结核分支杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗的构建及其在小鼠体内的表达

我们将结核杆菌Ag85B和MPT64编码基因用疏水甘氨酸接头 ,经过基因拼接 (geneSOEing)法融合构建DNA疫苗并研究其免疫原性 ,为进一步研究其融合基因疫苗的免疫保护作用奠定基础。材料与方法　H3 7Rv购自中国医学科学院微生物菌种保藏中心 ,重组Ag85B和MPT64纯化蛋白及多价抗血清由本教研室收藏。纯化蛋白衍生物 (PPD )标准品由成都生物制品研究所提供。BABL/c小鼠购自重庆医科大学实验动物中心。根据H37Rv标准菌株Ag85B和MPT64的编码序列 ,设计引物。P1:5′ AAGCTTATGTTCTCCCGGCCGGG 3′为Ag85B上游引物 ,下划线部分…     

神经病理性痛大鼠脊髓背角缝隙连接蛋白表达变化及鞘内注射甘珀酸的镇痛作用

目的 研究慢性神经病理性痛大鼠脊髓背角内缝隙连接蛋白家族(Cx)中Cx43和Cx32的表达变化,以及鞘内注射缝隙连接阻断剂甘珀酸（CBX）的镇痛作用。 方法 成年SD大鼠50只,分为正常对照组、假手术组和坐骨神经分支选择性损伤组(SNI)。手术前1d、术后3d、5d、10d、20d和30d,观察大鼠行为并检测机械刺激缩足反射阈值(PWMT)。15只大鼠于术后10d、20d、30d取脊髓腰段进行免疫印迹检测,另15只大鼠于术后10d、20d、30d取脊髓腰段进行免疫荧光染色,检测腰段脊髓背角内Cx43和Cx32表达的变化。有10只大鼠先进行鞘内插管,后行SNI手术,术后20d向鞘内注射生理盐水或CBX,观察大鼠PWMT的变化。 结果 SNI大鼠手术侧PWMT阈值较非手术侧或假手术组明显降低,术后20d达最低值。SNI大鼠手术侧脊髓背角内Cx43、32表达增多,明显高于非手术侧和假手术组背角。鞘内注射CBX 3h后,PWMT平均阈值由(2.5±1.0)g上升到(20.0±3.2)g,有抑制效应, 而生理盐水组则无抑制效应。 结论 脊髓背角内的缝隙连接在因外周神经损伤引起的神经病理性痛中起重要作用。     

肺部听诊必须注意的几个问题之我见

笔者拜读程显声教授＂不应忽视胸部听诊＂一文后很有感触。程教授在该文肺部听诊一节中强调：对初步的肺部听诊,如啰音、哮鸣音等,医学生和住院医师较易掌握,而高水平的肺部听诊往往很难达到,但一旦领悟和掌握,     

精囊囊肿伴左肾缺如3例报告并文献复习

目的：探讨先天性精囊囊肿的诊断及治疗方法．提高精囊囊肿的诊断和治疗水平。方法：回顾性分析3例先天性精囊囊肿患者临床资料,年龄分别为43、47、53岁。经影像学检查后分别实行开放和腹腔镜于术治疗。结果：B超、CT及MRI均提示膀胱后方囊肿、左侧肾脏缺如,膀胱镜检末寻得左侧输球管开口。1例行开放性精囊囊肿和左输尿管切除术．另2例行腹腔镜下精囊囊肿和左侧输尿管切除术。随访19～40个月．囊肿无复发。结论：精囊囊肿均伴有左侧肾脏缺如,与传统手术相比．腹腔镜手术因具有明显优点．应作为首选方式。     

次声刺激诱导原代培养大鼠星形胶质细胞释放谷氨酸的研究

摘要 目的：观察16Hz, 130dB次声刺激对原代培养的大鼠星形胶质细胞谷氨酸释放的影响,并探讨其释放机制。 方法：原代培养大鼠海马区星形胶质细胞,将其分为次声刺激组（IE group,n=6）,Gap26+次声刺激组（Gap26+IE group）,对照组（Ctrl group,n=6）。次声刺激组细胞暴露于次声舱中,分别给予15min, 30min, 60min, 90min, 120min和240min的次声刺激;对于Gap26+IE组,则在次声刺激前,选用Cx43半通道阻断剂Gap26预处理星形胶质细胞;对照组也置于次声舱,但不给予次声刺激。次声刺激频率为16Hz,强度为130dB。为了排除Gap26对谷氨酸释放的影响,还选用乱序Gap26肽段(Scrb Gap26)来预处理星形胶质细胞（Scrb Gap26+IE group,n=6）。采用免疫荧光染色测定细胞Cx43的表达情况,采用高效液相色谱（HPLC）来测定细胞外液谷氨酸浓度。 结果：次声刺激后,IE组细胞外液谷氨酸的浓度显著升高,并在刺激90min后,细胞外液谷氨酸浓度达峰值,为（4.6±0.3）nmol/ml,显著高于对照组（2.3±0.2）nmol/ml（P<0.05）,这说明次声刺激可以显著增高星形胶质细胞外液的谷氨酸含量。此外,次声刺激后,IE组细胞Cx43的表达也显著升高,刺激60mins时,Cx43平均荧光强度达到峰值,为（198±33）(AUC),显著高于对照组（P<0.05）。而对于Gap26+IE组,次声刺激后细胞外液谷氨酸浓度的升高受到抑制,90min后,细胞外液谷氨酸浓度为（3.58±0.17）nmol/ml,显著低于次声刺激组（P<0.05）。 结论：次声刺激可以诱导星形胶质细胞释放谷氨酸;Cx43半通道阻断剂Gap26抑制了谷氨酸释放,次声刺激诱导的谷氨酸释放可能是通过Cx43半通道来完成的。     

变异链球菌临床株表面相关蛋白表达差异的初步分析

目的：?探讨变异链球菌临床株在中性条件下表面相关蛋白的表达差异,进一步了解龋病的发生和发展过程。方法???在pH7.0条件下采用Homer法提取临床分离株的表面相关蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳和二维电泳（2DE）确定蛋白质表达的差异条带及位点,差异位点由基质辅助激光解析电离飞行时间（MALDI-TOF）质谱分析,并结合数据库进行检索和鉴定蛋白质。结果???经过对电泳图谱的分析发现：593号菌株存在14个高表达蛋白质位点和8个特异蛋白质位点,其中丙酮酸激酶、ABC运载体（腺苷三磷酸结合蛋白）特异表达,葡糖基转移酶高表达。结论???两菌株在中性条件下出现了某些蛋白质的高表达和特异表达,可能是致龋性存在差异的原因。     

隔离病房的建筑因素与医务人员严重急性呼吸综合征感染率之间的关系探讨

目的　探讨避免隔离病区医务人员暴发严重急性呼吸综合征 (SARS)的可能方法。方法　对 2 0 0 3年 1月 3 0日～ 2 0 0 3年 3月 3 0日 ,收治SARS的病房的建筑因素和不同病区内医务人员的被感染情况作分析。结果　A座 12楼 3 1床、15楼ICU层流病房 10床、13楼 2 7床以及B座 14～ 18层同类病房共 3 0间 ,其通风窗户面积与病房空间体积之比依次为 0、0、1∶95、1∶40 (m2 /m3) ;收治患者数依次为 1、1、1、96;患者住院时间依次为 43、168、110、12 72h ;医务人员感染率依次为 73 %、3 2 %、2 8%、2 % ,经卡方检验 ,差异有非常显著性 (P <0 0 0 1)。结论　在严密的个人防护措施前提下 ,以通风窗户面积与病房体积比值大、室内外空气流通好的病房作为收治SARS患者的隔离病区 ,可避免一线医务人员大规模暴发SARS。     

抗肿瘤血管生成理论教学体会

在抗肿瘤血管生成理论的教学过程中,通过对整体与局部的辩证治疗思维、血管正常化时间窗如何形成、抗血管生成治疗与放射治疗的联合应用、临床应用方法等方面对肿瘤学的本科生、硕士研究生、进修生进行教学。抗肿瘤血管生成理论应用于教学,提高了教学质量,促进了新的治疗方法应用,对该治疗方法的进一步发展具有重要作用。     

特利加压素与去甲肾上腺素在肝肾综合征治疗中的比较

目的 比较去甲肾上腺素与特利加压索在肝肾综合征(HRS)治疗中的效果.方法 59例Ⅰ型HRS患者中,20例接受去甲肾上腺素治疗,6～16 mg/d,治疗至肾功能逆转,最多15 d;16例接受特利加压素治疗,0.5～2 mg/4h,治疗至肾功能逆转,最多15 d;23例为安慰剂治疗(对照组).所有患者均用白蛋白10 g/d治疗.观察患者治疗前后肝功能、肾功能、电解质、存活时间.统计学处理采用t检验和X2检验.结果 治疗15d后,20例接受去甲肾上腺素治疗的HRS患者,12例肾功能逆转(60％);16例接受特利加压素治疗患者,14例肾功能逆转(87.5％);对照组23例病情较治疗前恶化;特利加压素组与其他两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).去甲肾上腺素组、特利加压素组和对照组的综合应答率分别为80％、100％和17.4％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 特利加压素、去甲肾上腺素是治疗HRS的有效药物,特利加压素疗效更佳,两者远期疗效尚不确定.     

基于纤维束示踪的空间统计方法研究进展及其应用

基于纤维束示踪的空间统计方法(TBSS)能够自动、准确地分析扩散张量数据,克服了基于体素的形态学分析在配准和平滑等过程中存在的不足,可对不同被试者的主要白质纤维束对齐、配准,从而达到较精准的组间比较,因此对脑白质异常区域定位更准确,为定量评估脑白质病变提供可靠参数,在脑科学研究和临床实践中有较好的应用前景。但TBSS方法仍存在一定局限性,有待于进一步改进。就TBSS方法的原理、计算过程及应用等予以综述。