八肽胆囊收缩素致急性胰腺炎体外模型的建立及其研究

目的 用CCK-8建立体外急性胰腺炎模型,并在模型中观察胰腺腺泡细胞淀粉酶、胰蛋白酶活性及F-actin的分布变化. 方法用胶原酶分离的胰腺腺泡细胞体外培养,设不同浓度的CCK-8组(10~(-12)～10~(-8) mol/L)和对照组, CCK-8刺激30 min后,用淀粉酶、胰蛋白酶试剂盒检测腺泡细胞淀粉酶、胰蛋白酶活性,用激光共聚焦显微镜观察细胞内F-actin分布的变化.结果 CK-8诱导的淀粉酶分泌率呈双峰曲线,低浓度CCK-8组(10~(-12)～10~(-10) mol/L),淀粉酶分泌率呈剂量依赖,高浓度CCK-8组(10~(-9) mol/L、10~(-8) mol/L),淀粉酶分泌被抑制;10~(-10) mol/L CCK-8时,细胞内胰蛋白酶活性明显升高(P<0.05),10~(-9) mol/L后升高更为急剧;CCK-8刺激浓度达10~(-9) mol/L后,细胞内F-actin出现重新分布,近细胞顶部区域/细胞基底部侧面的比值与对照组比较,出现显著改变(P<0.05). 结论成功建立了体外AP模型,CCK-8刺激可使胰腺腺泡细胞内F-actin分布从顶部向胞浆部、基底部变化,抑制了细胞消化酶分泌,并与腺泡细胞内胰蛋白酶的过早激活相关.     

MTT法检测羟基喜树碱对兔晶体上皮细胞生长的作用

目的：检测痉基喜树碱（Hydroxy camptothecine,HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞（rabbit lens epithelial cells,PLECs)增殖的影响。方法：取2-3代的RLECs在96孔板中培养24h后，用不同浓度的HCPT分别作用24及72h，用甲基噻唑基四唑（Methylthiazolyl tetrazolium,MTT)测定法观察HCPT对RLECs增殖及贴壁的影响。结果：HCPT既能抑制RLECs的增殖，还可抑制RLECs的贴壁，24h的半数抑制量（IC50）为96.041ug/ml,72h的IC50为1.34ug/ml。结论：一定浓度的HCPT能有效抑制RLECs的生长。