不同剂量过敏原对滴鼻制备急性和亚急性小鼠哮喘模型的影响

目的:评估不同剂量过敏原对滴鼻制备小鼠急性和亚急性哮喘模型的影响。方法:将不同剂量卵清蛋白(OVA)25μg、50μg、100μg连续滴鼻,建立急性和亚急性小鼠哮喘模型。使用有创小鼠肺功能仪测量各组小鼠肺功能参数;收集小鼠肺泡灌洗液计数细胞总数和细胞分类;取其肺组织常规石蜡包埋切片,进行伊红染色(HE)、刚果红染色、马松染色和过碘酸雪夫氏(PAS)染色,观察炎性细胞浸润,胶原纤维沉积、黏液分泌等指标的变化。结果:在实验第20d和24d,100μg与50μgOVA激发组小鼠气道反应性、肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性粒细胞百分比增高;小鼠肺泡、管腔、管壁及伴行动脉周围有大量炎性细胞特别是嗜酸性粒细胞浸润,支气管粘膜皱襞增多、延长,管腔内存有大量黏液性痰栓;支气管管壁及其伴行动脉周围胶原纤维沉积明显增加;气道粘蛋白染色成强阳性反应,较25μgOVA激发组和生理盐水组小鼠有明显差异。结论:采用不同剂量OVA滴鼻,成功建立了程度不同的急性和亚急性小鼠支气管哮喘模型。过敏原剂量对模型建立有重要影响,为进一步研究哮喘的发生机制和药物筛选奠定了基础。     

微型钢板治疗MasonⅡ、Ⅲ型桡骨小头骨折

2005年5月～2009年5月,我院采用切开复位微型钢板内固定治疗MasonⅡ、Ⅲ型桡骨小头骨折9例,取得满意疗效.     

家族性双足骨溶解症并右足感染1例

1病例资料 患者,女,31岁。双足无明显诱因逐渐缩小,皮肤反复破溃、流脓18年就诊,于2010年12月17日入院。患者自13岁时起出现双足皮肤破溃,先自足趾处溃烂,溢脓,逐渐出现足趾骨和跖骨骨质破坏,患足缩小畸形,在多家医院以慢性骨髓炎施治,效果不明显,足骨破坏逐渐加重。查体：右足皮肤破溃,溢脓,双小腿下段及双足肿胀,局部皮肤色素沉着,弹性差,呈橡皮样质地,双足缩短呈马蹄状畸形（见图1）,     

基底细胞样乳腺癌中Apaf-1、Caspase-9和Bax蛋白表达临床意义分析

目的:检测凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、细胞凋亡蛋白酶-9(Caspase-9)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)在基底细胞样乳腺癌(BLBC)中的表达,分析Apaf-1、Caspase-9和Bax与BLBC临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化方法检测43例基底细胞样乳腺癌(BLBC)、57例non-BLBC(非基底细胞样乳腺癌)和60例癌旁正常乳腺组织中Apaf-1、Caspase-9和Bax蛋白的表达。结果 :免疫组化检测结果显示,BLBC及non-BLBC中Apaf-1、Caspase-9和Bax的表达水平都明显低于癌旁正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05);Apaf-1在BLBC中的表达率与患者年龄无关,与肿瘤大小、淋巴结转移情况及临床分期相关,Caspase-9和Bax的表达水平和患者年龄及肿瘤大小无关,与BLBC淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05)。结论:BLBC组织低表达Apaf-1、Caspase-9和Bax,三者表达分别呈正相关(P<0.01),Apaf-1、Caspase-9和Bax可能与BLBC的发生、发展密切相关。     

大鼠T细胞受体Vβ5.2-HSP70和Vβ8.2-HSP70基因真核表达质粒的构建及表达

目的:构建含大鼠TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因的重组真核表达质粒,并检测其在体内外的表达。方法:实验于2005-10/2006-09在首都医科大学免疫学系实验室完成。①以自主构建的重组表达载体pTARGET-TCR Vβ5.2和pTARGET-TCR Vβ8.2为模板,将结核杆菌HSP70的一段保守序列P111-125设计到引物中,通过PCR的方法得到TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因片段,将其插入到真核表达载体pTARGET中,构建重组表达载体pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70。②将BALB/c小鼠48只随机分为4组,pTARGET-TCR Vβ 5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组和空质粒组肌注相应的质粒DNA100μg/次,PBS组注射PBS缓冲液100μL/次。共注射3次,每次间隔2周。于末次免疫后3d取注射部位的肌肉,用RT-PCR及免疫组化染色法检测TCR Vβ5.2/8.2-HSP70基因在注射部位的转录和表达。③将COS-7细胞分为pTARGET-TCR Vβ5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组、空质粒组和未转染细胞组,进行相应质粒转染,24h后收集细胞,用免疫细胞化学染色法检测靶基因在真核细胞内的表达。结果:①TCR Vβ5.2/8.2-HSP70基因已被正确插入到pTARGET载体中。②pTARGET-TCR Vβ5.2-HSP70组、pTARGET-TCR Vβ8.2-HSP70组小鼠免疫处的肌肉组织RT-PCR检测显示,在500～600bp和400～500bp处出现特异的扩增带,分别与TCR Vβ5.2-HSP70和TCR Vβ8.2-HSP70基因片段的大小相符,而注射空质粒组和PBS组均未见此条带。③免疫组化结果显示转染重组质粒pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70的COS-7细胞的胞质及胞膜都有明显的着染。结论:成功构建了重组真核表达质粒pTARGET-TCR Vβ5.2/8.2-HSP70,并在体内外检测到其转录和表达,为进一步进行TCR DNA疫苗治疗胶原诱导性关节炎的实验研究奠定了基础。     

"冲气上逆证"理论探讨及针灸治疗

"冲气上逆证"是冲脉之气上逆引起的一类病症,在临床较为常见.早在<黄帝内经>中就有一些关于本证的散在记载,此后经过历代医家的不断发挥,尤其是近代著名中医学家张锡纯在其著作<医学衷中参西录>中详细论证了"冲气上逆证"的病因、病机、治法、方药等,使"冲气上逆证"理论趋于完善.但是其治疗仅限于药物,并未涉及针灸治疗.考虑到本证属于冲脉为病,因此,笔者近年来在临床采用经络辨证的思路,选取公孙、气冲等穴位,运用针灸来治疗本病,收到了显著的疗效.本文就冲气上逆证的病因、病机、辨证、针灸治疗等方面做一个简要的总结和探讨,祈同道指正.     

针刺曲池透臂臑治疗儿童腺样体肥大的体会

现代医学多采用手术切除腺样体的方法治疗儿童腺样体肥大,中医保守方法治疗,既能改善患儿的症状,又能保留其腺体功能,使患儿平稳度过腺样体肥大阶段。应用针灸方法,以曲池透臂臑为主穴,根据儿童的体形选用合适的针具,并配伍列缺、太冲、丰隆等穴位,以达到调畅经脉、宣通气血、化痰散结的作用,从而使患儿腺样体减小甚至萎缩,有效缓解腺样体肥大的临床症状。     

宫颈脱落细胞HPV E6/E7mRNA、HR-HPV DNA在宫颈病变筛查中的应用

目的 探讨HPV E6/E7 mRNA与高危型孔头瘤病毒（HR-HPV） DNA在宫颈病变筛查中的应用价值.方法 对301例宫颈病变疑似病例进行宫颈脱落细胞取样,分别检测慢性宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈鳞状细胞癌中HPV E6/E7 mRNA与HR-HPV DNA的表达,比较二者在不同年龄组及病变程度中表达的差异.结果 在宫颈癌前病变及宫颈鳞状细胞癌患者中HPV E6/E7 mRNA的特异性和阳性预测值高于HR-HPV DNA（P均＜0.05）,敏感性低于HR-HPV DNA（P ＜0.05）.30岁以下与30～39岁受检者中HPV E6/E7 mRNA的阳性率低于HR-HPV DNA（P均＜0.05）.CIN2、CIN3及宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA阳性率高于慢性宫颈炎患者,且CIN3者高于CIN2者（P均＜0.05）,CIN1、CIN2、CIN3及宫颈癌患者HR-HPV DNA阳性率高于慢性宫颈炎患者（P均＜0.05）.结论 对于宫颈癌及癌前病变,HPV E6/E7 mRNA的阳性率及其诊断的特异性高于HR-HPV DNA,可作为筛查和随访的指标.     

黄精多糖对2型糖尿病大鼠SREBP-1c和SCD-1蛋白表达的影响

目的:观察黄精多糖对2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用及SREBP-1c蛋白表达情况。方法:取80只雄性大鼠高脂高糖饲料喂养2个月后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25 mg/kg制备糖尿病大鼠模型,模型成功后随机分组为:正常对照组、黄精多糖(480、240、120mg/kg)组、二甲双胍(150 mg/kg)组,各治疗组分别灌胃给予相应药物,正常组和模型组给予生理盐水,共8周实验结束后测定空腹胰岛素(FINS)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)和游离脂肪酸(FFAs);HE染色后光镜观察肝脏病理变化;Western Blot法检测SREBP-1c和SCD-1蛋白表达水平。结果:与模型组比较,黄精多糖480 mg/kg、240mg/kg剂量组FBG、TG、TC、LDL-C、FFAs水平均明显降低,HDL-C升高;HE染色显示各大鼠肝细胞脂肪变性明显减少,肝细胞排列基本规则;Western Blot结果显示SREBP-1c和SCD-1蛋白表达明显降低。结论:黄精多糖可降低糖尿病大鼠血糖、血脂,减轻肝细胞脂肪变性,其作用机制可能与降低SREBP-1c和SCD-1蛋白表达有关。     

吲哚美辛乳膏的制备及体外释放度考察

目的 制备吲哚美辛乳膏,并考察其体外释放度。方法 以吐温80、单硬脂酸甘油酯、液体石蜡、凡士林的用量为考察对象,以乳膏的外观性状及离心、耐热及耐寒试验是否分层为指标,采用L₉(3⁴)正交设计法优化乳膏处方,并采用高效液相色谱法测定乳膏在释放介质中的累积渗透量,通过小鼠热板法镇痛试验来观察乳膏的镇痛作用。结果 最佳处方：吐温80为0.45 g,单硬脂酸甘油酯为0.9 g,液体石蜡为0.9 g,凡士林为0.6 g。吲哚美辛乳膏的累积渗透量几乎随时间呈等速率增加,且乳膏有明显的镇痛作用。结论 正交试验法优选的吲哚美辛乳膏色泽均匀、质地细腻、渗透性良好、便于涂布,处方稳定。吲哚美辛乳膏的累积渗透量与时间呈良好的线性关系,方法简单可靠。