基于DNA条形码技术的北柴胡种子分子鉴定

目的:建立基于核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列的北柴胡种子分子鉴定方法,保障北柴胡栽培种子的物种准确。方法:收集北柴胡及主要栽培柴胡属物种种子、市售北柴胡种子样品共59份,探究不同取样量和不同水浴条件对种子DNA提取质量的影响,建立柴胡属种子DNA提取方法;通过聚合酶链式反应(PCR)和双向测序得ITS条形码序列。从GenBank下载34条北柴胡、红柴胡、黑柴胡等主要栽培柴胡属物种ITS序列,丰富北柴胡种子鉴定数据库;利用MEGA-X10. 0. 5进行变异位点分析并构建邻接(NJ)系统发育树,考察ITS序列对北柴胡种子的物种鉴定能力;基于BLAST方法和NJ系统发育树法对市售北柴胡种子进行DNA条形码鉴定。结果:共获得59条北柴胡、红柴胡、三岛柴胡及市售北柴胡种子的ITS序列,北柴胡ITS序列可分为6个单倍型,包含7个变异位点,NJ系统发育树表明北柴胡所有单倍型可形成独立的枝,与所收集样品中其他柴胡属栽培物种可相互区分,具备北柴胡种子物种鉴定能力。基于ITS条形码序列鉴定发现19份市售北柴胡种子中有3份为三岛柴胡,伪品率15. 8%。结论:基于ITS序列的DNA条形码技术可以准确可靠地鉴定北柴胡种子及其易混品,可为我国中药材种子规范化建设提供参考。     

北苍术水溶性多糖提取工艺的优化及含量测定

目的：研究北苍术水溶性多糖的最佳提取工艺和含量测定方法。方法：采用水提醇沉法从北苍术粉末中提取水溶性多糖，采用正交试验考察各因素对北苍术水溶性多糖得率的影响，并以葡萄糖作为对照品，采用苯酚-硫酸法测定北苍术中水溶性多糖的含量。结果：多糖含量的线性回归方程为y=13.06x-0.0324，(r=0.9994)，平均回收率为98.62%，RSD=3.1%(n=6)，紫外可见分光光度法在486nm处测定北苍术水溶性多糖的含量为4.56%。各因素对北苍术多糖的影响由大到小依次为：料液比＞提取温度＞提取时间＞提取次数，最佳提取工艺为：料液比为1：30，提取温度90℃，提取时间为每次3h，提取次数3次。结论：本研究建立的北苍术多糖的提取工艺简单，提取率高，含量测定方法稳定性好、简便、成本低。     

中药天年饮对衰老大鼠学习记忆及海马单胺类神经递质含量的影响

目的：观察中药天年饮（Tiannianyin，TNY）对D-半乳糖衰老大鼠学习记忆及海马单胺类神经递质含量的影响。方法：选用成年雄性SD大鼠40只，随机分为4组，每组均为10只：正常组、衰老模型组、TNY用药组、阴性对照组。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型，采用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力、高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠海马单胺类神经递质去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）的含量。结果：D-半乳糖衰老大鼠空间学习记忆能力明显下降，模型大鼠在90秒内穿过原平台位置的次数和在原平台象限探索时间占总时间的百分比与正常大鼠相比明显下降（P〈0．01）；衰老大鼠海马NE、DA、5-HT的含量明显降低（与正常大鼠相比P〈0．01）。TNY可提高模型大鼠的空间学习记忆能力及海马单胺类神经递质的含量（用药组与模型组相比P〈0．01，P〈0．05）。结论：TNY可有效调整中枢神经递质的合成及提高学习记忆能力，具有良好的延缓衰老的作用。     

影响痰标本抗酸杆菌检出率的主要因素

活动性肺结核的早期诊断和及时治疗,对结核病疫情的控制具有重要意义。目前,对病人痰标本的抗酸杆菌检查仍是活动性肺结核的主要诊断依据之一。但该方法检出阳性率仅30％左右[1],且影响因素较多。为进一步提高痰标本抗酸杆菌检出率,我们对影响检出率的有关因素做了观察现将结果报告如下。1材料与方法1.1材料病例系来院的门诊和住院病人,共477例。经临床检查,X线或病理学检查诊断为肺结核病。每例病人按《结核病诊断细菌学检验规程》[2]中关于疾标本留取、运送和保存要求,同时收集清晨痰,夜间痰和即时疾3份痰标本。在477例清晨痰标…     

补肾中药对成骨样细胞UMR106增殖的影响(I)

目的 :探索补肾中药对成骨样细胞 UMR10 6增殖的作用。方法 :用各种补肾中药的醇提取物和成骨样细胞 UMR10 6共同体外培养 ,以 MTT法检测细胞的增殖。结果 :在所筛选的 7种补肾中药中 ,仙茅 ,地骨皮、牛膝、山茱萸对成骨样细胞的增殖具有显著的促进作用。结论 :补肾中药可通过促进成骨细胞的增殖来发挥健骨及抗骨质疏松的作用。     

承德市中药资源发展现状及可持续开发策略

中药资源是中医防治疾病的物质基础,是国家重要的战略资源.随着医疗事业的发展和中药研究的不断深入,中药资源可持续利用成为了我国中药现代化面临的重要课题[1].本文综合分析了承德市中药资源的发展现状和存在问题,并提出了促进承德市中药资源可持续利用的建议.     

结核分枝杆菌胞浆蛋白质抗原的制备与检测

将结核分枝杆菌（M．tuberculosis）H37Ra株苏通培养基培养物化学灭活，低温高速离心，超声波裂解，SephadexG－200柱层析，获得3个峰，制备了3种胞浆蛋白质抗原。经与结核分枝杆菌阳性参比血清、阴性参比血清及各种分枝杆菌高免兔血清的ELISA检测，并与PPD、聚合OT及菌体PP等抗原比较，结果表明：第二峰的胞浆蛋白质抗原的特异性最好。     

不同温度及pH值对DF-1型碘伏中有效碘含量的影响

DF- 1型碘伏是一种新型的高效碘消毒洗涤剂 ,具有广谱、高效、无毒、无腐蚀等特点 ,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等多种致病菌 ,在短时间内即可达到 99%～ 1 0 0 %的灭菌效果 [1 ]。此外 ,本产品还可用于医疗器械、皮肤、粘膜、蔬菜、水果、器具等的消毒洗涤 ,消毒效果较为理想。但在实验中发现 ,随着室内温度不同及溶液 p H值的变化 ,有效碘含量受到一定影响。为此 ,我们进行了考察实验 ,以提高产品质量。1　实验方法和结果1 .1　不同温度对 DF- 1型碘伏中有效碘含量的影响　 见表 1 :有效碘含量的测定根据碘含量法进行测定 [2 ]。从表 1…     

HPLC法测定咳喘宁胶囊中二苯胺的含量

咳喘宁胶囊是由中草药野罂粟经提取、加工而制成的口服制剂 ,具有止咳、平喘之功效 [1] ,其在提取过程中应用了 AB— 8型大孔吸附树脂 ,由于大孔吸附树脂是一种高分子聚合物 ,其成品中可能含有正已烷、二苯胺、丙烯酸甲酯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯等有毒物质 ,为了防止制剂中混入这些有毒物质 ,我们按照国家药审中心的要求 (二苯胺的含量不得高于 2 0 ppm) ,采用高效液相色谱法测定了二苯胺的限量。1　仪器与试剂Lc- 10 AT高效液相输液泵 (日本岛津 ) ,SPD-M10 Avp检测器 (日本岛津 ) ,CLASS- vp6 .0色谱工作站 (…     

赤雹根总皂苷镇痛作用部位研究

目的:探讨赤雹根总皂苷(TSRT)的镇痛作用部位.方法:昆明种小鼠120只,随机分为福尔马林致痛实验组和改进小鼠酵母致炎性组织疼痛模型实验组,每组60只.各组再分为TSRT 240,120,60 mg· kg-1组,阿司匹林200 mg· kg-1组,吗啡5 mg·kg-1组和空白对照组,每组10只,吗啡组腹腔注射给药,其余各组均灌胃给药.采用小鼠福尔马林致痛实验和改进小鼠炎性组织疼痛模型观察TSRT对痛反应的影响,分析其镇痛作用部位.结果:在福尔马林实验中,TSRT 120,60 mg· kg-1剂量组小鼠第Ⅱ时相痛反应积分显著低于NS组(P＜0.01),但对第Ⅰ时相疼痛积分无明显影响;TSRT 240 mg· kg-1剂量组小鼠第Ⅰ时相和第Ⅱ时相痛反应积分均低于NS组(P ＜0.05,P＜0.01).在小鼠炎性组织疼痛模型实验中,TSRT各剂量组炎性足痛阈显著高于NS组(P＜0.01),正常足痛阈与NS组比较差异无显著意义.结论:TSRT镇痛作用部位主要在外周.