ERK1/2信号通路介导心肌营养素1对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的探讨心肌营养素1对心肌缺氧复氧损伤的保护作用及其信号通路。方法用改良的方法培养出生1～3天的乳鼠心肌细胞,分为五组:对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧+心肌营养素1组、缺氧复氧+心肌营养素1+PD98059(ERK阻断剂)组及缺氧复氧+心肌营养素1+DMSO组。缺氧3 h,复氧3 h。MTS法测定心肌细胞存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位,二氯荧光磺双乙酸盐(DCFH-CA)检测细胞活性氧水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR检测心肌细胞促凋亡基因Bad mRNA表达,Western blot检测ERK1/2蛋白水平。结果缺氧复氧后心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平较对照组明显增加,分别是19.4%±2.3%比2.2%±0.2%及14.28±1.42比3.54±0.46(P<0.05),而心肌细胞存活率显著降低,心肌细胞线粒体膜电位下降。而心肌营养素1处理后,心肌细胞存活率明显高于缺氧复氧组,心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平显著减少,心肌细胞线粒体膜电位更高,ERK1/2磷酸化蛋白水平增加,Bad mRNA表达明显下调。心肌营养素1的这种作用能被ERK阻断剂PD9...     

葛根素对氧自由基培养的人脐静脉内皮细胞非对称型二甲精氨酸代谢的影响

目的:观察氧自由基(OFR)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生内源性一氧化氮合酶抑制剂——非对称型二甲基精氨酸(ADMA)的影响及葛根素的干预作用。方法:以黄嘌呤氧化酶作用于次黄嘌呤产生的 OFR 作用于培养的 HUVECs;并加用葛根素进行干预,以高效液相色谱法(HPLC)和经流式细胞仪检测细胞培养液中 ADMA、L-arg 和细胞内游离钙水平,并测定一氧化氮(NO)及内皮素(ET)的含量。结果:OFR 使培养液中 ADMA、ET 含量显著增加,而 NO 水平则降低,并使胞质内[Ca~(2+)]i 浓度升高;加用葛根素后,ADMA 明显减少,NO 合成增加,细胞内[Ca~(2+)]i 显著降低。结论:OFR 能通过增加 ADMA 使NO 合成减少,葛根素能通过减少 ADMA 而抑制 OFR 导致的内皮细胞功能障碍。     

慢性肝炎彩色多普勒血流成像与肝功能损害程度相关性研究

目的探讨慢性肝炎门静脉血流动力学改变的超声测值与慢性肝功能损害程度的相关性。方法对60例不同程度慢性乙型肝炎患者和60例对照组进行门静脉血流动力学改变的超声测量（门静脉内径、门静脉截面积、门静脉最大流速和门静脉充血指数）,结果与肝功能损害程度相比较：结果慢性肝炎轻度组,门静脉内径较对照组增宽、截面积增大,但差异无显著性意义（P〉0.05）,中度组、重度组门静脉内径增宽、截面积增大明显,与对照组、轻度组比较,差异有显著意义（P〈0.05）．门静脉最大流速在轻度组略减低,与对照组比较差异无显著意义（P〉0.05）,中度组重度组的门静脉最大流速明显减低,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）。CI值随着病情进展逐渐增高,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论慢性肝炎患者门静脉血流动力学参数能反映肝脏肝功能损害程度,对慢性肝炎的临床治疗评价有一定的价值。     

细胞内密度改变是肾上腺素诱导小鼠急性肺水肿的一种病理反应（英文）

 目的:研究病理条件下肺的细胞内密度改变反应。方法:以高剂量肾上腺素腹腔注射法制备小鼠急性肺水肿模型,经不连续蔗糖密度离心法测定肺组织匀浆的细胞内密度改变。定量测定肺的湿/干重比值、肝糖原含量、肝脏炎症因子IL-1β和IL-6的mRNA相对表达水平,分析急性肺水肿的发展及其病变程度。结果:经腹腔注射肾上腺素后,小鼠肺组织细胞内密度发生显著改变,其发生几率呈时间和剂量依赖性,且与肺的湿/干重比值呈正相关关系。肝脏IL-1β和IL-6的mRNA表达水平显著升高,在注射药物1 h达到高峰。结论:在肾上腺素诱导的小鼠急性肺水肿中,肺的细胞内密度改变是体内的一种病理反应。这种病理改变可能应用于药物对体内组织细胞作用的定位及其病理学研究。     

剪切修复基因XPD抑制Ox-LDL诱导人脐动脉平滑肌细胞的增殖

目的:探讨剪切修复基因——着色性干皮病D组基因(XPD)在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)促血管平滑肌细胞增殖中的作用及机制。方法:将重组质粒pEGFP-N2/XPD利用脂质体转染人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs),实验分为空白对照组、空载质粒pEGFP-N2组、重组质粒pEGFP-N2/XPD组、Ox-LDL组、Ox-LDL+pEGFP-N2组和Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD组。用MTT法和Ed U法测定各组细胞的增殖率;流式细胞术检测各组细胞周期分布;利用Western blot法检测XPD、caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果:Western blot实验结果发现,与空白对照组相比,pEGFP-N2/XPD组的XPD表达增加(P0.05),表明转染成功;MTT和Ed U检测结果显示,pEGFP-N2/XPD组的细胞增殖率较空白对照组降低(P0.05);与Ox-LDL组比较,Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD组细胞增殖明显被抑制(P0.05)。流式细胞术的检测结果显示,与空白对照组比较,pEGFP-N2/XPD组的S期细胞比例明显减少(P0.05),G0/G1期细胞比例明显增多(P0.05);与Ox-LDL组比较,Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD组的S期细胞比例减少(P0.05),G0/G1期细胞比例明显增多(P0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,pEGFP-N2/XPD组的cleaved caspase-3和Bax蛋白水平增加(P0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P0.05);与Ox-LDL组比较,Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD组的cleaved caspase-3和Bax蛋白水平增加(P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.05)。结论:XPD能抑制HUASMCs的增殖并促其凋亡,还能抑制Ox-LDL的促HUASMCs增殖作用,有可能成为抗动脉粥样硬化治疗的靶点。     

败血症休克大鼠血管L-精氨酸/一氧化氮途径的变化

目的:观察败血症休克大鼠主动脉内膜、中膜和外膜一氧化氮合成途径的改变。方法:雄性Wistar大鼠盲肠结扎并穿孔复制败血症休克模型,分别测定假手术组、早期休克组和晚期休克组大鼠主动脉内膜、中膜和外膜的亚硝酸盐(NO^-₂)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性及L-精氨酸(L-Arg)转运;免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在主动脉各层的分布。结果:早期及晚期败血症休克大鼠主动脉内膜产生的NO^-₂含量、NOS活性及L-Arg转运速率均低于假手术组,而中膜和外膜的NO^-₂、NOS活性及L-Arg转运速率则显著高于假手术组,外膜增加的程度尤为显著。免疫组织化学染色显示,败血症休克时血管中膜和外膜尤其是外膜iNOS阳性染色明显较强。结论:败血症休克时血管内膜NO合成受到抑制,而中膜和外膜NO合成显著增强,这一改变与休克状态下血管中L-Arg转运、iNOS表达及其活性的变化有关。     

建湖县新生儿听力筛查现状及早期干预措施

听力损害是目前新生儿较为常见的一种先天性异常病变，是影响新生儿今后健康成长的一个十分突出的问题。为及时掌握我县新生儿听力损害的发生规律，切实提高新生儿听力筛查质量，制定综合可行的干预措施，笔者于2005年-2007年连续3年对该县8070名新生儿进行听力筛查，现报告如下：     

参附注射液治疗慢率性室性早搏疗效观察

1998年 5月～ 2 0 0 0年 10月 ,笔者采用参附注射液治疗基础心率较慢伴频发室性早搏患者 2 5例 ,取得满意疗效。现报告如下。临床资料　 2 5例均于我院住院治疗 ,经动态心电图诊断为频发室性早搏。其中男 15例 ,女 10例 ,年龄 3 3～ 62岁 ,平均(4 8± 13 )岁。病程 <1个月 10例 ,2～ 6个月 8例 ,7～ 12个月 7例。其中高血压心脏病 4例 ,冠心病 3例 ,窦房结功能低下 7例 ,心肌炎心肌病 3例 ,Ⅱ Ⅲ度房室传导阻滞 4例 ,不明原因 4例。所有患者动态心电图示早搏多发生于频率慢或夜间睡眠时 ,2 4ｈ平均基础心率 (62± 2 1)次 /ｍｉｎ ,最慢心率…     

基于Wilson-Cleary模型的系统性红斑狼疮患者生活质量影响因素结构方程分析

目的 调查系统性红斑狼疮患者的生活质量现状及其影响因素,利用WilsonCleary模型分析各影响因素对系统性红斑狼疮患者生活质量的作用路径。方法 选取云南省第一人民医院风湿免疫科2021年12月—2022年6月收治的207例系统性红斑狼疮患者,使用患者一般情况调查表、中文版慢性病治疗功能评估-疲劳量表、Morisky服药依从性量表、医院用焦虑抑郁量表、SF-12生活质量量表及系统性红斑狼疮疾病活动性评分（SLEDAI-2000）进行调查。使用SPSS、AMOS软件进行统计分析。结果 本组患者SLEDAI-2000得分7.55±4.86分,疲劳得分39.44±7.62分,焦虑得分5.43±3.63分,抑郁得分3.95±3.36分,服药依从性得分7.10±1.20分,生活质量得分56.83±19.17分。疲劳对生活质量有直接正向预测作用（β=1.516,P<0.05）;抑郁对生活质量有直接负向预测作用（β=-1.030,P<0.05）;年龄对生活质量具有直接负向预测作用（β=-0.154,P<0.05）,SLEDAI-2000评分通过疲劳对生活质量有间接负向预测作用（β...     

人着色性干皮病D组基因对白细胞介素-6促进人血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的: 探讨人着色性干皮病D组基因(XPD)对白细胞介素-6(IL-6)促进人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖作用的影响。方法: 用脂质体转染法将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空质粒pEGFP-N2稳定转染VSMCs,然后给予1×10⁵ U/L IL-6孵育48 h。实验分为6组:(1)空白对照组;(2)pEGFP-N2组;(3)pEGFP-N2/XPD组;(4)IL-6组;(5)IL-6 + pEGFP-N2组;(6)IL-6 + pEGFP-N2/XPD组。用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白报告基因表达情况;用MTT法观察细胞增殖活力;用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;用RT-PCR和Western blotting检测XPD、Bcl-2、Bax和野生型P53(wt-P53)表达量的变化。结果: 在荧光显微镜下,可在转染了重组质粒pEGFP-N2/XPD或空质粒pEGFP-N2的细胞中观察到绿色荧光,即转染成功;MTT结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染抑制了细胞增殖活力(P<0.05),并能抑制IL-6促进VSMCs增殖的作用(P<0.05);流式细胞仪结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染引起了细胞G₀/G₁期增加(P<0.05)、S期减少(P<0.05)、凋亡率增加(P<0.01),并能抑制IL-6促进VSMCs G₀/G₁期减少、S期增加、凋亡率降低的作用(P<0.01);RT-PCR和Western blotting检测发现,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染使得XPD表达增高(P<0.05或P<0.01),同时Bcl-2表达降低,Bax和wt-P53表达增高(P<0.05或P<0.01),并能抑制IL-6促进VSMCs的Bcl-2表达增高、Bax和wt-P53表达降低的作用(P<0.05或P<0.01)。结论: XPD能抑制VSMCs增殖并促进其凋亡,并能抑制IL-6促进VSMCs增殖和降低其凋亡的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的靶点。