用分子探针杂交法观测多次献血对造血系统的影响

目的建立非同位素标记的探针杂交测定外周血白细胞端粒DNA长度的方法,借此探讨无偿献血对献血者造血系统的影响。方法酚/氯仿提取基因组DNA,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳,非同位素标记的探针Southern印迹杂交,化学发光X线片曝光显示杂交谱带,积分光密度扫描计算TRF值。结果所测样本获得了较好的低背景杂交谱带,测得35～40岁无偿献血组TRF值平均为11.73kb,相应无献血史对照组平均为11.78kb。结论建立了非同位素标记的探针检测端粒DNA的方法,用上述方法初步显示了固定的长期无偿献血并未对献血者的造血系统产生负面影响。     

封闭式反应标记放射性碘化油

为了提高^125I-碘化油的标记回收率，在原有方法基础上，用50ml玻璃瓶代替无菌无热源青霉素瓶，反应时封闭瓶口，防止^125I的挥发逸出。结果表明，此法可使放射性碘的回收率由20％左右提高到86．8％，同时减少了对环境的空气污染。提示封闭式反应标记放射性碘化油是一种较好的方法。     

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目前,诊断白血病常用的是细胞形态学(M)、免疫学(I)、细胞遗传学(C)、分子生物学(M)等技术,即MICM诊断。诊断血友病常用的是临床诊断、家系调查、凝血检测和基因诊断。本文就白血病的分子标记检测和血友病的基因诊断作一简述。1白血病的分子标记检测检测白血病分子标记的常用技术主要有:(1)聚合酶链反应(PCR)具有专一性强、敏感性高、标本要求低、操作简便和快速等优点,已广泛应用于白血病等恶性肿瘤癌基因和抑癌基因的检测。(2)Southern印迹法(Southern blot)用于从胶至膜的任何形式的DNA转移,是分析DNA的基本方法。(3)反转录PCR(…     

泌尿系肿瘤基础研究的热点及中国在研究中存在的问题

随着高新技术的发展和人们对生物医学认识的不断提高和更新，近年来医学基础研究呈现出飞跃式发展。人们利用不断发展开发的新技术，对人类各种疾病的发生发展进行了深入的研究和探讨。以下就泌尿系肿瘤基础研究的热点及我国存在的问题做一简要介绍。     

丹参EST序列中SSR信息的分析及分子标记的建立

本文对从NCBI下栽的鼠尾草属11747条EST序列（其中，丹参10228条）进行分析，搜索到含SSR的序列1911条，共合有SSR2156个，出现频率为18．35％。在丹参EST—SSR中，核苷酸重复基元种类共77种。单核苷酸重复最多，出现频率为10．45％，二、三核苷酸的出现频率为3．72％、4．40％。三核苷酸重复中ACG／CTG为主要类型，占27．3％。共设计引物143对，合成13对（其中，丹参6对，Salvia fruticosa7对），在对引物、dNTP、MgCl2进行测试后，建立了合适的PCR反应体系。引物筛选发现7对引物（丹参6对，S．fruticosa 1对）对丹参基因组DNA均有良好的扩增，并对11个不同产地丹参样品进行扩增均呈现良好的多态性。本研究结果证明根据丹参EST资源建立丹参EST—SSR标记是可行的。     

GENS·2血液分析仪血涂片复检标准的制定

目的：对仪器的异常报警提示进行可信性分析，建立实验室显微镜复检标准，防止误诊误治。方法：观察4675份血液分析结果，抽取100份正常标本和900份异常标本制备血涂片，进行瑞氏-姬姆萨染色镜检。结果：血液分析仪所示结果有45．4％的标本存不同类型的报警提示，其中14．7％的标本需进行显微镜复检。Ly Blast和NRBC的报警提示真阳性率分别为6．6％和5．3％；NE Blast、Mo Blasr、ImmNE2、Variant Ly的报警提示真阳性率分别100％、100％、100％和82．1％。结论：对结果有异常报警的标本，必须认真审核报告，综合分析各项参数，筛查出需进行显微镜复检的标本，避免造成误诊误治。     

人类基因组中短串联重复序列的研究及应用现状

短串联重复序列(short tandem repeat，STR)也称做微卫星(Microsatellite)DNA。广泛存在于真核生物基因组中，具有高度的多态性，作为新一代遗传标记，STR以其独特的优势保存下来，使分子生物学方面的研究发生了翻天覆地的变化。     

胃癌腹膜转移预测和治疗进展

胃癌腹膜转移最终导致以顽固性腹水为主要临床特征的癌性腹膜炎 ,是患者死亡的最主要原因。近年来随着免疫和分子生物学技术的飞速发展 ,对胃癌腹膜转移诊治领域的研究亦甚为活跃 ,现就近年来研究新进展作一综述     

糖尿病兔模型视网膜VEGF表达的定位研究

目的研究糖尿病兔动物模型血管内皮细胞生长因子(VEGF)在视网膜中的定位。方法应用四氧嘧啶制备糖尿病兔动物模型,采用免疫荧光、免疫荧光双重标记技术,分别以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体、VEGF抗体为一抗;羊抗兔IgG-Cy3、马抗鼠IgG-FITC为二抗进行免疫荧光染色。结果在糖尿病兔动物模型视网膜中,GFAP与VEGF共同表达于视网膜Müller细胞。结论糖尿病兔模型中,视网膜Müller细胞通过表达VEGF发挥促进新生血管形成的作用。     

前列腺癌中PIM-1的表达及其临床意义

目的 探讨PIM-1在前列腺癌中的表达及临床意义。方法 逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量分析2例良性前列腺增生（BPH）和5例前列腺癌（PCa）组织标本中PIM-1mRNA表达，免疫组织化学法检测20例BPH、20例高分级前列腺上皮内瘤（HGPIN）和42例PCa组织标本中PIM-1蛋白表达水平，染色结果分为阴性、弱阳性、阳性和强阳性。结果 5例PCa组织PIM-1mRNA表达相对值分别为0．63、0．55、0．42、0．91、0．76，2例BPH中其相对值为0．26、0．27。BPH、HGPIN和PCa组织中PIM-1蛋白阴性表达率分别为60％（12／20）、20％（4／20）和2％（1／42），弱阳性表达率分别为40％（8／12）、20％（4／20）和12％（5／42），阳性列强阳性表达率分别为0（0／20）、60％（12／20）和86％（36／42），PCa中PIM-1蛋白表达水平高于HGPIN和BPH（P值均〈0．05）。PIM-1蛋白表达水平随PCa的临床分期和病理分级增高而增强，在有和没有淋巴结转移PCa组织中PIM-1强阳性表达率分别为70％（7／10）、25％（8／32），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PIM-1高表达可能与PCa发生和发展相关，PIM-1表达水平与PCa分期、Gleason评分呈正相关，可能成为PCa预后判断的肿瘤标志物。