EGFR基因靶向RNA干扰抑制卵巢癌细胞增殖的研究

目的:利用RNA干扰技术抑制卵巢癌细胞株skov3细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达及细胞的体外增殖活性。方法:根据EGFR mRNA序列设计特异性siRNA插入序列,体外合成该序列后将其定向克隆入线性化质粒pSilencerTM2.1-U6neo,以HifectinII真核转染试剂将重组质粒转染至skov3细胞中,用RT-PCR和免疫细胞化学方法分别鉴定转染前后EGFR基因在mRNA和蛋白水平表达的变化;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定转染前后细胞增殖活性的改变。结果:DNA测序证实EGFR siRNA表达载体的siRNA插入序列完全正确,该表达载体可特异性抑制EGFR基因的表达;转染后细胞的增殖受到抑制,其中第5天的抑制率达到30%(P<0.05)。结论:靶向EGFR的序列特异性siRNA真核表达载体可有效抑制skov3细胞中EGFR基因的表达和细胞的增殖。     

PCR结合反向杂交与细胞培养检测沙眼衣原体感染

目的建立聚合酶链反应(PCR)结合反向杂交技术快速检测沙眼衣原体，用于泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断。方法用聚合酶链反应(PCR)结合反向杂交技术对182例泌尿生殖道炎症病人的尿道分泌物进行沙眼衣原体检测，并与传统的细胞分离培养法的敏感性进行了比较。结果采用聚合酶链反应结合反向杂交技术检测出阳性标本52份(28．57％)，分离培养法测出阳性标本50份(27．47％)。以细胞培养法结果为金标准，聚合酶链反应结合反向杂交技术的敏感性和特异性分别为100％和98．48％，阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为96．15％、100％。结论与细胞培养法相比，聚合酶链反应结合反向杂交技术敏感而快速，是临床应用的选择之一。     

基因重组人白细胞介素21体外对NK细胞活性的影响

目的在原核系统中表达基因重组人IL-21,研究其在体外对NK细胞杀伤活性的影响。方法利用基因工程技术,获得人IL-21的编码基因,重组于表达载体pGEX4T-2中,转化E.coliDH5α进行诱导表达,纯化获得重组人IL-21,分别将0、10、20、40μg/L的IL-21与健康人外周血单核细胞共同孵育,改良的MTT法检测NK细胞对靶细胞K562的杀伤活性。结果在原核表达系统中成功表达了GST-IL-21的融合蛋白,一定剂量的纯化后IL-21(40μg/L)在体外具有增强NK细胞杀伤活性的作用。结论在大肠杆菌中表达的基因重组人IL-21在体外可增强NK细胞杀伤活性,为系统研究新型的免疫调节因子IL-21奠定基础。     

乌鲁木齐市汉族学生生长发育变化趋势的调查

目的了解乌鲁木齐市７～１７岁汉族学生３８年来机体生长发育状况及变化趋势。②方法采取随机抽样的方法，于１９５７～１９９５年对乌鲁木齐市７～１７岁汉族学生身体生长发育进行９次调查分析。③结果３８年来乌鲁木齐市汉族男、女学生身高、体重均有较大幅度的增长。汉族男生身高平均每１０年增长２．９５ｃｍ，体重增长１．９１ｋｇ，胸围增长为１．３４ｃｍ，并且身高、体重的增长均高于全国平均水平；汉族女学生平均身高、体重、胸围每１０年分别增长２．１８ｃｍ，０．８４ｋｇ，０．５０ｃｍ．④结论乌鲁木齐市汉族学生的生长发育呈现明显加速趋势     

蜂毒素与基因变构IL-2嵌合蛋白对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及对NK细胞的杀伤活性的影响

目的研究蜂毒素与基因变构IL-2（melittin-^88ArgIL-2）嵌合蛋白，在体外对入卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及对NK细胞的杀伤活性的影响。方法用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法研究已经纯化制备的melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白，在体外对入卵巢癌细胞SKOV3生长抑制的作用，对NK细胞杀伤活性的影响。结果melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白在体外能抑制入卵巢癌细胞SKOV3的生长增殖，能增强NK细胞的杀伤活性。结论melittin-^88ArgIL-2嵌合蛋白在体外具有一定的增强免疫功能和抗肿瘤活性。为其在真核细胞系统的表达、纯化、体内的生物学活性研究以及大规模制备的中试放大研究和临床前期研究奠定了基础。     

新疆不同民族学生营养状况抽样调查分析

①目的了解新疆４个民族学生营养状况及民族、城乡间的差异。②方法随机抽取新疆维吾尔自治区维吾尔族（维族），汉族，哈萨克族（哈族），柯尔克孜族（柯族）学生１８９８２名，按《全国学生体质健康调查研究》手册要求进行体格测量和营养状况评价。③结果４个民族男女学生中除汉族外营养不良率存在明显的民族差异（Ｈｃ＝３１６．０５～４７５．８７，Ｐ均＜０．０１）。营养不良率依次为维族＞哈族＞柯族。维、汉、哈族学生营养不良率女生均大于男生（χ２＝１９．７０～１３５．４１，Ｐ均＜０．０１）。维族学生营养不良率城市大于乡村（χ２＝６．７８，Ｐ＜０．０１）。维、汉族学生各度营养不良中学阶段大于小学阶段和大学阶段（Ｈｃ＝１６１．５７，Ｐ＜０．０１）。哈族学生小学阶段大于中学阶段（Ｈｃ＝１９．１０，Ｐ＜０．０１）。柯族学生在不同的学习阶段无明显的差异。④结论新疆不同民族学生营养不良状况存在明显差异     

蜂毒肽与变构hIL－2融合基因原核表达载体的构建

目的构建蜂毒肽与人变构白细胞介素－2原核表达载体,为进一步研究该融合基因而奠定基础。方法以本室构建质粒pGEX－4T-2／Melittin－IL－2（^88Arg）为模板,设计引物,用PCR定点突变的方法将IL-2部分的^125Cys突变为Ala,PCR产物与pMD18-T连接,转化大肠杆菌,小提质粒,DNA测序后再将目的片段连接于pET-15b,最后酶切鉴定。结果PCR产物542bp,构建质粒双酶切、DNA测序鉴定如预期。结论成功构建蜂毒肽与人变构白细胞介素-2原核表达载体。     

血磁疗法治疗急性脑梗塞188例临床观察

长久以来,人们一直在探索治疗急性脑梗塞的有效方法,但至今所有方法均不能达到较明显的效果,尽管溶栓治疗急性脑梗塞在最近已成为研究的热点,但是静脉溶栓效果较差且易引起颅内出血等并发症的发生,国内报道发生率4％～20％[1],虽然通过介入放射技术,超选择性动脉溶栓,疗效较好,血管再通率高,并发颅内出血少,但由于该项技术受条件限制,很难在省级以下医院开展[1,2]。目前,国内多家医院报道了血磁疗法治疗急性脑梗塞获得较好的疗效,鉴于血磁疗法治疗急性脑梗塞的较为全面系统的研究较少,因此,本文通过应用血磁疗法治疗188例急性脑梗塞患者,观察其凝血、抗凝、纤溶等指标的改变及疗效,现将结果报道如下。     

电脑妇科治疗仪治疗子宫脱垂、阴道壁膨出26例临床疗效观察

电脑妇科治疗仪是由北京普健医疗设备有限责任公司研制的 ,集阴道局部药物离子透入、磁疗、电疗、按摩等为一体的一种新型多功能治疗仪 ,笔者于 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 1年 7月运用该治疗仪治疗子宫脱垂及阴道前后壁膨出 2 6例 ,疗效满意 ,现总结如下。1　临床资料依据中国人民解放军后勤部卫生部编《临床疾病诊断依据、治愈好转标准》随机选择本院门诊病例 2 6例 ,其中子宫脱垂患者 7例 ,尿道膀胱膨出 5例 ,直肠膨出者 6例 ,阴道前后壁膨出者 8例。2　治疗方法用普健医疗设备有限公司生产的ＰＪＦＧ -1型妇科电脑治疗仪 ,将治疗探头用戊二…     

HSV-1感染对神经胶质瘤细胞NGF和BDNF表达变化的研究

目的:探讨单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)和脑源性神经生长因子(BDNF)的表达变化。方法:采用RT-PCR法检测HSV-1糖蛋白D(gD)基因扩增,RT-PCR法和Westernblotting法检测正常培养和感染HSV-1的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF和BDNF。结果:HSV-1可感染U251细胞;正常U251细胞可表达NGF和BDNF;HSV-1感染U251细胞后,NGF和BDNF在感染后第6小时达高峰,之后随感染时间延长逐渐降低。结论:HSV-1可诱导U251细胞中的NGF和BDNF表达异常。