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目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4 /CD8 淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价. 相似文献
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目的 :考察 1 %盐酸丁卡因滴眼液的稳定性 ,确定其有效贮存期。方法 :采用经典恒温法预测其有效期。结果 :经典恒温法[1 ] 预测室温贮存期约为 2 0d ,冰箱贮存期约为 1 1 0d。结论 :该制剂对热不稳定 ,应冷藏。 相似文献
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对韩憨的生平及其著作《韩氏医通》的学术思想进行了简要介绍,初步探讨了《韩氏医通》的辨证思路和论治特点,并选录若干原文加以分析。该书析理深入浅出,平正通达;其论证,抓住要领,一言中的;其处方用药,于平淡中出神奇,并善用异类有情之品以培本。其写作特点有三:一是每病填写医案一宗,以备考核,并借以总结成败的经验教训。二是详于论方而略于论证候。三是讲究地道药材,注重药材的炮制配伍。 相似文献
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咳嗽、咳痰是慢性支气管炎急性发作(下面简称慢支急发)病人的主要症状,属于保护性反射动作。而有效咳嗽是一种技巧,能帮助病人进行有效排痰。近五年来,我对收治的慢支急发病人在进行药物治疗的同时,教会病人咳嗽技巧,取得了良好的效果,缩短了病人住院时间。 相似文献
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维生素A(视黄醇)是机体生物合成视黄醛和视黄酸的必须饮食源性前体物质。视黄酸是一种能够有效调控多种基因表达的激素。主要影响转录。视黄醇不足或视黄酸过多均对人和动物产生不良影响.对于大多数人,维生素A长期处于适中范围内,适中范围指:边缘维生素A缺乏、维生素A正常和维生素A过多但无明显的中毒表现三种情况。调控维生素A处于适中状态的机制,目前尚不清楚,本文对这一机制进行探讨。 相似文献
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兔激素性股骨头坏死早期血管内皮细胞功能改变及中药对其影响的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨激素性股骨头坏死(GANFH)过程中血管内皮细胞功能改变的临床意义及中药促骨塑颗粒的防治作用.方法 48只健康成年新西兰大白兔随机均分为正常对照组、激素造模组、中药治疗组、中药预防组,各组于处理的2、4、6、8、12周分别测定血浆中血管性血友病因子(vWF)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)活性,并于第4、8、12周分批处死动物,取出双侧股骨头行常规病理组织学检查.结果 与正常对照组相比,激素造模组vWF从第4周升高,PAI-1从第2周升高,6-keto-PGF1α从第4周降低(P<0.05).中药预防组与正常对照组各时间点vWF、6-keto-PGF1α、PAI-1测定结果 无显著性差异,病理变化轻微.与激素造模组相比,中药治疗组第12周时vWF、PAI-1水平降低,6-keto-PGF1α水平升高(P<0.05),股骨头坏死的病理变化得到部分改善.结论 激素可通过损伤血管内皮细胞引起血栓前状态(PTS),形成血栓而导致GANFH的发生;中药"促骨塑颗粒"可保护血管内皮细胞,有效预防兔实验性GANFH,并可延缓甚至部分逆转GANFH的病理变化. 相似文献
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