可溶性HLA-G1上调活化的同种反应性T细胞表达FasL促进其凋亡

目的探讨可溶性HLAG1对活化的同种反应性T细胞FasL表达及凋亡的影响。方法借助基因工程技术构建表达可溶性HLAG1的真核表达质粒;把重组质粒转染入宿主细胞,表达可溶性HLAG1并借助免疫亲和层析技术纯化可溶性HLAG1蛋白;用EB病毒转化的同种异体B淋巴细胞作为刺激细胞,通过长期混合淋巴细胞培养,激活同种反应性T细胞。活化T细胞经不同浓度可溶性HLAG1处理12h后,用Westernblot法检测其FasL表达情况;处理24h后,用FACS检测其凋亡情况。结果可溶性HLAG1能够上调活化的同种反应性T细胞表达FasL;能够促进活化的T细胞发生凋亡,且上述作用具有剂量依赖性。结论可溶性HLAG1分子能够使活化的同种反应性T细胞表达FasL升高,进而促进其凋亡。     

sHLA-A*020-1抗原肽复合物的构建

以原核表达的sHLA A 0 2 0 1 BSP为重链 ,β2 m为轻链 ,与人工合成的EBV抗原肽LMP2A (4 2 6 4 34、NH2 CLGGLLTMV COOH )利用稀释法进行共折叠复性 ,形成可生物素化的可溶性HLA A 0 2 0 1抗原肽复合物。并利用仅与天然构象HLAI类分子结合的单抗W6 / 32 ,通过Dot ELISA和Westernblot对折叠产物的构象进行鉴定 ,证实复性后成功获得了天然构象的sHLA A 0 2 0 1 抗原肽复合物。为进一步组装可溶性HLA/抗原肽四聚体以及制备人工抗原提呈细胞奠定基础。