骨代谢生化标志物与骨质疏松症研究进展

骨质疏松症（osteoporosis,OP）是一种以骨量减少、骨密度降低、骨组织微结构发生改变致骨骼脆性和骨折危险性增高为特征的全身性骨骼疾病。骨量减少包括骨矿物质和骨基质等比例减少,是骨代谢改变的一种结果。在骨质疏松症的形成和发展中,必然伴随着骨代谢生化标志物的变化。这种变化不仅可以反映骨吸收与骨形成的平衡状况,而且在骨质疏松症早期诊断、临床疗效评价和指导临床用药方面具有重要的价值。     

侵袭性真菌感染的实验室诊断进展

侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI),是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病.     

ProGRP、NSE、CEA、CYFRA21-1、SCC单独及联合检测在肺癌鉴别诊断中的价值

摘要：目的?探讨血清肿瘤标志物ProGRP、NSE、CEA、CYFRA21-1、SCC单独及联合检测在肺癌鉴别诊断中的临床应用价值。方法?选取2016年12月至2018年5月于本院就诊且经病理组织学诊断为肺癌的237例患者作为肺癌组，其中小细胞肺癌(SCLC)106例，非小细胞肺癌(NSCLC)131例。选取同期就诊的肺良性疾病患者95例作为肺良性疾病组，其中慢性阻塞性肺炎45例，支气管扩张25例，肺炎12例，支气管炎8例，支气管哮喘3例，矽肺2例。采用电化学发光法检测各组患者血清ProGRP、NSE、CEA、CYFRA21-1、SCC的表达水平，并进行统计学分析；Logistic回归及ROC曲线评估该5种血清肿瘤标志物单独及联合检测在肺癌鉴别诊断中的临床应用价值。结果?肺癌患者血清ProGRP、NSE、CEA和CYFRA21-1的表达水平显著高于肺良性疾病组(P均<0.05)。Logistic回归分析及ROC曲线显示，5种血清肿瘤标志物联合检测鉴别诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUCROC=0.779)均高于单项检测。在检测效能方面，ProGRP检测的特异性最高(98.9%)，SCC检测的敏感性最高(94.9%)，而联合检测的准确性最高。结论?ProGRP、NSE、CEA、CYFRA21-1和SCC的单独及联合检测在肺癌鉴别诊断中具有较好的临床应用价值。     

COBIO XS尿有形成分分析仪在筛查尿路感染中的应用

目的评价COBIO XS尿有形成分分析仪在诊断尿路感染中的应用价值。方法收集南京医科大学附属南京医院住院患者清洁中段尿349份,每份标本在进行细菌的分离培养后使用COBIO XS尿有形成分分析仪检测尿液白细胞数和细菌数。以细菌培养结果为金标准,并以阴性杆菌大于或等于10×105 CFU/mL、阳性球菌及真菌大于或等于10×104 CFU/mL为阳性诊断标准,利用SPSS18.0统计软件绘制受试者工作特征(ROC)曲线,从而计算出白细胞和细菌数在尿路感染诊断中的最佳临床判断(cut off)值,得出其特异度、灵敏度、阴性预测值和假阴性率。以Kappa检验分析其与细菌培养结果的一致性。结果尿培养结果阳性的标本70例(20.65%),细菌数和白细胞数分别以136个/微升和13.5个/微升的cut off值判断,特异度分别为94.1%和66.9%,灵敏度均为88.6%,阴性预测值分别为96.93%和95.74%,假阴性率均为2.36%,Kappa值为0.92。结论 COBIO XS尿有形成分分析仪用于初筛尿路感染与尿液标本的细菌培养有较强的一致性,是一种简单、快速、可靠的筛查尿路感染的实验,其细菌计数可以作为尿路感染诊断检测的良好指标。     

2013年江苏地区12家医院细菌耐药监测结果评价

目的监测评价2013年江苏地区12家医院细菌耐药情况。方法收集12家医院2013年全年临床分离菌的信息,用WHONET 5.6软件进行统计分析,细菌计数剔除同一患者重复分离的相同菌株,药物敏感性的判读选用软件自带的美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2013年版标准。结果收集12家医院2013年1~12月临床分离细菌60 505株,其中革兰阳性菌20 251株(占33.5%),革兰阴性菌40 254株(占66.5%)。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为54.5%和83.4%;肠球菌属中万古霉素耐药的屎肠球菌占5.4%、粪肠球菌占1%;革兰阴性杆菌中肠杆菌科细菌占59.4%,非发酵菌占39.0%。肠杆菌科细菌对第三代头孢菌素的耐药率在33.2%~56.8%之间,对碳青霉烯类抗菌药物耐药率在6.1%~8.4%之间。非发酵菌中铜绿假单胞菌占41.3%,鲍曼不动杆菌占37.7%。其中铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为30.9%和27.4%,鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为64.0%和66.4%。结论与2012年比较,2013年江苏地区细菌耐药性仍很严重。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、多重耐药的鲍曼不动杆菌和多重耐药的铜绿假单胞菌的分离率略有降低;但耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌、万古霉素耐药的屎肠球菌和碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌的分离率均高于2012年。     

LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响

目的观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建LYRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B);实时定量RT-PCR验证转染情况;RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平。结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功;与空载对照组比较,LYRM1过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均<0.05)。结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢。     

重组人中性粒细胞弹性蛋白酶的制备及鉴定

目的:利用基因工程技术制备纯化的重组人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE),为进一步制备HNE的相应抗体和建立精液HNE的检测方法奠定基础。方法:利用HNE的特异引物从人外周血粒细胞中获得HNEmRNA,并将其cDNA克隆入质粒pGEX-2T中以获得重组质粒pGEX-2T/HNE。重组质粒经PCR、双酶切和基因测序鉴定后转入感受态大肠埃希菌DH5α中,并用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白GST/HNE。重组融合蛋白经凝血酶裂解后获得重组HNE,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化后获得纯化的重组HNE。结果:成功制备重组表达质粒pGEX-2T/HNE,并转化入大肠埃希菌DH5α中。经IPTG在18℃过夜诱导后成功获得重组融合蛋白GST/HNE的表达。经凝血酶裂解和谷胱甘肽琼脂糖珠纯化后成功获得纯化的重组蛋白HNE。结论:纯化的重组HNE的获得为进一步制备HNE的相应抗体和建立精液HNE的检测方法奠定了基础。     

化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析

目的构建化脓性链球菌毒力基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因。方法采用抑制消减杂交方法,以从患者体内分离的链球菌作为毒力菌株,分离毒力基因,将其与PMD18-T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,将转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析。结果酶切产物为100~2 000 bp,连接效率大于50%,成功构建了化脓性链球菌毒力基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性。结论用抑制消减杂交技术及T/A克隆技术成功构建了化脓性链球菌毒力基因文库;5个未知的新序列可能与化脓性链球菌的高毒力有关。     

Th17细胞在自身免疫疾病中的研究

自身免疫疾病是威胁人类健康的常见疾病之一。免疫系统异常是导致自身免疫疾病发生、进展和预后的关键。CD4+T细胞作为效应T细胞的重要成分,参与免疫应答的各个阶段,在免疫调节中发挥关键作用。经典免疫学将CD4+T细胞分为Th1和Th2两个亚群,两者在免疫应答反应过程中相互     

DM2患者检测non-HDL-C、AIP和BIL的意义

目的：探讨DM2患者血清非高密度脂蛋白胆固醇（non-HDL-C）、致动脉硬化指数（AIP）和胆红素（BIL）的临床意义。方法：采用全自动生化分析仪测定77例DM2患者fBG、TC、TG、HDL-C、TBIL、DBIL,计算出non-HDL-C、AIP及间接胆红素（NDBIL）,与65例正常对照组比较。结果：DM2组的血清TG、non-HDL-C和AIP水平显著高于正常对照组（P〈0.01）;而TBIL、NDBIL和HDL-C水平显著低于正常对照组（P〈0.01）;TC和DBIL与正常对照组相比无显著性差异。结论：DM2患者的高non-HDL-C、高AIP和低胆红素使得体内抗氧化活性减低,氧化LDL形成增多,增加了DM患者并发动脉粥样硬化的危险性。