钠通道芋螺毒素研究进展

钠通道芋螺毒素是芋螺毒素的重要家族,由17～33个氨基酸、3对二硫键组成.它们能特异作用于神经型或肌肉型钠通道及其亚型,分属δ-、μ-、μO等类型.由于其分子量小、特异性高,是钠通道及其亚型生理、药理功能的优良探针,本身也有潜力发展成为无致瘾镇痛药.本文简要综述δ-、μ-钠通道芋螺毒素的作用机制以及结构与活性关系的最新进展.     

α-芋螺毒素构效关系的研究进展

α-芋螺毒素（α—CTX）是芋螺毒素的重要家族，由12～19个氨基酸、2～3对二硫键组成，是迄今发现的最小的神经肽类毒素。α-芋螺毒素能特异性地抑制肌肉型或神经元型的烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR），并能进一步区分不同的神经元型nAChR亚型。由于其相对分子质量小、活性高，不仅可直接开发为疗效特异的镇痛及抗癫痫等药物，还可作为研究神经生物学工具，鉴定nAChR亚型功能。本文对α—CTX研究的最新进展予以评述，着重介绍了α—CTX的作用靶位特性、构效关系及其应用进展。     

海洋生物抗癌肽研究进展

海洋生物抗癌肽研究进展戴秋云１）黄培堂黄翠芬（军事医学科学院生物工程研究所，北京１０００７１）近年来，由于肿瘤分子生物学及肽组合化学的迅速发展，肽及肽的衍生物在肿瘤化疗、免疫治疗研究中得到了广泛应用．然而天然的Ｌ－型肽易被胰酶水解，生物利用度低，随机...     

双抗体夹心ELISA法检测石头鱼毒素

目的 建立石头鱼毒素neoVTX的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为该毒素的检测、中毒诊断及治疗提供依据.方法 以过碘酸钠法偶联马抗-HRP,利用双抗体夹心ELISA方法检测neoVTX.结果 该法的线性范围在磷酸盐缓冲液(PBS)中为4～512 ng/ml,线性回归方程为Y=1.676X-1.140(r2=0.9728,n=8,P＜0.0001),在血浆中检测线性范围为4～2048 ng/ml,线性回归方程为y=0.3094X-0.1208(r2=0.9907,n=10,P＜0.0001).牛血清白蛋白、卵清蛋白及人血浆对检测结果无干扰.结论 成功建立了石头鱼毒素的双抗体夹心ELISA检测方法,该法有较高的灵敏度和特异性,适用于溶液中及血浆中微量neoVTX的样品分析.     

川楝素水解与氢化还原产物的结构鉴定及其对肉毒毒素解毒作用研究

目的鉴定川楝素水解及氢化还原产物的结构,并测定其对肉毒毒素的解毒效果。方法用一定比例的稀氨水水解川楝素,用氢化铝锂还原川楝素的环氧键,然后用高效液相色谱纯化各产物,用质谱、核磁共振氢谱鉴定产物结构;解毒活性测定中,小鼠用2LD50的A型肉毒毒素攻毒,腹腔注射不同剂量的川楝素水解及氢化产物后,4 d内观察小鼠死亡情况。结果与结论除全脱乙酰基产物外,获得2个川楝素单脱乙酰基产物及全脱乙酰基并环氧键还原的新产物,这些产物的毒性及对肉毒毒素的解毒活性降低。该工作为川楝素的体内药代产物鉴定及应用奠定了一定的基础。     

马尔堡病毒GP蛋白高抗原性片段筛选及免疫性研究

目的 从马尔堡病毒GP蛋白上寻找与GP免疫原性相当的小片段用于疫苗设计,以克服全长蛋白缺陷.方法 基于GP(aa:1～681)结构及功能分区,构建3个片段[GP1△(aa:25～239)、GPM(aa:250～520)、GP2△(aa:436～648)],经原核表达后免疫小鼠,不同时间检测血清特异抗体滴度,检测脾淋巴细胞增殖指数及测定细胞因子浓度.结果 ELISA检测结果显示,GP2△组与GP混合组(GP1△+ GPM+GP2△)产生体液免疫能力相当,明显高于GP1△与GPM组(P<0.05);ConA非特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的SI值高于GP混合组(P<0.05),GP混合组特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的刺激指数(SI)值低于GP混合组(P<0.05);细胞因子检测中,GP2△组的白细胞介素2(IL-2)及干扰素γ(IFN-γ)浓度均高于对照组,低于GP混合组(P<0.05).结论 马尔堡病毒GP2△片段免疫小鼠能诱导与完整GP蛋白相当的体液免疫,同时也能诱导一定的细胞免疫, 可用来替代完整GP用于疫苗设计.     

抗HIV融合多肽CP32M的质量分析

目的建立一种适用于分析抗HIV融合多肽CP32M含量及有关物质的方法,以及测定其水分和三氟乙酸（TFA）含量的方法。方法采用高效液相色谱法（HPLC）测定CP32M原料药中CP32M的含量。色谱条件：Zor-bax XDB-C18色谱柱,含0.1%TFA的水为流动相A,含0.1%TFA的乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长214 nm,柱温25℃。采用卡尔菲休库仑滴定法测定水分含量,采用高效液相色谱法测定样品中TFA含量。结果 3批CP32M原料药中,CP32M含量分别为（98.72±0.32）%,（99.48±0.52）%和（99.51±0.31）%（按无水物计算）,总有关物质含量为1.07%～1.18%,样品中水分含量为2.99%～3.14%,TFA含量为3.89%～4.23%。结论该方法快速简便,结果准确可靠,可用于CP32M的质量分析。     

川楝素水解与氢化还原产物的结构鉴定及其对肉毒毒素解毒作用研究

目的鉴定川楝素水解及氢化还原产物的结构,并测定其对肉毒毒素的解毒效果。方法用一定比例的稀氨水水解川楝素,用氢化铝锂还原川楝素的环氧键,然后用高效液相色谱纯化各产物,用质谱、核磁共振氢谱鉴定产物结构;解毒活性测定中,小鼠用2LD50的A型肉毒毒素攻毒,腹腔注射不同剂量的川楝素水解及氢化产物后,4 d内观察小鼠死亡情况。结果与结论除全脱乙酰基产物外,获得2个川楝素单脱乙酰基产物及全脱乙酰基并环氧键还原的新产物,这些产物的毒性及对肉毒毒素的解毒活性降低。该工作为川楝素的体内药代产物鉴定及应用奠定了一定的基础。     

芋螺镇痛多肽研究进展

芋螺多肽由芋螺毒液管和毒囊内壁的毒腺所分泌,大多数芋螺多肽由10～40个氨基酸残基组成,且富含二硫键,能特异性作用于乙酰胆碱受体 (nAChR),及钙、钠、钾等多种离子通道亚型。目前已发现作用于N-型钙通道、nAChR的α9α10亚基、TTX-R钠通道、NMDA受体的芋螺多肽具有很强的镇痛活性,其中N-型钙通道抑制剂ω-MVIIA已于2004年上市。该类镇痛多肽具有相对分子质量小、结构稳定、活性及选择性高等特点。芋螺镇痛多肽不仅会成为镇痛机制等相关神经生物学研究的重要工具,也会为开发新一代无致瘾镇痛药起到重要作用。本文对芋螺镇痛多肽研究的最新进展予以评述,着重介绍芋螺镇痛多肽的作用靶位、构效关系及其应用进展。