胰腺癌中nm23基因的表达

目的探讨nm23基因及蛋白在胰腺癌中的表达水平及其与转移的关系.方法用Northern blot 分析、原位杂交及免疫组织化学法分别对16例正常胰腺及29例胰腺癌中的nm23基因及蛋白的表达进行检测.结果 nm23在胰腺癌组织中的表达高于正常胰腺组织,无转移的胰腺癌组织nm23表达高于有转移的胰腺癌组织.结论 nm23与胰腺癌的转移和恶化密切相关.     

siRNA干扰人胰腺癌T3细胞系KAI1基因的表达

目的 应用小分子干扰RNA(small interference RNA,siRNA)干扰KAI1基因在人胰腺癌T3细胞系的表达,为基因治疗胰腺癌打下基础.方法 针对KAI1基因CD82片段序列设计A、B、C、D 4个siRNA靶序列,构建针对KAI1基因(CD82)含siRNA片段的慢病毒载体.以脂质体2000转染T3细胞,测定病毒滴度.以空载体、含不同靶序列siRNAd1载体的病毒感染T3细胞(MOI=5),采用实时PCR方法检测CD82mRNA的表达.结果 正常对照组、空载体对照组、A靶序列组、B靶序列组、C靶序列组和D靶序列组CD82 mRNA表达量分别为1.398 ±0.242、1.311 ±0.048、0.664±0.093、0.345 ±0.032、0.641 ±0.049和0.147±0.049,各靶序列组的表达量明显低于空载体对照组(P＜0.01).结论 应用RNAi可有效抑制T3细胞KAI1基因CD82片段的表达.     

胰腺干细胞在胰腺疾病中的研究进展

重症坏死性胰腺炎和胰腺癌等胰腺疾病的治疗仍然十分困难,干细胞的研究为其治疗提供了一种可能性,但胰腺干细胞缺乏特征,分子标志物尚缺乏特异性,通过体外培养与扩增技术成功培养更多的干细胞,可能为胰腺疾病的治疗开辟新途径.因此,应该重视干细胞在胰腺疾病基础与临床中的应用价值.     

DPC4基因对人胰腺癌JF305细胞系生长抑制的初步研究

目的研究DPC4基因对人胰腺癌细胞系JF305的生长抑制作用,及DPC4基因与P21d的关系。方法采用脂质体介导法将pBK-CMV-DPC4质粒导入JF305中,经G418筛选培养获得稳定表达细胞株,采用流式细胞仪法,免疫印迹法检测上述3种细胞中DPC4的表达;同时检测P21在DPC4转染前后蛋白表达水平的变化,通过测定细胞生长曲线检测JF305转染DPC4前后生长、增殖等生物学行为的改变。结果转染pBK-CMV-DPC4的JF305细胞DPC4基因表达较前增加,而未转染及转染空质粒的细胞DPC4表达无明显改变。通过MTT法测定发现转染pBK-CMV-DPC4的JF305细胞增殖能力同未转染及转染空质粒的JF305细胞相比明显受到抑制。与未转染及转染空质粒的JF305细胞相比,转染pBK-CMV-DPC4的JF305细胞中的周期蛋白激酶抑制物P21表达明显增加。结论重组DPC4基因转染人胰腺癌细胞系JF305后,可明显的抑制其生长、增殖能力,进而使其恶性程度下降。DPC4基因可能是通过上调周期蛋白依赖性激酶抑制P21蛋白表达而抑制细胞周期,抑制胰腺癌细胞的生长。     

CD34~+细胞含量对自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化疗效的影响

目的研究分离骨髓干细胞后CD34+细胞含量对自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化疗效的影响。方法回顾性分析自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化病例41例,其中CD34+细胞含量不足5%的27例,CD34+细胞含量超过5%(含5%)的14例。分析上述病例术后2～4周的实验室检测指标。结果在CD34+细胞含量不足5%的病例中,患者术后的血清总蛋白、白蛋白(Alb)、碱性磷酸酶(ALP)和血小板(PLT)均较术前明显增高(P<0.05)。在CD34+细胞含量超过5%的病例中,患者术后的血清总蛋白、Alb较术前明显增高(P<0.05)。术前CD34+细胞含量超过5%病例组的PLT平均值[(88.357±38.454)×109/L]明显低于CD34+细胞含量不足5%的病例组[(132.590±127.260)×109/L]。结论自体骨髓干细胞移植可以有效的提升肝硬化患者血清总蛋白和Alb水平,本组病例中CD34+细胞含量的不同并未明显影响术后患者血清总蛋白、Alb的恢复水平。自体骨髓干细胞移植可能影响胆汁的排泌。两组病例脾功能亢进程度不同可能是导致患者CD34+细胞含量差异的原因。     

KAI1基因抑制人胰腺癌细胞转移的体内实验

目的研究体内直接注射KAI1基因抗胰腺癌转移作用.方法 MiaPaCaⅡ胰腺癌细胞裸鼠皮下接种后,随机分为2个大组 (接种后第10天和第21天治疗组),每组再分别瘤内注射pCMV-KAI1重组质粒100 μg,pCMV-KAI1-脂质体(50μg∶50μg)和生理盐水,每7 d注射1次,共注射3次.于第50天观察KAI1对胰腺癌生长转移影响.结果接种后10 d进行基因注射组中,KAI1治疗组和脂质复合物治疗组肿瘤体积、瘤重、肺重、肝重和肺表面转移结节数均小于对照组(P < 0.05),体积抑瘤率分别为63.79%和73.51%,瘤重抑瘤率分别为77.12%和83.26%,肺重分别为(0.33 ± 0.09)g和(0.30 ± 0.09)g,肝重分别为(1.01 ± 0.27)g和(0.99 ± 0.21)g,对照组肺肝重分别为(0.45 ± 0.09)g和(1.62 ± 0.39)g,对照组肺表面转移结节数平均为(2.33 ± 1.63)个,治疗组结节数仅为(0.5 ± 0.83)个.pCMV-KAI1治疗组与脂质复合物治疗组相比差异无显著性(P > 0.05);接种后21 d进行基因注射组中,治疗组肿瘤体积、瘤重、肺重、肺转移灶和肝重与对照组相比差异无显著性(P > 0.05).结论 KAI1基因瘤内注射具有抑制MiaPaCaⅡ胰腺癌生长及转移作用,KAI1基因对已成瘤的胰腺癌生长的抑制作用与瘤内给药时间密切相关.     

超细胃镜检查3844例临床分析

目的探讨超细胃镜检查的临床应用价值。方法 2004年5月至2012年5月间,应用FU-JINON公司生产的EG-470N5型上消化道超细电子胃镜（鼻胃镜）对3844例患者进行经鼻腔/口腔检查,其中常规内镜检查3786例,急诊内镜检查58例,并对72例患者进行了内镜下介入治疗及操作,包括止血、溶石术、息肉电切、异物取出、支架置入及放置螺旋型鼻肠管或辅助胶囊内镜检查。结果经鼻插镜3694例,经口150例,检出慢性胃炎2022例,消化性溃疡754例,食管炎310例,食管胃底静脉曲张、门脉高压性胃病184例,胃癌及残胃癌100例,Barrett食管64例,十二指肠球炎52例,上消化道息肉48例,残胃炎、吻合口溃疡及吻合口炎37例,食管癌29例等。因普通胃镜无法通过而经鼻胃镜检查明确诊断者16例,其中食管癌6例,胃癌4例,腐蚀性食管炎、贲门癌及球部溃疡并严重狭窄各2例。急诊内镜检查58例,54例明确诊断。镜下止血治疗29例,均获成功。活检594例次,诊断符合率94.2%。辅助螺旋型鼻肠管放置及胶囊内镜检查25例。溶石及息肉电切治疗各2例。10例因食管癌癌性狭窄患者均成功置入覆膜金属支架。成功取出嵌顿于食管的鱼刺4例。无消化道出血、穿孔等严重不良反应发生。结论超细胃镜检查痛苦小,患者易于接受,对常见上消化道疾病具有良好的诊断价值,通过超细胃镜尚可进行息肉电切、局部喷洒止血、支架置入及取出异物等内镜介入治疗,具有良好的临床应用前景。     

抑制KAI1诱导的自噬对胰腺癌MiaPaCa-2细胞增殖及凋亡的影响

细胞自噬是一种重要的促细胞生存途径,同时也是一种不同于凋亡和坏死的死亡方式.KAI1是缺氧目的基因,体内缺氧时亦可诱导细胞自噬[1].我们前期报道了KAI1诱导MiaPaCa-2自噬,并增加细胞的存活[2],本研究进一步探讨抑制KAI1诱导的自噬对该细胞增殖及凋亡的影响. 一、材料与方法 1.CCK-8检测细胞增殖:应用KAI1抑制剂3-MA预处理MiaPaCa-2细胞1h,以未处理组作为对照,应用100 MOI的Ad5-KAI1及Ad5 -null分别感染细胞,具体步骤参考我们前期报道[3].取转染细胞接种96孔板,培养0.5、1、2、3、4、5d后每孔分别加人10μl的CCK-8( Dojindo Molecular Technologies公司,日本)继续培养1h,在酶标仪(Themo,Germany)测定450 nm吸光值(A450).每组设3个复孔,实验重复3次,取均值.     

十二指肠腔内憩室导致急性胰腺炎反复发作一例

患者女，39岁，因上腹疼痛反复发作3年，加重3h入院。患者3年前每于饱食后出现上腹部疼痛，呈持续性胀痛，阵发加剧，向腰背部放射，胸膝卧位时略有缓解，伴轻度腹胀、恶心、呕叶，均为胃内容物，混有胆汁，无咖啡色物．尤寒战、发热、皮肤巩膜黄染等，当地医院诊断为急性胰腺炎，经禁食、胃肠减压、抑酸、抑制胰腺分泌及胰酶活性等治疗后，症状缓解。此后每于饱食或油腻饮食后上述症状反复发作，     

嗜酸细胞性胃肠炎1例

一、临床资料 患，男，24岁，因腹部疼痛反复发作1个月入院。发病无明确诱因，主要表现为上腹部及脐周间歇性钝痛不适，无规律，不放射。发作及疼痛程度与饮食、体位等无关，无恶心、呕吐、反酸、嗳气等伴随症状，但有明显的食欲不振。入院前10天开始腹痛加重，同时出现排稀水样便，每天2～3次不等，无脓血及黏液，无里急后重及肛门部下坠感，无发热。病后曾到当地医院诊治，胃镜检查诊断为浅表性胃炎、十二指肠球炎；腹部超声提示腹腔淋巴结肿大，对症治疗后症状未见改善而来我院。病后体重下降近5kg。