行化疗的NSCLC组织中LRP、GST-π蛋白的表达情况。结果在NSCLC中LRP、GST-π蛋白表达的阳性率分别为75.8%(47/62);66.1%(41/62)。LRP蛋白表达与肿瘤分化程度相关。GST-π蛋白表达与肿瘤组织类型、分化程度、有无淋巴结转移相关。LRP与GST-π阳性表达之间存在正相关关系。结论LRP、GST-π在不同类型的NSCLC中均可表达,但水平不同。 相似文献
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目的观察弓形虫MIC8基因对弓形虫病免疫保护性的效果。方法用PCR方法扩增弓形虫MIC8基因,定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组表达载体pEGFP-MIC8;MIC8-EGFP转染293T细胞,荧光显微镜观察表达情况;然后分别用质粒pEGFP-MIC8、pEGFP-N1空载体及生理盐水肌肉注射免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,末次免疫3周后用弓形虫RH株速殖子感染免疫小鼠。结果 PCR扩增弓形虫MIC基因序列正确,构建的重组表达载体pEGFP-MIC8鉴定正确,荧光显微镜下观察到重组质粒能够在293T细胞中表达。弓形虫攻击感染后,质粒pEGFP-MIC8免疫小鼠与对照组相比,小鼠的存活时间有一定的延长。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-MIC8对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性。 相似文献
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目的探讨低度恶性子宫内膜间质肉瘤(LGESS)的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法对3例LGESS进行光镜观察和免疫组化染色,并复习文献。结果低度恶性子宫内膜间质肉瘤的临床表现为经期延长,经量增多,下腹部疼痛。B超检查提示子宫肌瘤、子宫内膜增厚,局部结节状影回声团块。镜下肿瘤由弥漫性增生的内膜间质细胞组成,呈浸润性生长,平滑肌组织间隙内出现岛屿状及灶性分布瘤组织,可见簇状分布的子宫内膜螺旋小动脉血管,其中1例见瘤细胞沿着淋巴管生长。免疫组化显示瘤细胞CD10、Vimentin均阳性,而α-inhibin、SMA、CD34均阴性,其中1例ER、PR、bcl-2阳性。结论 LGESS内膜间质细胞具多向分化的特点,镜下瘤细胞形态复杂多样,容易误诊,鉴别诊断必须依据组织学和免疫表型综合判断。 相似文献
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目的:观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)骨保护素(OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法:体外培养大鼠VSMCs细胞株(A7r5),采用不同浓度Ox-LDL(75、150、300μg/mL)或不同时间(4、12、24h)处理构建VSMCs损伤模型,分别采用定量PCR、Western blot方法检测大鼠主动脉OPG、RANKL表达情况。结果:经过oxLDL干预后,VSMCs高表达OPG而低表达RANKL,且呈现浓度和时间的依赖性。结论:ox-LDL能够促进大鼠VSMCs OPG表达,并同时抑制RANKL表达。 相似文献