健康人服用黄芪当归合剂后体内阿魏酸的HPLC法测定

目的　建立健康人服用黄芪当归合剂后的血清预处理方法。方法　应用沸水浴一次处理、甲醇二次处理去除血清蛋白质方法 ,用HPLC直接测定健康人服用黄芪当归合剂后体内阿魏酸 (FA)。色谱条件 :甲醇 冰醋酸 水 (4 0∶0 .3∶5 9 .7)为流动相 ,C1 8(Diamonsil)柱 (15 0mm× 4.6mm ,5 μm)为固定相。FA用内标 (香豆精 )法定量。 结果　FA的最低检测限为 2 .5 1ng ;沸水浴 10min的最低检测血清浓度为 2 5 .10ng/mL ,线形范围 40 .16～ 80 3 2 .0 0ng ,r=0 .9975。黄芪当归合剂口服后 5min血清中即能测出阿魏酸 ,在 3 0min达高峰 ,在 90min出现第 2次高峰。结论　该方法保留了水浴法的优点 ,灵敏、快速、简便、专一和重现性好     

中药药动学血样预处理方法回顾与展望

综述了以血药浓度法研究中药药动学中的血样预处理方法并作简要评价,特别介绍了水浴法作为方剂血样预处理的方法,为中药药动学及中药药效物质基础研究提供参考。     

RP-HPLC测定大鼠服用大川芎丸提取物后血浆中的天麻素

目的　建立测定大鼠血浆中天麻素的方法。方法　应用无水乙醇沉淀蛋白 ,醇溶液用N2 气流吹干后用RP -HPLC直接测定。以Diamonsil(TM)钻石C1 8色谱柱 (5 μm ,4 .6mm× 15 0mm)为固定相 ,乙腈 -水 -磷酸 (2 .6 4∶97.36∶0 .2 )为流动相 ,流速1.0ml·min- 1 ,检测波长 2 2 1nm。间苯三酚做内标。结果　天麻素的最低检测限为 0 .2ng ,最低血浆检测浓度为 4ng·ml- 1 ,线性范围 4～ 16 0 0 0ng·ml- 1 (r=0 .9988)。平均加样回收率 94 .6 %。结论　该方法灵敏、快速、简便、专一性和重复性好     

实验性脾虚大鼠下丘脑SS、MOT、CCK样免疫反应神经元的变化

中医“脾”与消化系统关系密切 ,脾虚时消化功能发生紊乱。而脑肠肽除通过肠神经系统和体液因素 ,还可在中枢水平调节胃肠功能。因此 ,研究脾虚证与脑肠肽的关系对探讨脾虚证的本质有重要意义。本实验在以前有关脾虚证与下丘脑SS、MOT、CCK含量关系的研究基础上 ,首次从形态学角度就脾虚证与SS、MOT、CCK样免疫反应神经元的关系进行探讨。1　材料和方法动　物　雄性SD大鼠 2 5只 ,体重 2 5 0± 2 0 g ,本校实验动物中心提供。药物与试剂　四君子汤、六味地黄汤均由本院中药房提供 ,将药物于清水中浸泡 30分钟 ,煮沸后 ,文火煎 30分…     

不同脾虚时期大鼠甘草甜素药物动力学特征及其机制的探讨

探讨脾虚证甘草甜素（ＧＬ）的药物动力持征及其在胃肠运动方面的机制。方法：利血平作用于大鼠７天和１４天,制成实验性脾虚短期（Ａ组）和长期（Ｂ组）模型;用四君子汤和六味地黄汤反证,用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定大鼠体内ＧＬ的血药浓度;用高灵敏度传感器记录胃和二十指肠运动波。结果：与正常对照组（Ｅ组）比较;①Ａ组大鼠ＧＬ体内为一室房室ＰＫ模型,其它组均为二室房室模型,Ａ组和Ｂ组大鼠ＡＵＣ（１６３４６９     

双参通脉滴丸制备中7种有效成分快速质量监测的HPLC-MS法

目的:进行双参通脉滴丸(人参、丹参、川芎)制备的质量快速监测。方法:采用高效反相液相色谱(RP-HPLC)和MALDI-TOF-MS法,以丹参酮ⅡA含量作为指标,色谱柱为C18-ODS(150mm×4.6mmI.D.,5μm,岛津公司),以乙腈(含0.5%冰醋酸)和水(含0.5%冰醋酸)体系为流动相,流速为1mL/min时,柱温为25℃。结果:波长为203nm,可同时测定到人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re和丹参酮ⅡA。波长为270nm,可同时测定到制剂中的川芎嗪,丹酚酸B,阿魏酸,丹参酮ⅡA4种单体的有效成分,并在其测定的范围内均具有良好的线性关系。用MALDI-TOF-MS分析鉴定样品中丹参酮IIA的分子量一致。结论:该方法快速、准确、其精密度、稳定性和重现性良好,对双参通脉滴丸中7种化学成分均能成功地达到质量监测。     

川芎汤与冠心Ⅱ号吸收入人血清中阿魏酸的血药浓度—时间曲线

目的:探讨方剂配伍对吸收入体内血药浓度及其药物动力学参数的影响.方法:用已建立的HPLC法[1],测定健康自愿者一次口服川芎汤(1 g·kg-1)、冠心Ⅱ号汤(6 g/kg,其中川芎为1 g/kg)后血清中阿魏酸(FA)的血药浓度-时间曲线.结果:均表现为双峰现象;川芎汤和冠心Ⅱ号在健康人血清中FA的血药浓度时间曲线下面积(AUC)分别为15735±7064和15886±8062 μg·L-1·min-1;健康人血清中川芎复方来源的FA血药浓度最高和最低定量值之间表现出3～8倍的差异.结论:在冠心Ⅱ号中川芎配伍芍药、红花和丹参等并不影响体内FA的血药浓度及其生物利用度.     

脲梯度体积排阻色谱复性并同时纯化rhSCF

目的:用脲梯度体积排阻色谱(SEC)复性并同时纯化在大肠杆菌中高表达的人干细胞因子.方法:采用脲梯度SEC,根据蛋白质与小分子物质分离过程的迁移速度不同的原理,在色谱过程中通过脲浓度的线性梯度洗脱方式脱除变性剂脲而达到蛋白复性并同时纯化.结果:用脲梯度SEC复性重组人干细胞因子(rhSCF)能够使复性蛋白的产率提高,色谱过程中洗脱长度、流速以及蛋白浓度的变化对蛋白复性效率都有不同的影响.结论:用脲梯度SEC复性rhSCF可以使复性产率提高,其质量回收率从35.2%提高到51.4%.     

GC-FID法同步测定人含服速效救心丸后血中冰片、川芎嗪含量

目的 探讨建立健康志愿者含服速效救心丸后吸收入血浆成分的药动学的研究方法，为临床治疗药物监测及证治药动学假说的研究提供实验依据。方法 建立GC—FID测定健康志愿者血浆中冰片、川芎嗪含量的方法，不同时间点取健康志愿者含服速效救心丸后的血浆并分别测定其冰片、川芎嗪浓度，经3P97软件处理数据得其药动学参数。结果 健康人血浆中线性范围为20～420ng／mL，线性关系良好，健康人含服速效救心丸后血浆中体内药时过程符合开放性一室模型，吸收、分布、排泄较为迅速。结论 所建立的GC—FID测定法灵敏、可靠，可较好地用于冰片、川芎嗪体内的药动学研究。     

p27Kip1反义寡核苷酸对B淋巴瘤细胞WEHI-231细胞周期的影响

目的　探讨p2 7Kip1在抗原受体介导的B淋巴瘤细胞WEHI- 2 31细胞周期停止信号中的作用。方法　用抗IgM抗体诱导WEHI- 2 31细胞细胞周期停止。用合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸抑制p2 7Kip1基因的表达。采用流式细胞仪 ,分析细胞核的DNA含量和细胞周期的变化。用体外激酶实验检测Cdk2的活性 ,Westernblot检测Rb蛋白的磷酸化水平。结果　合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸能阻断抗IgM抗体诱导的p2 7Kip1基因表达的上调。用p2 7Kip1反义寡核苷酸处理WEHI-2 31细胞 ,可恢复抗原受体交联引起的周期素依赖性激酶Cdk2活性的降低 ,以及Rb蛋白磷酸化水平的下降 ,并使细胞周期恢复运转。结论　p2 7Kip1可能在抗原受体信号介导的WEHI-2 31细胞的细胞周期停止中发挥主要作用