丹参对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

1　材料　动物 :雄性健康ＳＤ大鼠 ,由本校动物实验中心提供。药品 :丹参注射液由正大青春宝药业有限公司生产 ;主要仪器 :显微镜-计算机真彩色图像分析系统 (ＣＭＩＡＳ)由北京航天航空大学研制。岛津ＣＬ -730 0全自动生化分析仪。电动匀桨机 (宁波新芝科器研究所 )。 76 0ＣＲＴ双光束紫外可见分光光度计。2　方法2 1　模型制作　大鼠 2 0 %乌拉坦 ( 5 0ｍｇ/ｋｇ)麻醉 ,腹部正中 5ｃｍ左右切口 ,钝性分离肾周组织 ,暴露双侧肾脏 ,每组均切除右肾 ,随后作以下处理 :对照组 :游离左肾不钳夹肾蒂 ;缺血再灌注组 :用无损伤动脉夹夹闭肾蒂 4…     

α1胸腺肽对胸腺细胞发育和成熟的影响

目的:探讨α₁胸腺肽对胸腺细胞发育的影响。方法:测定CD4⁺CD8⁺胸腺细胞群的比例及 5-FU和胸腺肽处理组在CD4^-CD8^-胸腺细胞群上Hh信号的Smo分子(增生反应的潜在阴性调节者)的表达效果来估价胸腺肽对胸腺细胞成熟和发育的影响。结果:发现α₁胸腺肽在30μg/kg的低剂量下显示活性。流式细胞仪分析根据CD4^-CD8^-胸腺细胞上Hh信号的Smo分子的表达确定α₁胸腺肽在此剂量加快了胸腺细胞的成熟。结论:α₁胸腺肽能加快CD4^-CD8^-胸腺细胞向CD4⁺ CD8⁺阶段的发展。     

灵芝孢子对2型糖尿病大鼠肾脏Cyt-C和线粒体钙的影响

目的观察灵芝孢子对2型糖尿病大鼠肾脏组织细胞色素C（Cyt-C）及线粒体钙的影响。方法将清洁级Wistar大鼠50只。雌雄各半，随机分成3组（正常组、模型组、灵芝孢子组）。模型组及灵芝组以25mg／kg的剂量一次性腹腔注射链尿佐菌素（STZ），正常对照组腹腔注射等量柠檬酸钠一柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2wk后，进行糖耐量试验，模型组和灵芝组以糖耐量异常者保留，并改喂高脂高糖饮食，灵芝组另加灵芝孢子（250mg／ks／d）持续10wK。动物均单独喂养，实验结束前一天做糖耐量试验，取肾脏检测肾脏组织胞色素C、线粒体钙的水平。结果模型组肾脏组织线粒体Cyt-C、线粒体钙均显著低于对照组和灵芝孢子粉组（P〈0．05），胞质Cyt-C显著高于对照组和灵芝孢子粉组（P〈0．05）。结论灵芝孢子对糖尿病大鼠肾脏组织具有保护作用。     

戊四氮致痫大鼠脑组织NT-4的变化及百里香与薄荷精油的干预作用

目的观察戊四氮致痫大鼠脑组织神经营养因子-4（Neurotrophin-4,NT-4）的变化,利用百里香与薄荷精油制备雾化吸入剂进行干预治疗,研究癫痫的发病机理及精油的作用机制。方法健康雄性Wistar实验大鼠40只,随机分为正常对照组、癫痫模型组、精油治疗I组、精油治疗Ⅱ组、每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮（PTZ）腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化检测皮质区NT-4的变化。结果实验性癫痫大鼠模型制作成功,精油组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,精油组大鼠潜伏期劈显延长,但持续时间之间的差别没有显著性。免疫组化检测实验结果表明：癫痫模型组大脑皮质NT--4含量比正常对照组增加,差异显著具有统计学意义性（P〈0．05）;精油组NT-4含量比癫痫模型组增加,差异显著有统计学意义（P〈0．01）。结论精油能够增强NT-4的表达,减轻癫痫发作时神经系统的损伤,可能有抗癫痫作用。     

雌激素对大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的调节

目的：研究雌激素对大鼠主动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的影响，以探讨雌激素对心血管系统保护作用的机制。方法：对30只雌性大鼠随机分为三个组，每组10只，去卵巢组（A组）、去卵巢＋雌激素组（B组）、假手术组（C组）。正常饮食2个月后处死大鼠，测雌激素，主动脉匀浆血红素氧合酶及一氧化碳含量。结果：同假手术组相比，去卵巢大鼠主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显降低，在补充适量的雌激素后，主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显上升，结论：雌激素可以调节大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系，可能是其对心血管系统具有保护作用的机制。     

青春期2型糖尿病大鼠血清雌激素和卵巢颗粒细胞凋亡的变化

目的 探讨2型糖尿病对青春期大鼠卵巢组织的影响及其可能的机理.方法 观察青春期2型糖尿病模型大鼠卵巢组织的形态结构的变化,并测定血清雌激素的含量.原位细胞凋亡标记检测卵巢颗粒细胞凋亡.结果 糖尿病组血清雌激素明显下降(P＜0.05),卵巢各级卵泡中颗粒细胞及卵泡膜细胞凋亡明显增加(P＜0.05).结论 糖尿病可导致青春期2型糖尿病模型大鼠血清雌激素水平降低,从而诱导卵巢中各级卵泡的颗粒细胞及卵泡膜细胞发生明显的凋亡.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的调节

目的：观察使用灵芝孢子粉后，癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区谷氨酸和1一氨基丁酸的含量及神经元形态学改变。 方法：实验于2005-08在佳木斯大学基础医学院完成。选择健康雄性wistar大鼠30只（鼠龄12周），随机分为3组，空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉组，每组10只。采用戊四氮腹腔注射制作大鼠慢性点燃模型，癫痫模型组采用戊四氮腹腔注射＋生理盐水灌胃；灵芝孢子粉组采用戊四氮腹腔注射＋灵芝孢子粉灌胃；空白对照组采用生理盐水腹腔注射＋生理盐水灌胃。腹腔注射剂量为35mg／kg，灌胃剂量为150mg／kg，1次／d，持续28d。每次注射后观察大鼠60min，记录癫痫发作情况。惊厥发作评分标准：0级，没有行为上的发作；Ⅰ级，节律性点头或头部颤搐；Ⅱ级，阵挛性咀嚼；Ⅲ级，头部颤搐加前肢阵挛性抽搐；Ⅳ级，袋鼠姿势（上身直立）；Ⅴ级，跌倒；Ⅵ级，强直性惊厥。凡显示连续5次Ⅱ级以上惊厥的大鼠为达到点燃标准。点燃后断头取脑，行免疫组化染色观察各指标含量变化及神经元形态学改变。显微镜观察显示棕黄色颗粒者为阳性。结果：实验过程中，无动物死亡，全部进入结果分析。①灵芝孢子粉组和癫痫模型组所有大鼠均有连续多次的Ⅲ～Ⅴ级癫痫发作，均达到癫痫模型点燃标准。②免疫组织化学染色后，空白对照组大脑皮质谷氨酸免疫反应阳性细胞密集分布于各层，海马谷氨酸免疫反应阳性细胞主要分布在海马回的锥体细胞层和齿状回的颗粒层。谷氨酸阳性神经元胞体呈圆形、椭圆形或不规则形，谷氨酸阳性反应产物为棕黄色，呈细颗粒状。癫痫模型组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显增多，差异具有显著性[（206±41），（96±12）个／张，P〈0．05]；[（164±41），（69±14）个／张，P〈0．05]。灵芝孢子粉组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数减少，差异具有显著性[（108±23），（206±41）个／张，P〈0．05]；[（100±12），（164±41）个／张，P〈0．05]。③免疫组织化学染色后空白对照组大脑皮质γ-氨基丁酸有较多分布，浅层尤为明显。大鼠海马回和齿状回均可见γ-氨基丁酸阳性细胞散在分布γ-氨基丁酸阳性神经元胞体呈圆形，胞浆均匀深染。癫痫模型组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显减少，差异具有显著性[（69±16），（149±21）个／张，P〈0．05]；[（47±9），（108±10）个／张，P〈0．05]；灵芝孢子粉组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数增多，差异具有显著性[（113±17）（69±16）个／张，P〈0．05]；[（80±11）（47±9），个／张，P〈0．05]。 结论：灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸谷氨酸的含量，降低病变神经元兴奋性以达到抗癫痫作用。同时还能增强抑制性氨基酸氨基丁酸的表达，使神经元兴奋性减弱，抑制癫痫的发作，从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤，所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

中频交变磁场照射后小鼠的行为学变化

目的:目前电磁辐射对生物体行为学方面的研究还很薄弱,设立不同磁场的强度和不同照射的周期,观察中频领域磁场照射对小鼠的自主活动和学习记忆的影响。方法:实验于2007-05-10/06-15在清华大学医学院和中国医学科学院药用植物研究所完成。①实验材料:磁场发生装置:中频交变磁场发生装置由清华大学工程物理系医学物理与工程研究所自主研发,可产生频率为40kHz,场强为28.8A/m,28.8kA/m的中频交变磁场。自主活动测试箱:中国医学科学院药用植物研究所提供,为一可封闭的金属箱,内置摄像头。4只黑色塑料测试桶分别置于箱子四角。水迷宫测试箱:中国医学科学院药用植物研究所提供。②实验动物及方法:将80只小鼠随机分为不同场强照射组和对照组。强磁场照射1组:11.6kA/m/40kHz,1h/d,连续照射7d。强磁场照射2组:11.6kA/m/40kHz,2h/d,连续照射7d。强磁场照射3组:11.6kA/m/40kHz,2h/d连续照射15d。弱磁场照射组:28.8kA/m/40kHz,2h/d,连续照射7d。对照组除了未放入磁场照射,其他条件与照射组一致。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。③实验评估:观察其一般活动的改变,并采用自主活动测试箱和水迷宫测试箱进行测试,观察各组小鼠的自主活动和学习记忆的改变。结果:①一般行为观察:与对照组小鼠对比,经过中频交变磁场照射过的各组小鼠活跃度减低,毛色较差。强磁场照射3组(145G,2h/d,连续15d)于第11天和13天分别死亡1只。②自主活动检测结果:强磁场照射2,3组小鼠的运动路程、运动速度、运动时间明显低于对照组(P<0.05)。③水迷宫测试结果:在学习记忆检测阶段撤掉平台,发现各组动物2min内穿越平台原来所在象限的次数没有明显差别(P>0.05)。结论:中频交变磁场照射会给小鼠的自发活动造成一定影响,对学习记忆没有影响。     

戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑组织NO和NOS变化及灵芝孢子粉干预

癫痫是一种原因不明的疾病,而传统的抗痫剂治疗效果不太理想且具有一定的毒副作用。在有关灵芝孢子粉的基础和临床研究资料中,发现灵芝孢子粉具有免疫调节、清除自由基、提高机体耐缺氧能力、保护神经系统等作用[1]。NO与NOS作为脑血管舒缩主要调节因子在脑缺血再灌注损伤     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑海马区NCAM-1表达影响的研究

目的：通过检测灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致癫痫大鼠脑海马神经细胞黏附分子1（NCAM-1）表达的影响,进一步探讨灵芝孢子粉对减轻癫痫症状的机制。方法：健康雄性Wistar大鼠30只．随机分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组,每组10只。模型组和用药组复制癫痫模型。采用Western—blot方法检测大鼠脑海马区NCAM-1的表达。结果：模型组NCAM-1表达明显高于对照组（0．85±0．07vs0．36±0．08．P〈0.01）,用药组明显低于模型组（0．54±0．07vs0．85±0．07．P〈0．01）,高于对照组（0.54±0．07vs0．36±0．08,P〈0．05）。结论：灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠NCAM-1的过度表达。从而降低NCAM-1对中枢神经系统的毒性损害。