冰冻切片法破碎大鼠心肌组织提取RNA的实验研究

目的:通过比较液氮研磨法和冰冻切片法破碎大鼠心肌组织来提取RNA的效果,证明利用冰冻切片机破碎动物组织提取RNA是一种简便实用的方法。方法:用液氮研磨法和冰冻切片法破碎大鼠心肌组织并提取RNA,通过RNA浓度、纯度及完整性的检测,以及扩增β-actin基因来比较两种方法的效果。结果:液氮研磨法和冰冻切片法提取的RNA浓度分别为2.59μg/μl、2.05μg/μl。琼脂糖凝胶电泳检测可见两条明显的条带。28s rRNA与18s rRNA条带亮度之比大于1。β-actin基因的PCR扩增在约445bp处有与预期长度一致的明亮条带。结论:本实验结果显示,冰冻切片法破碎心肌组织能达到液氮研磨法的效果,是一种成本低,效果好,快速简便的破碎动物组织提取RNA的方法。     

鼠Mincle蛋白B细胞抗原表位预测及多克隆抗体制备

目的预测鼠Mincle蛋白的B细胞抗原表位及制备其多克隆抗体。方法以鼠Mincle蛋白氨基酸序列为基础,利用signalP3.0和TMHMM Server在线软件分析其信号肽和跨膜结构,利用DNAstar软件预测其二级结构、蛋白骨架区的柔韧性、亲水性、表面可能性及表面抗原性指数;融合表达PET30a(+)/Mincle蛋白并通过镍层析柱纯化后,免疫兔获得Mincle多克隆抗体。结果 Mincel蛋白是一种跨膜蛋白质,N末端第1-22号氨基酸可能位于蛋白的表面并可能为抗原表位;成功构建了重组载体PET30a(+)/Mincle,转化大肠杆菌BL21后表达包涵体融合蛋白,利用镍亲和层析得到了无生物活性的高纯度重组蛋白,纯化蛋白免疫兔,制备了滴度达1:128 000的多克隆抗体;Western-blot检测显示抗体特异性高。结论 Mincle蛋白N端即胞外区的第1-22氨基酸可作为Mincle蛋白的主要抗原表位区以制备Mincle多克隆抗体。     

贵港市区中小学生结核菌感染及发病状况分析

目的了解贵港市中学生结核菌感染及肺结核患病情况。为做好学生结核病防治工作提供依据。方法对贵港市区11所中小学的11 204名新生进行结核菌素（PPD）试验,并对硬结直径/20mm或有水泡者进行X线摄片检查,对胸片异常者做痰抗酸杆菌涂片检查。结果 PPD试验阴性率为57.11%,阳性率为37.58%,强阳性率为5.30%。发现活动性肺结核18例,占0.16%,患病率为160.66/10万,其中涂阳3例,占0.03%,涂阳患病率为26.78/10万。结论贵港市中小学生PPD阳性率、强阳性率较高,中学生肺结核患病率也较高,应及时采取相应措施,防止结核病在校园内传播。     

GnRH-a联合卡孕栓在子宫黏膜下肌瘤宫腔镜电切术中的应用

研究术前联合应用GnRH-a(达菲林)、卡孕栓对子宫黏膜下肌瘤宫腔镜电切术的疗效及并发症的影响。方法:2007年2月～2012年6月在我院住院的子宫黏膜下肌瘤患者共78例,其中观察组32例,术前应用GnRH-a(达菲林)3个月,术前30分钟阴道后穹窿放置卡孕栓1mg;对照组46例,术前30分钟阴道后穹窿放置卡孕栓1mg。结果:①最初确诊时两组肌瘤直径、瘤蒂直径、宫腔大小等比较,差异无显著意义(P>0.05),切除后两组肌瘤直径、瘤蒂直径比较,观察组直径明显缩小,两组比较差异有显著意义(P<0.01)。②观察组确诊时平均Hb74.5±7.3g/L,术前平均Hb113.2±6.8g/L,Hb平均上升35.7±7.1g/L。③观察组手术时间23±10min,出血量32±12ml,术中无一例并发症,无一例需中转开腹或行二期手术,术后月经均改善明显。对照组手术时间42±14min,出血量57±29ml,有3例出现并发症,2例中转开腹,仅两例中转开腹患者术后1、2月的经期延长。两组间比较,均P<0.05,有统计学差异。     

1635名中学生结核菌素试验结果分析

为了解我市中学生对结核病的易感程度，我们于１９９６年１０月份对本市江南中学１６３５名学生进行了结核菌素试验（结素试验），现将结果报告如下。１　对象与方法　　对该校初、高中生共１６３５名进行结素试验，其中男生１０６４人，女生５７１人，初中生９８１人，高中生６５４人。采用卫生部长春生物制品研究所生产的结核菌素纯旦白衍生物（ＰＰＤ），批号为９５０８－６８，５０ＩＵ”ｍｌ）于受试者左前臂掌侧中部皮内注射０．１ｍｌ，７２小时判断结果，以硬结平均直径０～４ｍｍ为阴性反应，≥５ｍｍ为阳性反应，≥２０ｍｍ或有水…     

我省地市县属医疗卫生单位查新项目分析及思考

分析了我省地市县属医疗卫生单位成果查新项目的新颖性、水平及查新项目大幅增加的原因,对地市县级成果查新的必要性提出了质疑及建议。     

针刺、推拿联合康复训练治疗神经根型颈椎病临床研究

目的：观察针刺、推拿联合康复训练治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法：选取90 例神经根型颈椎病患者,按照不同治疗方法分为对照组和观察组,每组45 例。对照组给予康复训练治疗,观察组给予针刺、推拿联合康复训练治疗,14 d 为1 个疗程,疗程之间间隔2 d,2 组均治疗2 个疗程。比较2 组临床疗效及不良反应;比较2 组治疗前后视觉模拟评分法（VAS） 评分、Cobb 角。结果：观察组总有效率为95.56%,高于对照组的77.78%（P＜0.05）。治疗后,2 组VAS 评分均较治疗前降低（P＜0.05）,观察组VAS 评分低于对照组（P＜0.05）;2 组Cobb 角均较治疗前增大（P＜0.05）,观察组Cobb 角大于对照组（P＜0.05）。治疗过程中,2 组均无明显不良反应发生。结论：针刺、推拿联合康复训练治疗神经根型颈椎病临床疗效较好,可有效缓解疼痛,促进腰椎生理曲度恢复,且安全性高。     

脓毒症患者中性粒细胞差异表达基因及信号通路的生物信息学分析

目的寻找脓毒症患者中性粒细胞中发生差异变化的致病相关基因及关键通路。方法从基因表达汇编(GEO)数据库下载GSE6535、 GSE49755、 GSE49756、 GSE49757,其中包含143个实验组样本及65个对照组样本的基因芯片数据。采用R软件的相关程序包筛选鉴定出中性粒细胞差异表达基因(DEG)。通过两两交集,得到共93个DEG,进一步用DAVID、 STRING及Cytoscape里的ReactomeFIPlugIn和Cytohubba应用程序等多种方法进行基因功能和通路富集分析、 PPI网络分析和关键基因分析。结果确定中性粒细胞最重要的关键DEG,包括Toll样受体2(TLR2)、原癌基因SRC、基质金属蛋白酶9(MMP9)、白细胞介素1受体2(IL1R2)、抑制蛋白β1(ARRB1)、白细胞介素1受体相关激酶3(IRAK3)、白细胞介素18受体1(IL18R1)、白细胞介素18受体相关蛋白(IL18RAP)、丝氨酸/苏氨酸激酶17b(STK17B);发现了一些涉及脓毒症患者致病相关的通路以及免疫相关的生物学过程。结论这些基因可能通过多种信号通路引起脓毒症的发生发展。     

抗体酶及其催化原理

从18 8 3年Payen和Persoz发现第一个酶以来,直至2 0世纪80年代初期,整整一个半世纪,已经发现的酶已经超过了4 0 0 0种[1] 。而抗体是生物体受抗原诱导产生的,在结构上与抗原有高度的互补性,并能使其特异性与抗原结合的蛋白质。诺贝尔奖二次得主鲍林于194 6年提出,酶催化化学反应的原因在于酶与高能态的过渡态相结合,从而大大降低了化学反应的活化能。因此在化学反应中,设计一种与反应物的过渡态结构相似的半抗原,就可以设法诱导机体产生特异性识别化学反应的过渡态的抗体,并通过这种抗体与反应物的过渡态结合降低了反应的活化能,加速该反应…     

低频电针对紫杉醇诱发周围神经痛大鼠背根神经节TRPV1表达的影响

[目的]观察低频电针对紫杉醇(paclitaxel,PTX)化疗药物诱发周围神经病变(chemotherapy-induced peripheral neuropathy,CIPN)导致大鼠50%足底机械缩足反应阈值(paw withdrawal thresholds,PWTs)及背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中瞬时感受器电位香草酸受体1型(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)通道表达的影响,探讨低频电针干预紫杉醇诱发CIPN的DRG中TRPV1通路的干预作用。[方法]第1部分:健康雄性SD大鼠随机分为溶剂组、紫杉醇组,每组7只。第1、3、5、7天腹腔注射紫杉醇制备CIPN模型。采用von Frey丝测量大鼠第0、2、4、6、8、15、22天右足50%PWTs。第2部分:健康雄性SD大鼠随机分为溶剂组、紫杉醇组、紫杉醇+电针组、紫杉醇+假电针组,每组7只。造模方法同第1部分。电针组于第10天开始治疗,电针参数:双侧"足三里""昆仑"穴,频率2 Hz,强度0.5～1.5 mA,1次/d,30min/次;假电针组予以相同部位针刺,无电流输入。采用von Frey丝测量大鼠第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18天右足50%PWTs。用免疫荧光技术检测右侧L4-6 DRG中TRPV1表达。[结果]1.与溶剂组相比,紫杉醇组造模后右足50%PWTs显著降低(P0.01),说明紫杉醇诱发CIPN模型造模成功;且紫杉醇组右侧L4-6 DRG中TRPV1表达显著增多(P0.01)。2.电针干预后,紫杉醇+电针组大鼠右足50%PWTs显著提高,而假电针组无明显变化(P0.01)。3.与紫杉醇组相比,紫杉醇+电针组L4-6 DRG中TRPV1表达有不同程度降低(P0.01),而假电针组无明显变化(P0.05)。[结论]低频电针能显著下调大鼠DRG中由紫杉醇所导致的TRPV1过表达,这一作用很可能参与了其抑制紫杉醇诱发大鼠CIPN的作用。