小干扰RNA技术在胃肠肿瘤中的应用

小干扰RNA（siRNA）技术是具有高效性、高特异性和高成功率的基因敲除技术。近年来由于胃肠肿瘤发病率的提高,该项技术已广泛应用于胃肠肿瘤的基因研究、早期诊断、发生发展以及浸润转移和化疗药物耐药性逆转等领域。     

经颅视神经管减压术治疗视神经损伤

视神经减压术是对创伤性视神经管骨折、视神经挫伤的必要治疗措施,其具体方法有多种,如经眶缘-筛前-筛后入路减压;鼻外侧开筛减压;鼻窦内窥镜减压及经颅视神经管减压术等。后一方法大量报道较少,随着人们对视神经损伤认识的提高及显微神经外科技术的成熟,经颅视神经管减压术的优点及效果将逐渐被人们认识和接受。我院自1995-03~2004-12共行经颅视神经管减压术治疗视神经损伤13例,现报告如下。1资料和方法1.1病例选择:本组男10例,女3例;年龄14~43岁,平均29.3岁。其中右眼伤9例,左眼伤4例。外伤至手术时间2~10 d,平均4.1 d。致伤原因,车祸9例,…     

原发性腹膜后肿瘤的诊治

目的 探讨原发性腹膜后肿瘤(PRT)的诊断方法和手术经验.方法 回顾性分析1987年1月至2006年12月经手术治疗的153例PRT患者,分析总结其影像学特点、病理学类型、手术治疗等临床资料.结果 良性肿瘤49例,恶性肿瘤104例,均经手术治疗且病理证实.良性肿瘤完整切除45例(91.8%),部分切除3例,探查活检1例:恶性肿瘤完整切除64例(61.5%),部分切除17例,探查活检23例;手术中联合脏器切除共23例,其中良性肿瘤2例,恶性肿瘤21例.本组无手术死亡病例.结论 影像学检查对PRT术前诊断和手术切除范围有重要意义,完整切除肿瘤是治疗的关键因素.再次手术仍是治疗PRT的有效手段.良好的术前准备和受累器官的联合切除可以提高PRT切除率和治愈率.     

近端胃大部切除后两种消化道重建术式的比较

目的:探讨近端胃癌行近端胃大部切除后理想的消化道重建方式。方法:1995年~2006年对145例近端胃癌行根治性近端胃大部分切除后随机采用两种常用的消化道重建术式:食管与胃直接吻合73例(吻合组);食管与胃之间空肠间置72例(间置组)。对两种重建术的手术时间、术中出血量、术后并发症及术后1年生活质量、反流性食管炎及营养指标进行了比较。结果:与吻合组比较,间置组手术时间显著延长(P<0.01),但术中出血量、术后并发症发生率两组间无显著差异,术后1年间置组生活质量优于吻合组,反流性食管炎显著减少(P<0.01),而营养状态两组间无显著差异(P>0.05)。结论:食管残胃间空肠间置是近端胃大部分切除后较为合适的消化道重建术式。     

PTEN低表达增加胃癌曲妥珠单抗的耐药性

目的:明确PTEN活性和胃癌曲妥珠单抗耐药性的关系。方法:用Western blot方法检测胃腺癌细胞株中HER2蛋白、PTEN蛋白、PI3K蛋白、AKT蛋白的表达;用CCK-8方法检测曲妥珠单抗对HER2阳性/PTEN野生型NCI-N87细胞的生长抑制作用;构建PTEN siRNA载体并将其PTEN siRNA载体感染HER2阳性/PTEN野生型NCI-N87细胞,建立稳定表达PTEN siRNA的细胞株N87-PD和阴性对照N87-NC,用Western blot验证其表达水平;同时用CCK-8验证曲妥珠单抗对各组细胞生长的影响。结果:Western blot结果显示,NCI-N87细胞的HER2表达水平高于MNK-7细胞。CCK-8检测表明,随着药物浓度的增加,细胞存活率持续呈下降趋势。三种siRNA中以siRNA-1对PTEN mRNA的干扰效果最优,选择siRNA-1进行后续实验。实时定量PCR法测定最终病毒滴度为1.56×109/ml（siRNA-1）和1.62×109/ml（NC）。PTEN siRNA对NCI-N87细胞的PTEN蛋白表达有明显的下调作用且N87-PD细胞中磷酸化AKT蛋白水平显著高于对照组细胞N87-NC;曲妥珠单抗作用72h后,CCK-8测定N87-NC细胞存活率显著下降,而N87-PD细胞存活率与阴性对照组细胞无显著差异。结论:PTEN低表达增加胃癌曲妥珠单抗的耐药性。     

苯丙素甙化合物逆转大肠癌LoVo/Adr细胞多药耐药性

目的：以大肠癌LoVo/Adr耐药株为实验对象,观察苯丙素甙（PPG）化合物逆转多药耐药（MDR）作用及可能机制.方法：采用MTT法检测PPG对LoVo细胞和LoVo/Adr细胞增殖的影响.用PPG小于IC10（存活率〉90%）的剂量进行耐药逆转试验,确定半数抑制浓度（IC50）并计算逆转倍数.流式细胞术检测PPG对LoVo/Adr细胞阿霉素（ADR）的摄入影响;荧光显微镜观察PPG对ADR在细胞中分布的影响.结果：当PPG浓度为80,160mg/L时,LoVo细胞存活率分别为（69.34±3.48）%,（30.15±1.86）%;LoVo/Adr细胞分别为（67.89±2.87）%,（34.96±2.14）%,提示PPG具有抑制细胞增殖作用且具有一定的量效关系（P〈0.05）.当PPG浓度小于40mg/L时,LoVo/Adr,LoVo细胞存活率均大于90%;PPG浓度为20,40mg/L时,逆转倍数分别为5.24,9.78.ADR主要分布在LoVo/Adr细胞胞质区,加用PPG后,胞质区荧光强度从2.04±0.70升至2.35±0.87,摄入能力显著增强（P〈0.05）.结论：PPG具有抗肿瘤、逆转耐药作用,PPG通过增加LoVo/Adr细胞对ADR的摄入及细胞胞质区积聚是其逆转耐药机制之一.     

苯丙素甙逆转大肠癌耐药与凋亡的关系

目的: 探讨苯丙素甙化合物逆转大肠癌耐药与凋亡的关系.方法: 实验分3组: LoVo/Adr细胞组(空白对照组);LoVo/Adr细胞+PPG 40 mg/L组(实验组);LoVo/Adr细胞+VP 5 mg/L(阳性对照组). 采用MTT法检测苯丙素甙对LoVo/Adr细胞的耐药性;流式细胞仪分析苯丙素甙对大肠癌耐药LoVo细胞的凋亡的作用;通过检测pNA量观察苯丙素甙对LoVo/Adr细胞Caspase-3的活性.结果: 苯丙素甙可降低阿霉素对LoVo/Adr细胞的IC50值, 具有逆转作用, 其逆转倍数为9.93;他还可引起LoVo/Adr细胞凋亡, 与对照组相比, 具有显著性差异(P <0.01). 经苯丙素甙作用后, LoVo/Adr细胞pNA释放量明显增加(31.75±4.34 pmol/min vs 18.45±2.39 pmol/min,P <0.01), 而同时加入Caspase-3抑制剂Z-VADFMK,pNA释放量明显低于实验组(17.69±2.68 pmol/min vs 31.75±4.34 pmol/min,P <0.01).结论: 苯丙素甙对耐药LoVo/Adr细胞具有逆转耐药作用, 通过Caspase-3途径诱导凋亡可能为其逆转耐药的机制之一.     

腹骶联合直肠癌切除术的临床应用

目的探讨腹骶联合切除术治疗低位进展期直肠癌的可行性和安全性。方法前瞻性人组2010年6月至2012年1月间兰州军区兰州总医院收治的可行局部根治性切除但又难以保留肛门的97例低位进展期直肠癌患者,按人院顺序交替分为腹会阴组（49例,行腹会阴联合切除术）和腹骶组（48例,行腹骶联合切除术）。比较两组患者的术中及术后情况。结果两组患者手术顺利,无围手术期死亡。与腹会阴组相比,腹骶组手术时间（包括第2次调整体位的时间）明显延长[（188±45）min比（143±48）min,P=0．000],非计划性前列腺或阴道损伤发生率降低[0比14．3％（7／49）,P=0．032],会阴部切口感染率降低[2．1％（1／48）比18．4％（9／49）,P=0．040]。结论腹骶联合切除术应用于中低位直肠癌患者安全、可行。     

XELOX与FOLFOX4方案治疗进展期胃癌的随机对照临床研究

目的:评价卡培他滨联合奥沙利铂方案(XELOX)与氟尿嘧啶/亚叶酸钙联合奥沙利铂方案(FOLFOX4)治疗进展期胃癌的临床疗效及不良反应.方法:54例进展期胃癌患者随机分成两组,XELOX组28例,卡培他滨1000mg/m2,口服,2次/日,第1-14天;奥沙利铂135mg/m2,静脉点滴,第1天,21天为1个周期.FOLFOX4组26例,奥沙利铂85mg/m2,静脉点滴,第1天;亚叶酸钙200mg/m2,静滴2h后予氟尿嘧啶400mg/m2,推注,后续600mg/m2持续静滴2h,第1、2天,每2周重复,4周为1周期.两组均治疗4周期以上.结果:XELOX组有效率53.57%,中位TTP 5.8个月,MST 10个月,FOLFOX4组有效率46.15%,中位TTP 5.7个月,MST 9.8个月.两组近期有效率差异无显著性.不良反应比较,手足综合征以XELOX组显著(P<0.05),III/IV级恶心呕吐发生率以FOLFOX4组显著(P<0.05),其余不良反应除腹泻外发生率以FOLFOX4组稍高,但差异无显著性.结论:XELOX方案与FOLFOX4方案治疗进展期胃癌疗效确切,不良反应能耐受,两组近期疗效相似,不良反应以XELOX组更易耐受,尤其对一般情况欠佳及老年的患者耐受性好.     

胃癌术后复发致梗阻性黄疸的挽救治疗

目的:总结胃癌术后复发引起的梗阻性黄疸的治疗。方法:回顾性分析2001-2010年我院收治的48例因胃癌术后复发所致梗阻性黄疸的资料。男性31例,女性17例。根治性切除术后42例,姑息性切除术后6例。黄疸发生于术后6个月以内、6-12个月(包括12个月)、13-24个月(包括24个月)、25个月及以上者分别为5例、14例、17例、12例。外科手术治疗12例,其中胆管空肠吻合4例,T管引流8例;经内镜放置胆道内支架7例;PTCD 17例;药物减黄治疗12例。34例经减黄治疗后行放、化疗综合治疗。结果:12例手术治疗者,2周内黄疸完全消退。7例经内镜置入内支架者,4周内黄疸完全消退率为85.7%。17例成功行PTCD患者4周内黄疸完全消退率为58.8%。12例黄疸较轻者药物治疗9例有效。全组患者中位生存期为7.5月,1年生存率为39.9%。结论:胃癌术后复发引起的梗阻性黄疸者愈后不佳;极积有效的减黄治疗可改善患者的生活质量,微创减黄可作为首选方法;对一般状态较好者,减黄后进行放、化疗综合治疗,有可能延长患者的生存期。